Вакцина чумная живая (Live plague vaccine). Вакцины

Фармакологическая группа:
МИБП-вакцина

Показания:
Профилактика чумы.

Побочные действия:
Вакцина слабореактогенна. Прививки могут сопровождаться как местной, так и общей реакциями, интенсивность которых зависит от индивидуальных особенностей привитых.

Международное название:

Вакцина чумная (Vaccine plague)

Торговое название:

Вакцина чумная живая сухая (Vaccinum pestosum vivum siccum)

Форма выпуска:

лиофилизат для приготовления раствора для подкожного, внутрикожного, накожного скарификационного и ингаляционного введения (флаконы) 2 мл

Описания:

Вакцина чумная живая сухая представляет собой взвесь живых бактерий вакцинного штамма чумного микроба ЕВ НИИЭГ, лиофилизированного в сахарозо-желатиновой среде с тиомочевиной или в сахарозо-желатиновой среде с глютаминовокислым натрием, тиомочевиной и пептоном или в лактозодекстриновой среде с тиомочевиной и аскорбиновой кислотой. Сухой препарат при осмотре невооруженным глазом должен иметь вид серовато-белой или желтоватой пористой массы и не содержать посторонних примесей. После добавления 0,9 %-ного (изотонического) раствора NaCl или 10 %-ного раствора лактозы препарат должен растворяться в течение 3 мин. с образованием гомогенной взвеси. Вакцина предназначается для предохранительных прививок против чумы.

Показания:

Показанием к проведению профилактических прививок является наличие эпизоотий чумы среди грызунов или возможность завоза инфекции больным человеком.

Режим дозирования:

Способы введения — вакцину применяют подкожно игольным или безыгольным методом, внутрикожно — безыгольным способом или накожно. Одна и та же серия вакцины может быть использована для любого способа вакцинации в зависимости от разведения. Прививки проводят врачи с соблюдением всех правил асептики. Под наблюдением врача прививки могут делать на фельдшерско-акушерском и фельдшерском пунктах фельдшера и опытные медсестры, получившие специальный инструктаж. Врач несет ответственность за правильный отбор лиц, подлежащих вакцинации. Перед вакцинацией прививаемых тщательно осматривают с измерением у них температуры. Проведение прививок при температуре 37град.С и выше запрещается. Все дети, подлежащие прививкам, должны обследоваться с учетом анамнестических данных (предшествующие заболевания, переносимость ранее проведенных прививок, наличие аллергических реакций на лекарственные препараты, пищевые продукты и др.). Дети с хроническими заболеваниями, аллергическими состояниями и др., проживающие в сельской местности, должны в обязательном порядке перед проведением прививки осматриваться врачом. О дне предстоящих прививок детям, посещающим дошкольные учреждения и школы, необходимо заранее оповещать родителей. Категорически запрещается проведение прививок на дому за исключением хозяйств отгонного животноводства на энзоотичной по чуме территории, где вакцинацию против чумы проводят специальные бригады вакцинаторов под руководством врача на оборудованной для этой цели машине или в одном из жилищ местного населения. Запрещается проведение вакцинации и прием больных в одном помещении. Недопустимо наличие гнойничковых заболеваний у медперсонала, проводящего прививки. Перед проведением массовых прививок каждая серия вакцины должна быть предварительно испытана на группе людей в 50 — 100 человек, равнозначной по возрасту и состоянию здоровья основному контингенту прививаемых. В дальнейшем вакцина может быть использована для массовой вакцинации, если количество средних и сильных реакций на введение не превышает соответственно 29 и 5 % для подкожного и внутрикожного введения, 1 % средних реакций для накожного метода. При проведении прививок следует учитывать, что подкожная и внутрикожная прививки вызывают более выраженную поствакцинальную реакцию, чем накожная, поэтому здоровые контингенты населения с 7 до 60 лет, не имеющие противопоказаний, можно прививать подкожным и внутрикожным методами, а детей с 2 до 7 лет, лиц старше 60 лет, женщин в первой половине беременности и кормящих прививать только накожно. Внутрикожным и подкожным безыгольным методами можно прививать здоровые контингенты с 18 до 60 лет, не имеющие противопоказаний.

Разведение и введение вакцины . Перед началом прививок тщательно просматривают ампулу (флакон) до и после разведения. Вакцина не подлежит употреблению при обнаружении в стекле трещин, хлопьев или осадка, неразбивающихся при встряхивании, а также при наличии посторонних примесей, с истекшим сроком годности, без этикеток и с недостающими сведениями на этикетках. Годную ампулу протирают ватой со спиртом и надпиливают ее шейку напильником, также предварительно протертым спиртом. В случае расфасовки вакцины во флаконах, после снятия металлического колпачка обрабатывают спиртом наружную часть резиновой пробки. Затем с помощью шприца, снабженного иглой, прокалывают резиновую пробку и вводят растворитель. В ампулу (флакон) вводят 1 — 2 мл растворителя (в зависимости от объема налитой вакцины). При необходимости большего разведения полученную взвесь отсасывают стерильным шприцем с длинной иглой и переносят во флаконы с необходимым объемом стерильного 0,9 %-ного (изотонического) раствора NaCl согласно указанию на этикетке. При этом учитывают объем изотонического раствора, внесенного в ампулу для растворения вакцины. При накожном методе вакцинации используют 0,9 %-ный (изотонический) раствор NaCl в ампулах, при внутрикожном и подкожном методах введения, в связи с большими объемами разведения, — во флаконах. Объединение содержимого нескольких ампул в одном флаконе разрешается только при вакцинации с помощью безыгольного инъектора. Вакцину разводят перед вакцинацией, закрывают стерильной ватой или марлевой салфеткой и используют в течение 2 ч. Остатки уничтожают кипячением. Для прививок используют шприцы, иглы и оспопрививательные перья, которые предварительно стерилизуют или сухим жаром в течение 1 ч. при 160град.С (для шприцев из термостойкого стекла), или в автоклаве (30 мин. при 1,5 атм), или кипячением не менее 45 мин. Время исчисляется с момента достижения соответствующей температуры или давления. Каждому прививаемому должен быть применен отдельно стерилизованный шприц, игла или перо. В шприц следует набирать только одну прививочную дозу. Запрещается использовать шприцы, иглы и перья, которыми проводили прививки вакциной БЦЖ.

Накожный способ . Для накожного применения вакцину разводят 0,9 %-ным (изотоническим) раствором NaCl в объеме, указанном на этикетке коробки с вакциной, и оставляют непосредственно в ампуле или флаконе. Для взрослого одна человеко-доза содержит 3 млрд. живых микробов в 0,15 мл. Кожу на месте введения вакцины дезинфицируют спиртом; сильно загрязненную кожу предварительно очищают бензином. Вакцину прививают на внутренней поверхности левого предплечья или наружной поверхности плеча. Вакцинацию производят следующим образом: оспопрививательным пером слегка соскабливают (до покраснения) поверхностный слой эпидермиса на одном, двух, трех (в зависимости от возраста прививаемых) участках кожи, которую предварительно очищают, как указывалось выше. Расстояние между участками 3 — 4 см, площадь каждого из них 1 — 1,5 см2. На каждый участок скарифицированной кожи пипеткой наносят по одной капле вакцины, после чего оспопрививательным пером через каждую каплю делают крестообразно 8 линейных насечек. Затем в течение нескольких секунд тщательно втирают ее в скарифицированную кожу. Насечки следует делать неглубокие, так как излишняя кровоточивость из них частично вымывает вакцину.

Подкожный шприцевой способ . Одна человеко-доза для подкожной прививки содержит 300 млн. Живых микробов в 0,5 мл. При проведении прививок перед каждым набором вакцины в шприц флакон следует встряхнуть. Вакцину вводить в область спины ниже угла лопатки строго под кожу или в левое плечо позади дельтовидной мышцы. Кожу перед введением вакцины обрабатывают так же, как при накожной вакцинации. После инъекции место смазывают 5 %-ной йодной настойкой.

Подкожный безыгольный способ . В случае необходимости проведения массовых прививок против чумы детям с 7 лет и взрослым до 60 лет подкожная вакцинация может быть проведена безыгольным инъектором. Стерилизацию всех частей инъектора проводят кипячением не менее 45 мин. или автоклавированием при температуре до 130 град.С в течение 30 мин. Однократная стерилизация обеспечивает стерильность инъектора в течение 24ч. При частой смене флаконов с вакциной, в случае непрерывного потока людей или при вынужденных перерывах в процессе проведения массовой вакцинации, инъектор подвергают дополнительной стерилизации 70град. спиртом. Во избежание свертывания остатков вакцины в инъекторе флакон с препаратом заменяют флаконом со стерильной дистиллированной водой и проводят промывку каналов головки инъектора 10 — 15 «выстрелами», соблюдая при этом меры предосторожности по предупреждению загрязнения окружающей среды вакцинным штаммом чумного микроба и меры предохранения вакцинаторов от вдыхания вакцинного аэрозоля ввиду опасности аллергизации. Затем таким же способом стерилизуют инъектор спиртом. Флакон с вакциной рекомендуется помещать на инъектор непосредственно перед выполнением инъекций прививаемым. Остатки спирта перед этим следует удалить дистиллированной водой, а объем вводимой вакцины отрегулировать на шкале инъектора в соответствии с возрастом лица, подлежащего вакцинации. Запробкованные флаконы для разведения вакцины стерилизуют сухим жаром в течение 1 ч. при 160 град.С и хранят не более 3 суток. Подготовка, порядок работы и проверка технического состояния инъектора осуществляется строго согласно техническому описанию и инструкции по эксплуатации. Вакцинацию безыгольным инъектором проводят согласно инструкции по его применению для подкожных инъекций препаратов в объеме 0,5 мл. Объем вводимого препарата меняется с учетом возраста прививаемого (см. ниже). Вводить вакцину только в область дельтовидной мышцы. Место инъекции обрабатывают так же, как при игольном способе вакцинации.

Внутрикожный безыгольный способ . Вакцинацию безыгольным инъектором проводят согласно инструкции по его применению для внутрикожных инъекций препаратов в объеме 0,1 мл. Однако человеко-доза содержит 300 млн. живых микробов. Вакцину вводят строго внутрикожно в левое плечо позади дельтовидной мышцы. Кожу перед введением вакцины обрабатывают так же, как и при других методах вакцинации. Внутрикожные безыгольные прививки сопровождаются почти во всех случаях незначительной болезненностью и воспалительной реакцией на месте введения. Сразу после инъекции на коже возникает папула диаметром до 10 мм в виде «лимонной корочки», которая рассасывается через 1 — 2 ч. Спустя 6 — 10 ч. появляется гиперемия и припухлость, которые достигают максимальной интенсивности (до 2,5 см в диаметре — слабая реакция, до 5 см — средняя реакция, свыше 5 см — сильная реакция) через 24 — 48 ч. и затем, постепенно уменьшаясь в размерах, исчезает через 6 — 7 дней. У отдельных лиц в центре припухлости может возникнуть плотная папула с переходом в пустулу с серовато-белым содержимым, которая затем покрывается корочкой, отпадающей на 8 — 10 сутки после вакцинации. На месте ее остается нежный рубчик, который впоследствии исчезает. За привитыми внутрикожным и подкожным методами необходимо обеспечить медицинское наблюдение в течение часа после иммунизации, так как в редчайших случаях у особо чувствительных лиц возможно возникновение шока.

Кратность и периодичность прививок . Вакцину прививают однократно. Она обеспечивает иммунитет длительностью до 1 года. При ежегодно практикующихся прививках одних и тех же контингентов населения ревакцинация проводится через 12 месяцев. Вакцинацию взрослого населения проводят не ранее чем через 1 месяц, детей — не ранее чем через 2 месяца после прививки другими вакцинами. Вакцинацию взрослых другими препаратами можно проводить не ранее чем через 1 месяц, а детей — не ранее чем через 2 месяца после прививки чумной вакциной.

Размеры первичной дозы. Для вакцинации и ревакцинации используют дозы: вакцинируемым взрослым и детям старше 14 лет доза вакцины (живых микробов) при подкожном способе введения — 300 млн. в 0,5 мл; при внутрикожном — 300 млн. в 0,1 мл; при накожном — 3 млрд. в 0,15 мл(3 капли глазной пипетки). Дети в возрасте от 10 до 14 лет — при подкожном способе введения — 1/2 дозы взрослого в 0,3 мл; при накожном — 3 млрд. в 0,15 мл (3 капли глазной пипетки). Дети в возрасте от 7 до 10 лет — при подкожном — 1/3 дозы взрослого в 0,15 мл; накожном — 2/3 дозы в 0,1 мл (2 капли). Дети от 2 до 7 лет при накожном способе введения-1/3 дозы в 0,05 мл (1 капля).

Побочные действия:

Нормальная реакция организма на введение препарата. Прививки вакциной чумной живой сухой могут сопровождаться общей и местной реакцией, интенсивность которых зависит, кроме индивидуальных особенностей привитых, от метода вакцинации. Накожные прививки сопровождаются главным образом местной реакцией, которая выражается в появлении на месте прививки отечности, гиперемии, мелкой везикулезной сыпи по ходу насечек, иногда инфильтрации. Реже наблюдаются лимфангоиты и регионарные лимфадениты. Местная реакция начинает проявляться через 8 — 10 ч. и достигает полного развития через 24 — 30 ч., в более редких случаях — через 48 ч. после вакцинации. Общая реакция в большинстве случаев бывает незначительной или отсутствует и может сопровождаться повышением температуры в течение 1 суток до 37,5 град.С, у 1 % вакцинированных температура может повышаться от 37,6 до 38,5град.С (средняя реакция). Местная реакция на подкожные и внутрикожные прививки сопровождается распространенной гиперемией, припухлостью, почти во всех случаях наблюдается болезненность. Реже припухают регионарные лимфатические узлы. Местная реакция начинает развиваться через 6 — 10 ч., достигает полного развития через 24 — 48 ч., исчезает через 4 — 5 дней. Общая реакция выражается в недомогании, головной боли, повышении температуры до 37,5град.С (слабая реакция), от 37,6 до 38,5град.С (средняя), от 38,6град.С и выше (сильная). Средние и сильные реакции могут наблюдаться в 29 и 5 % соответственно от общего числа вакцинированных. В редких случаях появляются тошнота и рвота. Общая реакция имеет место на 1 — 2 сутки и обычно исчезает через 1 — 3 суток после вакцинации. Для профилактики общих и местных реакций рекомендуется принимать ацетилсалициловую кислоту по 1,0 г трижды в первые и дважды на вторые и третьи сутки, а также димедрол по 0,05 г или тавегил по 1 таблетке (0,001) дважды в течение 3 суток.

Возможные осложнения при введении препарата и оказание необходимой помощи пациенту при осложнениях. В редких случаях введение чумной вакцины сопровождается значительными реакциями местного и общего характера. При чрезмерных местных реакциях целесообразно назначать внутрь антигистаминные препараты (димедрол 0,05 — 0,1). В случае шока или появления симптомов анафилактоидной реакции у привитых подкожным методом рекомендуется подкожное введение 1 мл адреналина (1: 1000) или 1 мл 5 %-ного эфедрина, или мезатона (1 % — 1,0). Показано также внутривенное введение 1 — 3 мл 10 %-ного раствора хлористого кальция, 20 — 25 мл раствора глюкозы (20 — 40 %), преднизалона (40 — 140 мг в 200 — 500 мл полиглюкина), 0,9 %-ного (изотонического) раствора NaCI с добавлением 0,3 — 0,5 мл адреналина (1: 1000), а также применение кислорода, кордиамина, коразола, кофеина и других симптоматических средств.

Противопоказакния:

Противопоказаниями к применению являются: острые инфекционные заболевания. После перенесения острых заболеваний прививки должны проводиться не ранее чем через 1 месяц после клинического выздоровления. Перенесшим инфекционный гепатит, менингококковую инфекцию прививки проводят не ранее 6 месяцев после выздоровления; активные формы туберкулеза и ревматизма; заболевания сердечно-сосудистой системы (декомпенсированные и субкомпенсированные пороки сердца, гипертония II и III степени, перенесенный инфаркт); язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки; острые и хронические заболевания почек, печени и желчного пузыря; тяжелые формы тиреотоксикоза, сахарный диабет, недостаточность надпочечников и другие болезни эндокринной системы; болезни крови и лимфоидной системы (злокачественное и резко выраженное малокровие, лейкозы, геморрагические диатезы); бронхиальная астма, астматический бронхит, эксудативный диатез и другие аллергические состояния, анафилактические реакции на пищевые, лекарственные и другие аллергены; тяжелые формы рахита и гипотрофии (II и III ст.); заболевания кожи в период клинических проявлений (экзема, нейродермит, фурункулез, распространенные гнойничковые заболевания кожи); вторая половина беременности; злокачественные новообразования, красная волчанка и другие коллагенозы; резко выраженное состояние инфантилизма; болезни нервной системы; травмы с остаточными явлениями, эпилепсия с частыми припадками, гидроцефалия в стадии декомпенсации и субкомпенсации и др. заболевания ЦНС; лечение стероидами, антиметаболитами, рентгенотерапия (прививки допускаются не ранее 6 месяцев после окончания терапии при отсутствии других противопоказаний).

Срок годности:

Срок годности вакцины, высушенной в сахарозо-желатиновой среде с тиомочевиной, — 2 года с последующим переконтролем и продлением еще на год, в сахарозо-желатиновой среде с глютаминово-кислым натрием, тиомочевиной и пептоном — 3 года с момента высушивания, с переконтролем через 3 и 5 лет и продлением его каждый раз еще на 2 года; в лактозо-декстриновой среде с тиомочевиной и аскорбиновой кислотой после контроля жизнеспособности через 6 месяцев с момента изготовления устанавливают срок хранения до 5 лет с последующим переконтролем и продлением еще на 2 года.

Условия хранения:

Вакцину хранят в темном сухом месте при температуре от -20 до +6град.С. При комнатной температуре (20 — 25град.С) вакцину можно хранить до 2-х месяцев, включая срок транспортирования.

Инструкция по медицинскому применению

лекарственного средства

Вакцина чумная живая сухая

Торговое название

Вакцина чумная живая сухая

Международное непатентованное название

Лекарственная форма

Лиофилизат для приготовления раствора для накожного введения

Состав

Одна накожная доза вакцины содержит

активное вещество - живые микробные клетки вакцинного штамма чумного микроба EV линии НИИЭГ 3 млрд м.к. в 0,15 мл растворителя - 0,9 % стерильного раствора натрия хлорида,

вспомогательные вещества: сахароза 10%, желатин 1%, глютаминово-кислый натрий 1,5%, тиомочевина 0,5%, пептон 0,05%.

Описание

Пористая масса после растворения в растворителе образует гомогенную взвесь серовато-белого цвета.

Фармакотерапевтическая группа

Бактериальные вакцины. Противочумные вакцины.

Код АТС J07AK

Фармакологические свойства

Фармакокинетика

Для вакцин не требуется оценка фармакокинетических свойств.

Фармакодинамика

Вакцина чумная живая сухая представляет собой взвесь живых бактерий вакцинного штамма чумного микроба EV НИИЭГ, лиофилизированного в сахарозо-желатиновой среде с глютаминовокислым натрием, тиомочевиной и пептоном. Для производства вакцины применяют штамм чумного микроба EV НИИЭГ океанической разновидности Y. pestis семейства Enterobacteriacea, находящегося в R-форме.

Показанием к проведению профилактических прививок является наличие эпизоотий чумы среди грызунов или возможность завоза инфекции больным человеком. Введение препарата вызывает формирование активного иммунитета против чумы. Иммунитет сохраняется до 1 года.

Показания к применению

Профилактика чумы на энзоотичной по чуме территории в следующих группах:

• лиц, работающих с живыми культурами возбудителя чумы, с зараженными лабораторными животными или производящих исследования материалов, зараженных или подозрительных на зараженность возбудителем чумы;
• ветеринарных работников, лиц, производящих убой верблюдов, транспортировку, переработку и реализацию их сырья;
• лиц, выполняющих на энзоотичной по чуме территории заготовительные, промысловые, геологические, экспедиционные, пастбищно-мелиоративные, изыскательные работы
• лиц, проживающих на энзоотичной по чуме территории, хозяйств отгонного животноводства

Способ применения и дозы

Вакцинацию проводят в плановом порядке и по эпидемическим показаниям однократно, ревакцинацию - через 12 месяцев после предыдущей прививки.

Вакцинацию проводит только медицинский персонал, прошед-ший подготовку по вакцинопрофилактике, с соблюдением всех правил асептики.

Применять строго по назначению врача во избежание осложнений!

Приготовление вакцины

Перед началом прививок тщательно просматривают ампулу до и после разведения. Вакцина не подлежит употреблению при обнаружении в стекле трещин, хлопьев или осадка, неразбивающихся при встряхивании, а также при наличии посторонних примесей, с истекшим сроком годности, без этикеток и с недостающими сведениями на этикетках. Сухой препарат при осмотре невооруженным глазом должен иметь вид серовато-белой или желтоватой пористой массы и не содержать посторонних примесей.

Развести вакцину в 0,15 мл 0,9% раствором натрия хлорида, стерильным шприцем с иглой, препарат должен растворяться в течение 3 мин с образованием гомогенной взвеси.

Не использованный остаток вакцины в ампуле должен быть немедленно обеззаражен кипячением в течение 30 минут.

Способ введения вакцины

Вакцину вводят накожным способом (скарификационный метод) на наружную поверхность средней трети плеча. Категорически запрещается вводить вакцину внутримышечно, внутривенно!

Кожу на месте введения вакцины обрабатывают 70% спиртом, после испарения спирта, стерильным скарификатором (перо) слегка соскабливают (до покраснения) поверхностный слой эпидермиса на одном, двух, трех (в зависимости от возраста прививаемых) участках кожи. Наносят стерильным шприцем на каждый участок скарифицированной кожи по одной капле вакцины на расстоянии 30-40 мм друг от друга и стерильным скарификатором делают 4 крестообразных линейных насечки длиной 10-15 мм. Насечки не должны кровоточить, кровь должна выступать только «росинками». Плоской стороной скарификатора в течение нескольких секунд тщательно втирают вакцину в скарифицированную кожу и дают подсохнуть.

Дозирование

Детям старше 6 месяцев до 6 лет и взрослым старше 60 лет

Назначают по 1 капле, т.е. 1 млрд. живых микробов в 0,05 мл

Детям старше 6 лет до 10 лет

Назначают по 2 капли, т.е. 2 млрд. живых микробов в 0,1 мл

Детям старше 10 лет до 14 лет, подросткам старше 14 лет до 18 лет и взрослым до 60 лет

Назначают по 3 капли, т.е. 3 млрд. живых микробов в 0,15 мл

Побочные реакции

Вакцина слабореактогенна. Прививки могут сопровождаться нормальной местной или общей реакцией организма на введение препарата, интенсивность которых зависит от индивидуальных особенностей привитых. Местная реакция начинает проявляться через 8 — 10 ч. и достигает полного развития через 24 — 30 ч., в более редких случаях — через 48 ч. после вакцинации. Общая реакция в большинстве случаев бывает незначительной или отсутствует. Общая реакция имеет место на 1 — 2 сутки и обычно исчезает через 1 — 3 суток после вакцинации.

Часто

В месте введения: гиперемия, отечность, мелкая, везикулезная сыпь по ходу насечек, инфильтрация

Редко

• увеличение регионарных лимфатических узлов (лимфаденит), лимфангоит

• повышение температуры тела до 37,5 0 С в течение первых суток
• тошнота, рвота

Очень редко

Повышение температуры тела выше 37,6 0 С до 38,5 0 С

Противопоказания

• острые инфекционные и неинфекционные заболевания
• активные формы туберкулеза
• ревматизм в стадии активности и другие диффузные заболевания соединительной ткани
• заболевания сердечно-сосудистой системы (декомпенсированные и субкомпенсированные пороки сердца, гипертония II и III степени, перенесенный инфаркт)
• язвенная болезнь желудка и двенадцати перстной кишки
• острые и хронические заболевания почек, печени и желчного пузыря
• болезни эндокринной системы (тиреотоксикоз тяжелой степени, сахарный диабет, недостаточность надпочечников)
• злокачественные новообразования
• злокачественные болезни крови и лимфоидной системы (злокачественная анемия, лейкозы, геморрагические диатезы)
• первичные и вторичные иммунодефициты

• в период лечения глюкокортикостероидами, антиметаболитами, радиотерапией

• бронхиальная астма и другие аллергические заболевания
• случаи анафилактической реакции на введение вакцины в анамнезе, анафилактические реакции на пищевые, лекарственные и другие аллергены
• заболевания кожи в период клинических проявлений (экзема, нейродермит, фурункулез, распространенные гнойничковые заболевания кожи)
• повышение температуры тела выше 37°С

Тяжелые формы рахита и гипотрофии (II и III ст.), резко выраженное состояние инфантилизма

Болезни нервной системы, черепно-мозговые травмы с остаточными явлениями, эпилепсия с частыми припадками, гидроцефалия в стадии декомпенсации и субкомпенсации

Детский возраст до 6 месяцев

Беременность и период лактации

Лекарственные взаимодействия

За 1-2 дня до вакцинации и на протяжении 7 дней после вакцинации следует избегать применения антибиотиков, сульфаниламидов и иммуноглобулинов, которые могут снижать эффект вакцинации. Применение кортикостероидов и иммунодепрессантов может привести к неудачам вакцинации.

Интервал между вакцинацией против чумы и введением других живых вакцин из аттенуированных штаммов должен быть у взрослых не менее одного месяца, у детей не менее 2 месяцев.

Особые указания

В связи с тем, что заболеваемость чумой имеет эпидемический характер на энзоотичной по чуме территории, рекомендуется проводить вакцинацию ежегодно в начале весны, ревакцинацию - осенью.

Врач несет ответственность за правильный отбор лиц, подлежащих вакцинации. Перед вакцинацией прививаемых тщательно осматривают с измерением у них температуры. Врач должен быть информирован о наличии у пациента иммунодефицита, аллергии или необычной реакции на предыдущую вакцинацию, а также о любом лечении, совпадающем по времени с вакцинацией. Проведение прививок при температуре 37° С и выше запрещается. Все дети, подлежащие прививкам, должны обследоваться с учетом анамнестических данных (предшествующие заболевания, переносимость ранее проведенных прививок, наличие аллергических реакций на лекарственные препараты, пищевые продукты и др.). О дне предстоящих прививок детям, посещающим дошкольные учреждения и школы, необходимо заранее оповещать родителей.

Категорически запрещается проведение прививок на дому за исключением хозяйств отгонного животноводства на энзоотичной по чуме территории, где вакцинацию против чумы проводят специальные бригады вакцинаторов под руководством врача на оборудованной для этой цели машине или в одном из жилищ местного населения. Запрещается проведение вакцинации и прием больных в одном помещении. Недопустимо наличие гнойничковых заболеваний у медперсонала, проводящего прививки. При острых инфекционных и неинфекционных заболеваниях, хронических заболеваниях в стадии обострения прививки проводят не ранее 1 мес после выздоровления (ремиссии). Перенесшим острый инфекционный гепатит, менингококковую инфекцию прививки проводят не ранее 6 месяцев после выздоровления. Прививки допускаются не ранее 6 месяцев после окончания терапии глюкокортикостероидами, антиметаболитами, радиотерапией и при отсутствии других противопоказаний.

Меры предосторожности

Врач должен быть информирован обо всех случаях побочных реакций, перечисленных в данной инструкции. У 1 % вакцинированных возможно повышение температуры от 37,6°С до 38,5°С. Для профилактики общих и местных реакций рекомендуется принимать парацетамол по 0,5 г дважды в течение 3 суток и антигистаминные препараты в соответствии с инструкциями и возрастной категории. В случае развития общих и аллергических реакций назначают симптоматическую терапию, гипосенсибилизирующие и антигистаминные препараты. Места для проведения прививок должны быть оснащены средствами противошоковой терапии.

Очаги чумы располагаются там, где обитают грызуны - носители инфекции. Болезнь характеризуется распространением в Центральной Азии, Африке, Северной и Южной Америке. В XX веке эпидемия чумы регистрировалась в Индии. В 1898-1963 годах в этой стране умерло от чумы 12 662,1 тыс. человек.

Ежегодно число заболевших чумой составляет около 2,5 тысячи человек без тенденции к снижению. По информации Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) с 1989 по 2004 год было зафиксировано около сорока тысяч случаев в 24 странах. Летальность составила 7% от числа заболевших. Плановая профилактика - необходимая мера для борьбы с недугом.

Чума: заражение, формы, симптомы и лечение

Чума — острое природно-очаговое заболевание, протекающее с исключительно тяжёлым общим состоянием. Оно характеризуется высокой летальностью заразностью. Источник инфекции - грызуны, при легочной форме - люди. Заражение происходит трансмиссивным путем (через кровь) при укусах блох. Выделяют кожную, бубонную, легочную и септическую форму.

Основные симптомы недуга:

• Лихорадка.
• Увеличение лимфоузлов.
• Поражение легких и других внутренних органов.
• Мышечные боли.
• Падение артериального давления и увеличение числа сердечных сокращений.
• Резкая слабость.
• Спутанность сознания до его потери.

Больных чумой лечат в стационаре. Выбор препаратов зависит от формы заболевания. Курс терапии антибиотиками составляет 7-10 дней. Применяют Ко-тримоксазол, Левомицетин, Стрептомицин, Тетрациклин. Также назначают массивную дезинтоксикацию (Альбумин, Гемодез, Реополиглюкин) и форсированный диурез (Фуросемид, Маннитол). В качестве симптоматической терапии используют жаропонижающие, сосудистые препараты.

Кто изобрел вакцину от чумы

Впервые вакцину, эффективную против бубонной формы, создал в начале XX века Владимир Хавкин из убитых температурой чумных палочек. Более эффективными являются препараты, полученные из живых штаммов с использованием бактериофагов. Впервые такую вакцину создала и испытала на себе в 1934 году Покровская Магдалина Петровна.

Характеристика вакцины

Вакцина чумная живая выпускается в виде однородного белого порошка во флаконах по 2 мл.

Состав подано в таблице ниже.

Действующее вещество:

Стабилизатор:

Наполнитель:

Микробные клетки под химическим воздействием потеряли вирулентность (способность вызывать заболевание). При этом сохранилась способность к размножению в месте введения, лимфатических узлах и внутренних органах. Вакцинная инфекция не сопровождается клинической картиной заболевания, но приводит к формированию иммунитета к патогенным штаммам. При повторной встрече с возбудителем организм уже имеет необходимый уровень защитных антител. Сформированный иммунитет сохраняется до года.

Показания для введения вакцины

Препарат назначается для активной профилактики чумы с 2-х лет.

В особенности применение показано:

• Лаборантам, работающим с живыми культурами возбудителя чумы, с зараженными животными или производящим исследования материалов.
• Ветеринарам и работникам, производящим убой грызунов, транспортировку, переработку и реализацию сырья.
• Лицам, выполняющим заготовительные, промышленные, геологические, экспедиционные, пастбищно-мелиоративные, изыскательные работы.
• Людям, проживающим на энзоотичной по чуме территории.

Способ применения вакцины и дозы

Существует четыре способа введения вакцины, описанные в таблице ниже.

Противопоказания для введения вакцины

Противопоказания:

• Острые инфекционные заболевания.
• Заболевания сердечно-сосудистой системы (пороки, аномалии развития).
• Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки.
• Заболевания почек, печени.
• Сахарный диабет.
• Болезни крови и лимфоидной системы.
• Вторая половина беременности.
• Бронхиальная астма.

Важно! После перенесения острых заболеваний прививки должны проводиться не ранее чем через месяц после клинического выздоровления. Перенесшим инфекционный гепатит, менингококковую инфекцию - через 6 месяцев

Побочное действие вакцины

Прививки вакциной могут сопровождаться как местными, так и общими реакциями.

В месте инъекции возникают:

• Слабовыраженная гиперемия.
• Умеренная болезненность.
• Отек и припухлость.

Системные проявления:

• Головная боль и недомогание.
• Незначительное повышение температуры тела.
• Мелкая кожная сыпь.
• Покраснение кожи.

К патологическим реакциям, которые являются опасными для жизни относятся:

• Лимфаденит - воспаление регионарных лимфатических узлов.
• Длительное повышение температуры тела выше 38 градусов по Цельсию.
• Крапивница, отек Квинке, анафилактический шок.

Совет врача! Для предупреждения развития аллергических реакций первые полчаса после прививки следует оставаться под присмотром медицинских работников

Применение вакцины

Взрослым прививку вводят однократно. Она обеспечивает иммунитет длительностью до года. Ревакцинация проводится через 12 месяцев или по эпидемическим показаниям.

Запрещается введение препарата беременным и кормящим женщинам. Вакцина оказывает тератогенное действие (приводит к аномалиям развития, врожденным уродствам и внутриутробному инфицированию).

График прививания в детском возрасте, подано ниже в таблице.

За и против введения препарата

Доктора поддерживают идею плановой вакцинации, благодаря которой уменьшилась массовость заражения чумой. В последнее десятилетие наблюдаются редкие вспышки заболеваемости. Инфекция не представляет мировой опасности.

Препарат хорошо переносится организмом, редко возникают побочные реакции после введения, в то время как сама болезнь заканчивается летально.

Взаимодействие с другими средствами для иммунопрофилактики

Допускается одновременная внутрикожная вакцинация взрослых против чумы, бруцеллеза и туляремии на разных участках наружной поверхности верхней трети плеча.

Препарат чувствительный к антибиотикам, в связи с чем прививание на фоне терапии не допускается.

Иммунизацию взрослого населения проводят не ранее чем через месяц, детей — не ранее чем через 2 месяца после прививки другими вакцинами. Вакцинацию взрослых другими препаратами можно проводить не ранее чем через месяц, а детей — не ранее, чем через 2 месяца.

Условия хранения вакцины

Правила хранения вакцины следующие:

• Температура от минус 2 до плюс 6 градусов по Цельсию.
• Запрещено замораживать ампулы с вакциной.
• При комнатной температуре от плюс 2 до 5 градусов срок хранения составляет 2 месяца.
• Перед открытием стоит проверить целостность упаковки и маркировки.
• По истечению срока годности (24 месяца) препарат подлежит утилизации.

Вакцина от чумы для собак

Для профилактики вирусных инфекционных заболеваний собакам делают прививки. Эти животные - источник инфекции для человека.

Основные правила проведения вакцинации собак:

• Прививку можно делать только здоровому псу, которому была проведена дегельминтизация за 1-2 недели до запланированной вакцинации.
• После инъекции нужно соблюдать карантинный режим: щенка не переутомлять, не простуживать и не купать.
• Делать прививки только с соблюдением срока годности, правил хранения вакцин и дозировок.

ЭПМ - препарат для иммунизации собак (фото: www.zoofarmagro.md)

Существуют моновалентные (против одного заболевания) и поливалентные (против нескольких заболеваний сразу) вакцины. В нашей стране применяются три противочумных препарата: "Вакчум", 668-КФ и ЭПМ. Вакцина ЭПМ имеет один существенный недостаток - ее можно прививать животным не моложе 3-х месяцев. Поэтому при иммунизации щенков лучше пользоваться двумя другими средствами.

Аналоги вакцины

Аналоги вакцины сходны по составу основного действующего вещества и механизму действия. Отличия заключаются в степени очистки вакцины, подбору вспомогательных компонентов и способе введения.

Перечень официально зарегистрированных аналогов:

• Вакцина для профилактики чумы (Vaccine plague).
• Вакцина чумная живая.

Индивидуальный подбор препарата стоит осуществлять вместе с лечащим врачом в соответствии с показаниями и состоянием организма.

Эта вакцина относится к числу живых вакцин, так как готовится на основе аттенуированного штамма чумного микроба EV, выделенного в 1926 г. на острове Мадагаскар от мальчика, погибшего от бубонной чумы. Вирулентность этого микроба удалось резко снизить путем пассажей на агаровых средах при температуре 18-20°С с ежемесячными пересевами в течение 5 лет. При изготовлении вакцины маточная культура вакцинного штамма, хранящегося в лиофилизированном состоянии в диапазоне температур -25°С (предпочтительно) + 6°С, после ее анимализации (пассажа через организм морской свинки) и последующей подготовки - тренажа на жидких и плотных питательных средах и проверки полноценности ее свойств - засевается на большие объемы плотной питательной среды, например, агар Хоттингера в кюветах, и выращивается в специальных автоматических культиваторах микробов (AKM-III). После инкубирования при температуре 28°С в течение 40-42 ч выросшую на поверхности среды культуру смывают средой высушивания - раствором, содержащим сахарозу, желатин, глютамат натрия, тиомочевину и пептон, взвесь бактерий EV переносят в бутыли, разводят средой высушивания под контролем оптического стандарта мутности до концентрации 60-80 млрд. микробов в 1 мл, разливают в ампулы и лиофилизируют.

Наряду с этим возможно получение биомассы вакцинного штамма на жидких средах путем его выращивания в реакторах-культиваторах. В этом случае посевную культуру вносят в 100 л стерильного бульона Хоттингера и инкубируют в условиях непрерывной аэрации и перемешивания при 28-30°С вплоть до начала стационарной фазы роста микробов, когда их число достигает 30-50 млрд. в 1 мл и перестает возрастать. Обычно это наступает после 18-24 ч выращивания. С целью ускорения темпов роста микробов их подкармливают 40% раствором глюкозы. Затем реактор охлаждают, бульонную культуру помещают в рефрижератор при 0-6°С не более чем на 48 ч, надосадочную жидкость сливают, осевшую массу микробов разводят средой высушивания до концентрации 80 млрд. микробов в 1 мл, разливают в ампулы и лиофилизируют.

После этого осуществляют контроль высушенной вакцины на:

Специальную стерильность;

Концентрацию микробов;

Число жизнеспособных микробов;

Количество человеко-доз;

Физические свойства;

Безвредность;

Иммуногенность.

Если результаты контрольных исследований удовлетворяют перечисленным требованиям, вакцину используют для прививок против чумы .

Прививки живой чумной вакциной проводят подкожно шприцем или с помощью безыгольного инъектора. Детей в возрасте до 7 лет, беременных и престарелых прививают накожно, подобно тому как прививают против оспы .

Детей, подростков и взрослых прививают однократно разными дозами, которые указаны в инструкции по применению вакцины.

Срок годности вакцины при условии ее правильной транспортировки (при температуре не выше 10°С) и хранения в сухом затемненном месте при температуре от 1 до 6°С - до 3 лет. Следует помнить, что в случае транспортировки и хранения вакцины при 20-25°С срок ее годности не превышает 2 мес.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Вакцина чумная живая ФС.3.3.1.0022.15

В замен ГФ Х, ст. 713

ФС 42-3877-99

Настоящая фармакопейная статья распространяется на вакцину чумную живую, лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций, представляющую собой живую культуру вакцинного штамма чумного микроба Yersinia pestis EV линии НИИЭГ, высушенную методом лиофилизации в стабилизирующей среде.

Вакцина предназначена для профилактики чумы и вызывает развитие специфического иммунитета продолжительностью до 1 года.

ПРОИЗВОДСТВО

Вакцинный штамм Y . pestis EV линии НИИЭГ должен обладать типичными морфологическими, культуральными и биохимическими свойствами; содержать плазмиды pFra, пестициногенности (pPst) и кальций-зависимости (pCad) с молекулярными массами » 60 , » 6 и » 47 MDa соответственно; не должен вызывать гибель морских свинок и потерю их массы при введении в дозе 15 10 9 микробных клеток (м.к.). Иммуногенность штамма по величине ЕD 50 при подкожном введении не должна превышать для морских свинок 10 3 м.к., для белых мышей – 10 4 м.к.

Перед приготовлением очередной серии вакцинного штамма Y . pestis EV линии НИИЭГ проводят его пассаж через организм морской свинки с последующим отбором типичных колоний, выросших на чашках Петри с агаром Хоттингера из посевов селезенки и регионарных лимфатических узлов.

Технология изготовления вакцины предусматривает получение посевных культур Y . pestis EV линии НИИЭГ I, II и III генераций; процесс накопления биомассы, выращенной для приготовления вакцинной взвеси с необходимой концентрацией; последующий розлив, замораживание, сублимационное высушивание, герметизацию и упаковку препарата. На стадиях приготовления посевных культур определяют рН, концентрацию микробных клеток и отсутствие посторонней микрофлоры.

В зависимости от технологии приготовления вакцины в процессе производства используются вспомогательные вещества, разрешенные для использования при производстве иммунобиологических лекарственных препаратов: сахароза, желатин, тиомочевина, декстрин, аскорбиновая кислота.

ИСПЫТАНИЯ

Описание

Пористая масса серовато-белого цвета.

Подлинность

Вакцина должна содержать чистую культуру вакцинного штамма Y . pestis EV линии НИИЭГ. Определение проводят иммунофлуоресцентным методом с помощью иммуноглобулинов чумных диагностических флуоресцирующих, в соответствии с инструкцией по применению. В мазках из препарата микробные клетки должны светиться по периферии ярко-зеленым цветом.

Время растворения

Должна полностью растворяться в течение 3 мин при добавлении 1,8 мл 0,9 % раствора натрия хлорида.

Восстановленный препарат – гомогенная суспензия серовато-белого цвета без посторонних примесей и хлопьев. Определение проводят визуально.

Время седиментационной устойчивости

Суспензия не должна расслаиваться в течение 5 мин. Определение проводят в соответствии с .

Размер частиц

Суспензия должна свободно проходить в шприц через иглу № 0840. Определение проводят в соответствии с .

рН

От 6,8 до 7,8. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с . Для испытания используют 5 образцов.

Потеря в массе при высушивании

Не более 4,0 %. Определение проводят гравиметрическим методом в соответствии с . Для испытания используют 5 образцов.

Средняя масса и отклонение от средней массы

Коэффициент вариации массы вакцины в ампулах (флаконах) должен быть не более 5 %. Определение проводят в соответствии с .

Отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов

Вакцина не должна содержать посторонних микроорганизмов и грибов. Определение проводят в соответствии с методом прямого посева на тиогликолевую среду.

В ампулу (флакон) с вакциной вносят 2 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. По 1 мл каждого образца полученной взвеси засевают в пробирки, содержащие по 20 мл тиогликолевой среды. Одну пробирку из каждого образца инкубируют при температуре от 30 до 35 о С для выявления аэробных и анаэробных микроорганизмов, другую — при температуре от 20 до 25 о С для выявления грибов. Через 5 – 7 сут из каждой пробирки производят пересев по 0,5 мл в 2 пробирки, содержащие по 10 мл тиогликолевой среды, и инкубируют при указанных выше температурах. Через 14 сут выращивания со дня первичного посева из всех пробирок делают мазки, окрашивают их по Граму, просматривают под микроскопом при увеличении К7×40.

В случае обнаружения хотя бы в одном из 10 просмотренных полей зрения кокков или грамположительных палочек препарат считается контаминированным посторонней микрофлорой.

При выявлении в мазках грамотрицательных палочек, отличающихся по морфологии от чумного микроба, готовят мазки, которые окрашивают иммуноглобулинами чумными диагностическими флуоресцирующими в соответствии с инструкцией по применению и просматривают в каждом мазке не менее 10 полей с помощью люминесцентного микроскопа. Если не все бактерии, обнаруживаемые в вакцине, дают специфическое ярко-зеленое свечение по периферии клеток, препарат считают не выдержавшим испытание.

Специфическая безопасность

Вакцина должна быть безопасной. Испытание проводят на морской свинке массой (275 ± 25) г.

Содержимое ампулы (флакона) растворяют в 1,8 мл 0,9 % раствора натрия хлорида, определяют концентрацию по методике, описанной в разделе «Специфическая активность (концентрация микробных клеток)», разводят 0,9 % раствором натрия хлорида до концентрации 15 · 10 9 м.к./мл и вводят подкожно в объеме 1 мл одной морской свинке во внутреннюю поверхность бедра.

На 6 сут морскую свинку взвешивают, подвергают эвтаназии, отмечают патологоанатомические изменения, обнаруживаемые при вскрытии. Печень, селезенку, легкие, регионарные лимфатические узлы, кровь и ткани из места введения высевают методом отпечатков на чашку Петри с агаром Хоттингера, рН (7,2 ± 0,1), с добавлением натрия сернистокислого 0,25 г на 1 л среды и на чашку Петри с агаром Хоттингера, рН (7,2 ± 0,1), с добавлением генцианвиолета 0,05 г на 1 л среды. Посевы инкубируют при температуре (27 ± 1) о С в течение 3 сут.

Вакцина не должна вызывать у морской свинки потерю массы к 6 сут после введения больше чем на 20 %, не должна вызывать видимых патологоанатомических изменений в легких — кровоизлияний, очагов воспаления, гранулем, абсцессов; в посевах крови и легких не должно быть роста чумного микроба. В месте введения допускается развитие кровоизлияния и инфильтрата подкожной клетчатки, переходящих в некроз. Во внутренних органах (селезенка и печень) допустимо развитие ограниченной узелковой реакции.

Специфическая активность

1. Концентрация микробных клеток . В препарате должно содержаться от 5 · 10 10 до 10 11 м.к. в 1 мл. Определение проводят в 3 образцах для каждой серии. Колебания результатов определений в отдельных образцах не должны превышать 5 % от средней арифметической величины.

Содержимое ампулы (флакона) растворяют в 1,8 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. В стандартную пробирку вносят 0,1 мл разведенного препарата и добавляют 0,9 % раствор натрия хлорида до достижения концентрации стандартного образца (СО) мутности (10 МЕ). Объем 0,9 % раствора натрия хлорида, использованный при разведении, учитывают при расчете концентрации микробных клеток (ОК) по формуле:

ОК = (0,1 + n ) ·10,

0,1 – объем растворенной вакцины, мл;

n – объем 0,9 % раствора натрия хлорида, использованный при разведении пробы, мл;

10 – постоянная величина.

1. Количество живых микробных клеток . Количество живых микробных клеток должно составлять не менее 25 % от общего количества микробных клеток. Колебания результатов определения в отдельных образцах не должны превышать 20 % от средней арифметической величины.

При определении количества живых микробных клеток в вакцине используют концевые химически чистые пипетки и пробирки с 0,9 % раствором натрия хлорида, которые должны быть охлаждены до температуры от 2 до 8 о С.

Для определения количества живых микробных клеток из приготовленных ранее образцов взвесей вакцины делают последовательные десятикратные разведения от 10 -1 до 10 -8 , используя для каждого разведения отдельную пипетку вместимостью 1 мл. Из пробирок с разведениями 10 -7 и 10 -8 высевают пипеткой по 0,1 мл взвеси на 2 чашки Петри с питательной средой для выделения и культивирования чумного микроба или с агаром Хоттингера со стимулятором роста (кровь гемолизированная до 1 % концентрации) или натрий сернистокислый (0,25 г на 1 л среды).

Через 72 – 96 ч инкубации при температуре (27 ± 1) о С подсчитывают количество колоний для каждого образца, принимая за 100 % количество микробных клеток, высеянных, исходя из показателя общей концентрации микробных клеток для данного образца, определенной с помощью СО мутности (10 МЕ). За количество жизнеспособных микробных клеток для каждой серии принимают среднее арифметическое определений для 3 ампул (флаконов).

Исходя из количества жизнеспособных микробных клеток в ампуле (флаконе) с вакциной рассчитывают количество доз и объем растворителя каждой серии для приготовления суспензии для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций.

Для достоверности полученных результатов параллельно используют стандартный образец вакцины чумной живой.

1. Иммуногенность . ЕD 50 вакцины для морских свинок не должна превышать 10 4 , для белых мышей — 4 ·10 4 живых микробных клеток. Испытание проводят на морских свинках массой (275 ± 25) г и на белых нелинейных мышах массой (19 ± 1) г. Вакцину разводят с таким расчетом, чтобы в 1 мл содержалось 10 9 живых м.к. Исходя из заранее определенного количества живых м.к., вакцину разводят для иммунизации морских свинок до концентраций 2 · 10 5 ; 4 · 10 4 ; 8 · 10 3 и 16 · 10 2 м.к./мл; белых мышей — до концентраций 5 · 10 5 ; 1 · 10 5 ; 2 · 10 4 и 4 ·10 3 м.к./мл. Каждую дозу препарата вводят однократно 6 животным. Морских свинок иммунизируют подкожно во внутреннюю поверхность левого бедра в объеме 0,5 мл; белых мышей – в объеме 0,2 мл дозами 8 · 10 2 , 4 · 10 3 , 2 · 10 4 и 1 ·10 5 живых м.к.

Для определения фактического содержания живых микробных клеток в иммунизирующих дозах взвесь, содержащую 8 ·10 3 м.к./мл, используемую при иммунизации морских свинок, или дозу 4 · 10 3 м.к./мл для иммунизации белых мышей, разводят до концентрации 10 3 м.к./мл. По 0,1 мл взвеси с концентрацией 10 3 м.к./мл (100 м.к.) высевают на 3 чашки Петри с одной из вышеперечисленных питательных сред и инкубируют при температуре (27 ± 1) о С в течение 48 ч. Количество выросших колоний на чашках учитывают при вычислении ЕD 50 испытуемой серии.

Подкожное заражение морских свинок проводят во внутреннюю поверхность правого бедра на 21 сут, мышей – в ту же область на 7 или 21 сут после иммунизации. Заражающая доза для иммунизированных вакциной животных составляет 200 Dcl (Dosis certa letalis = LD 100) вирулентного штамма чумного микроба, 1 Dcl которого не должна превышать 100 микробных клеток.

Подготовка заражающего штамма Y . pestis 231 должна быть указана в нормативной документации.

Для заражения неиммунизированных (контрольных) животных используют взвесь с концентрацией 50 м.к./мл в объеме 0,5 мл для морских свинок и 125 м.к./мл в объеме 0,2 мл для белых мышей, что соответствует 1 Dcl.

Для определения фактического содержания микробных клеток заражающего штамма по 0,1 мл взвеси культуры Y . pestis 231, содержащей 10 3 м.к./мл, высевают на 3 чашки Петри с агаром Хоттингера и равномерно распределяют по всей поверхности среды методом «обкатки» чашек. Посевы инкубируют при температуре (27 ± 1) ºС в течение 48 ч, после чего подсчитывают количество выросших колоний.

Наблюдение за зараженными животными ведут в течение 20 сут. Все контрольные животные должны погибнуть от чумы в течение 10 сут. Погибших животных вскрывают, берут органы и ткани (у морских свинок берут пробы из места введения, регионарных паховых лимфатических узлов, печени, селезенки, легких, верхушки сердца; у белых мышей – из селезенки), высевая их методом отпечатков на чашки Петри с агаром Хоттингера с добавлением генцианвиолета и с агаром Хоттингера — с натрием сернистокислым. Чашки Петри инкубируют при температуре (27 ± 1) ºС. Учет результатов проводят через 24 — 48 ч.

Павшими от чумы считают только тех животных, из органов которых при высеве выделяется культура Y . pestis .

ЕD 50 вычисляют по формуле:

lg ED 50 = lg D N – S · (∑L i – 0,5),

lg D N – логарифм максимальной иммунизирующей (фактической) дозы;

S – логарифм кратности разведений;

L i — отношение количества животных, выживших при иммунизации данной дозой, к общему количеству животных, которым эта доза была введена;

∑L i — сумма значений L i , найденных для всех испытанных доз.

Если все контрольные животные выжили, или значение ЕD 50 будет более допустимого, контроль повторяют на таком же количестве животных. Если при повторном испытании значение ЕD 50 будет выше допустимого, препарат считают не выдержавшим испытание.

Термостабильность

Не менее 4 сут. Показатель термостабильности (срок, в течение которого в препарате сохраняется 50 % живых микробных клеток по отношению к первоначальному количеству) определяют в 3 образцах после хранения вакцины при температуре (37 ± 1) о С в течение 14 сут.

Методика определения количества живых микробных клеток изложена в разделе «Специфическая активность». Показатель термостабильности (t ) в сут рассчитывают по формуле:

lg A 0 – логарифм первоначального количества живых м.к./мл;

lg A n – логарифм количества живых м.к./мл через 14 сут хранения вакцины при температуре (37 ± 1) °C;

0,3 – постоянная величина;

14 – срок хранения вакцины при температуре (37 ± 1) °C, сут.