Сифилис. Причины, симптомы, современная диагностика и лечение болезни. Этиология

Бледная трепонема - это бактерия рода Treponema, вызывающая инфекционное заболевание сифилис. Длина ее составляет от 8 до 20 мкм, ширина - от 0,25 до 0,35 мкм. Имеет форму спирали и напоминает штопор с количеством завитков 8–12 штук. Такой тип строения называют спирохетой, поэтому эта бактерия известна также как бледная спирохета.

Длинное тонкое тело позволяет микробу легко проникать в организм человека сквозь слизистые оболочки. В основном заражение происходит через половые органы.

Что представляет собой трепонема

Бледная трепонема была открыта в 1905 г. немецкими учеными Гофманом и Шаудином. При исследовании Treponema pallidum (лат. название, используется также написание T. pallidum) не обнаруживается методом окрашивания Грама, поэтому за бактерией закрепилось определение «бледная» (лат. pallidum). Имеет 4 подвида, каждый из которых несет угрозу здоровью человека:

Трепонема паллидум имеет тело, покрытое слизистой бесструктурной капсулой, трехслойную клеточную стенку, органеллы (вакуоли, рибосомы, мезосомы), цитоплазму. Концы у нее обычно заостренные, на них имеются выросты-блефаропласты, на которых располагается около 10 фибрилл (нитевидных структур) в виде пучков. Благодаря сокращениям клетки и имеющимся фибриллам бледная спирохета быстро передвигается. На пути к своей цели она совершает разнообразные движения: сгибательные, поступательные, вращательные, винтообразные и т. д.

При неблагоприятных условиях меняются формы бледной трепонемы, она приобретает вид цист и L-форму:

1. В L-форме трепонемы становятся шаровидными, останавливается их размножение и истончается клеточная стенка, однако рост и синтез ДНК продолжается.
2. Цисты покрыты защитной оболочкой и могут долго находиться в организме человека в латентном состоянии. Когда условия меняются на благоприятные, цисты становятся зернами, а затем приобретают привычную форму.

Трепонема паллидум чувствительна к ультрафиолету, боится щелочи, уксуса, спирта. Проявляет устойчивость к низким температурам (выдерживает замораживание до 1 года), но при нагревании свыше 50 °C гибнет в течение 15–20 минут. Вне организма человека может прожить не более 3 суток. Является строгим анаэробом, т. е. для энергетического обмена ей не требуется свободный кислород. Сопротивляемость цист и L-формы в несколько раз сильнее.

Признаки сифилиса

Попав в организм человека через слизистую, бактерия продолжает перемещение по лимфатическим и кровеносным сосудам, затем оседает в тканях. Первые признаки заражения обычно появляются через 20–30 дней после проникновения микроба в организм, но иногда это происходит не раньше чем через 3–4 месяца. Выделяют несколько стадий заболевания: первичный сифилис, вторичный и т. д. Каждая из них имеет характерные симптомы.

Первичный сифилис - стадия, возникающая сразу после заражения, симптомы становятся заметны спустя 10–90 дней. Больной может испытывать слабость, головную боль, боль в костях и мышцах, повышение температуры. Иногда ухудшения самочувствия не наблюдается. Часто увеличиваются лимфоузлы. На месте проникновения белой спирохеты образуется сифилома или - небольшой плотный узел диаметром до 1 см, постепенно трансформирующийся в язву.

Шанкр бывает единичный или в количестве нескольких штук и возникает не только на слизистых оболочках, но и на кожных покровах рук, бедер, живота и т. д. Шанкры имеют разновидности, называемые аномальными, их наличие часто сбивает с толку при постановке диагноза:

Вторичная стадия начинается спустя 3 месяца после того, как возбудитель сифилиса проник в организм. Ее длительность может достигать 5 лет. Периодически возникают высыпания на коже (кожные сифилиды), которые проходят сами через несколько недель. Они могут иметь разный вид: белые пятна на шее (« «), гнойники, бледно-розовые пятна на боках и т. д. Зуд и температура отсутствуют. Порой наблюдается локальное облысение. Сифилиды могут поражать слизистую горла в виде ангины и фарингита.

Третичный сифилис наступает спустя несколько лет​​ после заражения. Происходит разрушение внутренних органов, появляются характерные сифилиды на кожных и слизистых покровах. Слизистую и внутренние органы поражают гуммы - опухоли, приводящие к необратимому распаду тканей. На коже появляются бугорковые и гуммозные сифилиды (см. фото).

Выявление и лечение заболевания

Для диагностирования сифилиса проводится комплексное обследование. Сначала пациента осматривает дерматовенеролог на наличие высыпаний на коже и слизистых. Затем проводятся лабораторные исследования материала, взятого из язв и образований у больного. Могут проводиться такие исследования;

1. Трепонемные серологичекие тесты: РИТБ, РИФ, TPHA, ИФА, иммуноблотинг. Они позволяют выявить антитела к трепономе паллидум.
2. Нетрепонемные серологические тесты: реакция Вассермана, количественный тест
   VDRL, тест быстрых плазменных реагинов. Определяют наличие антител к фосфолипидам тканей.
3. Обнаружение трепонемы в очагах поражения: ПЦР, РИФ-Тр, темнопольная микроскопия.

Важно тщательно изучить все признаки, чтобы понять, что это такое, ведь симптомы сифилиса совпадают с симптомами многих других заболеваний. Если диагноз подтвердился, назначается лечение, тип которого зависит от стадии заболевания.

Терапия базируется на приеме антибиотиков. Основой препаратов обычно являются пенициллин, тетрациклин или эритромицин. Если же у пациента третичная стадия, то применяются средства на висмуте, отличающиеся сильной токсичностью. Также может практиковаться внутримышечное введение антибактериальных препаратов, пиротерапия.

Дезинфекция предметов домашнего обихода является обязательной и помогает убить возбудитель за пределами организма зараженного. Кроме того, необходимо провести диагностику и лечение полового партнера.

Бледная трепонема — это бактерия, вызывающая венерическое заболевание «сифилис». Она представляет собой микроорганизм в форме спирали. Благодаря такой форме ее относят к спирохетам — спиралевидным бактериям.

Спирохеты — это группа бактерий, очень похожих между собой. Среди них есть и болезнетворные бактерии, и безобидные. Кроме возбудителя сифилиса, к ним относятся еще и возбудители лептоспироза, возвратного тифа, боррелиоза, а также условно-патогенные (безобидные) бактерии, обитающие на коже человека, в половых путях и на слизистой ротовой полости.

Как выглядит бледная спирохета?

Трепонема паллидум имеет малые размеры (четверть микрометра), нитевидную спирально закрученную форму и заостренные концы. В целом, она очень похожа на другие спирохеты. Ее можно отличить по количеству завитков (в среднем, от 7 до 14), а также по характерным движениям: она крутится вокруг своей оси, сгибается, совершает поступательные и волнообразные движения. Длина варьируется от 6 до 10 микрометров, диаметр завитков — около четверти миллиметра.

На фото и под микроскопом похожа на нежное нитевидное образование, почти прозрачного цвета. Бактерия не окрашивается ни одним красителем, поэтому в микробиологии она получила название «бледная». В микробиологии такой этот тип бактерий называют грамотрицательными. Чтобы разглядеть, ее рассматривают на темном фоне, направляя на бактерию свет. Преломляемые ею лучики, отражают свет и позволяют увидеть бактерию. Это довольно непросто, так как, кроме того, что бактерия прозрачная, она живо двигается и ее трудно уловить.

На искусственных питательных средах культивировать возбудителя сифилиса крайне сложно.

Если условия благоприятные, то размножение бледных спирохет происходит каждые 33 часа: бактерия разделяется поперечно на несколько завитков, каждый из которых содержит все структуры полноценной бактерии.

Спирохеты состоят из частей, стандартных для бактерий:

1. ядро с включенной в него ДНК — тянется по всей длине бледной трепонемы
2. цитоплазма (протоплазматический цилиндр), в которую включены основные функциональные элементы микроба. В первую очередь в нем обеспечивается синтез белка (в рибосомах) и вырабатывается энергия (в мезосомах)
3. цитоплазматическая мембрана — переносит извне питательные вещества, участвует в делении клетки и в трансформациях неблагоприятных условий (об этом дальше), плюс служит складом ферментов и антигенов
4. микрокапсула — наружная клеточная стенка, которая защищает спирохету от внешней среды, в первую очередь от фагоцитов и антител.

На концах бактерии разпологаются выросты-жгутики, с помощью которых она передвигается. Благодаря им treponema pallidum очень подвижна. Насколько она подвижна, можно понять из этого видео:

«Сладкая жизнь», или идеальные условия существования

Treponema pallidum любит тепло, влагу и отсутствие кислорода. Попадая в организм (как правило, половым путем), бактерия как штопор ввинчивается через слизистую оболочку или повреждённую кожу внутрь, и добирается до ближайших лимфатических сосудов и лимфоузлов. Лимфатическая система — это рай для нее. Оптимальная температура (37⁰) и отсутствие кислорода делает эту систему ее любимым местом обитания. С течением времени она распространяется по всей лимфосистеме, а в периоды наибольшей активности — выходит даже в кровь. Это, как правило, сопровождается симптомами вторичного сифилиса — появлением сыпи, распространенной по всей поверхности тела. В течение первичного и вторичного периодов, трепонему можно обнаружить также в сперме, секрете шейки матки, слюне, а также кожных высыпаниях.

Что удивительно, трепонема тяжело переносит вагинальный секрет и редко заселяется на стенках влагалища. Это объясняется любовью бактерии к нейтральной среде (pH 7,4). Кислая среда влагалища обездвиживает бактерию и частично ее нейтрализует. К сожалению, этого не достаточно для предохранения от заражения инфекцией, и бактерия может спокойно поселиться на шейке матки или у входа во влагалище.

Находясь в организме, возбудители сифилиса могут выживать, даже если бактерию захватил и пытается переварить лейкоцит или макрофаг — основные клетки-защитники организма. Такое свойство позволяет бледной трепонеме противостоять неспецифическому иммунитету (то есть специализирующемуся не на конкретном возбудителе болезни, а направленному на врагов вообще).

Трепонема в тяжелых условиях. Тактика выживания

Если в организме создаются неблагоприятные условия для жизни бактерии (например, если человек начинает принимать антибиотики), то она может поменять свою форму на другую, более приспособленную к выживанию. Таких форм две: цистная и -форма.

Даже в этих защитных формах трепонеме вполне реально проникнуть в организм и заразить человека сифилисом. При этом в -форме микробу сделать это становится даже легче, в таком виде так он лучше проникает через барьеры — кожные покровы и слизистые оболочки, в том числе обработанные антисептиками. Если же заражение произошло цист-формой, то более вероятны удлинение инкубационного периода, сифилис в скрытой форме, и развитие устойчивости к лекарствам.

По мере того как сифилис развивается, соотношение между разными формами бледных трепонем, присутствующими в организме, меняется.

1. На ранних стадиях преобладают стандартные спиралевидные формы. Они еще не проникли внутрь в клетки организма, активно делятся и более уязвимы для антибиотиков.
2. Во вторичном рецидивном сифилисе уже наблюдается большое количество цист-форм. Микробы, попавшиеся фагоцитам, внедрились внутрь них. Лечение менее эффективно.
3. При позднем сифилисе стандартных форм заметно меньше, преобладают защитные. Общее количество трепонем снижено.

Во избежание рецидивного (упорного, периодически проявляющегося) течения сифилиса, лечение важно начинать как можно раньше и только (!) под контролем врача

Трепонема вне организма. Сколько времени проживет?

Внешнюю среду treponema pallidum не любит. На сухой поверхности и при высушивании — бактерия погибает почти мгновенно. Во влажной среде и воде сохраняется значительно дольше: во влажных салфетках, носовых платках, белье — она может выживать в течение нескольких суток. Во время стирки вещей (при температуре 60⁰) бледная трепонема обезвреживается в течение пяти-двадцати минут, а при кипячении — в течение нескольких секунд. Холод трепонема переносит несколько легче. В холодильнике, при 0⁰ она может прожить до двух суток. В медицине даже были случаи заражения сифилисом от трупов, пролежавших некоторое время в холодильных камерах.

Также бактерия не любит кислую и щелочную среду. Она мгновенно погибает при использовании хозяйственного мыла и 0,5% растворов щелочей и кислот.

Что может убить трепонему?

Бактерия чувствительна к действию многих растворов антисептиков. Она мгновенно погибает при обработке 0,05% раствора хлоргексидина, 0,001% раствора сулемы, 1-2% раствора фенола и уже 70% спирта.

Водка (40% спирт) убивает возбудителя сифилиса менее эффективно: для полной гибели их необходимо продержать в ней до 20 минут. Также в отношении бледной трепонемы малоэффективен перманганат калия: его для обезвреживания бледных спиротех не используют вовсе.

Для обезвреживания трепонем, уже проникших в организме, используют антибиотики: пенициллины, цефалоспорины, тетрациклины и макролиды. Пенициллины являются основными препаратами, они используются для лечения сифилиса в первую очередь. Остальные антибиотики — препараты резерва: они менее эффективны и их используют только при непереносимости или неэффективности пенициллинов.

Как бледная трепонема обнаруживается в организме

Первый анализ, позволяющий явно выявить возбудителя и диагностировать сифилис, Август Вассерман изобрел в 1906 году. До этого люди ориентировались исключительно по симптомам.

Treponema — род бактерий, объединяющий многочисленные виды, из которых самым распространенным является возбудитель сифилиса — treponema pallidum (трепонема паллидум, бледная трепонема). В этот род также входят возбудители фрамбезии и пинты. Treponema pallidum является спиралевидной бактерией семейства Spirochaetiaceae (спирохеты), вызывающей инфекционное венерическое заболевание - . Патология отличается волнообразным течением и проявляется характерной клиникой. Заражение происходит преимущественно половым путем, благодаря чему сифилис относится к ИППП.

В настоящее время в мире регистрируется огромное количество венерических заболеваний, которые представляют реальную угрозу для жизни человека. Treponema pallidum — опасный микроб, вызывающий системное заболевание, поражающее кожу и внутренние органы. На месте внедрения спирохеты образуется первичный патологический очаг — . Затем на коже появляются сифилитические высыпания, увеличиваются регионарные лимфатические узлы. При отсутствии адекватной терапии поражаются внутренние органы, развиваются необратимые изменения, возможен летальный исход.

Treponema pallidum

Морфология

Treponema pallidum - грамотрицательный микроорганизм, имеющий форму тонкой спирали, скрученной в 8-12 мелких завитков. Свое название бледная трепонема получила благодаря способности не воспринимать обычные лабораторные красители.

Спирохета является строгим анаэробом, хорошо растущим в бескислородной среде. Но не смотря на это, жизнеспособность бактерий сохраняется на окружающих бытовых предметах в течение 3 и более дней. Трепонема имеет жгутики и фибриллы. Благодаря им и собственным сокращениям клетки бактерия совершает поступательные, вращательные, сгибательные, волнообразные, винтообразные и контрактильные движения. Она быстро проникает в живые клетки и стремительно размножается в них поперечным делением.

Бледная трепонема имеет трехслойную клеточную стенку, цитоплазму и органеллы: рибосомы, мезосомы, вакуоли. Рибосомы синтезируют белки, а мезосомы обеспечивают дыхание и обмен веществ. Ферменты и антигены содержатся в цитоплазматической мембране. Тело бактерии покрыто слизистой бесструктурной капсулой, выполняющей защитную функцию.

Физические свойства

Микробы устойчивы к низким температурам и чувствительны к высоким. При нагревании они гибнут в течение 20 минут, при высыхании в течение 15 минут, а при кипячении — мгновенно. Антисептики и дезинфектанты быстро уничтожают бледную трепонему. Губительное действие на бактерию оказывают: ультрафиолет, свет, спирт, щелочи, уксус, мышьяк, ртуть, хлорсодержащие дезинфицирующие средства. Treponema pallidum устойчива к некоторым антибиотикам.

Бледная трепонема проявляет свои патогенные свойства во влажной и теплой среде. В организме человека излюбленным местом размножения являются лимфатические узлы. На стадии вторичного сифилиса микробы концентрируются в крови и проявляют свои патогенные свойства.

Культуральные свойства

Трепонема паллидум не растет на искусственных питательных средах, в культуре клеток и куриных эмбрионах. Ее культивируют в яичках кролика. В этих клетках микроб хорошо растет и размножается, полностью сохраняя свои свойства и вызывая у животного орхит.

Существуют обогащенные питательные среды, предназначенные для выделения чистой культуры. Микробы на них растут под толстым слоем вазелинового масла. Таким способом получают антитела, необходимые для постановки специфических реакций на сифилис.

Трепонемы растут на кровяном или сывороточном агаре в бескислородной среде. При этом они теряют свои патогенные свойства, но сохраняют антигенные. Патогенные трепонемы способны ферментировать маннит, утилизировать лактат и образовывать специфические метаболиты.

Патогенность

К факторам и компонентам патогенности и вирулентности бактерий относятся:

1. Белки-адгезины, обеспечивающие фиксацию микроба на клетке-хозяина,
2. Миофибриллы, способствующие глубокому проникновению в организм и миграции бактерии в теле хозяина,
3. Образование L-форм,
4. Липополисахариды наружной мембраны,
5. Фрагменты болезнетворной клетки, проникающие вглубь тканей,
6. Способность внедряться в межклеточные соединения эндотелия,
7. Антигенная изменчивость.

Трепонема паллидум оказывает прямое токсическое действие на синтез макромолекул — ДНК, РНК и белков. Антигены Т. pallidum используются в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса. При неблагоприятных условиях спирохета трансформируется в L-формы, которые обеспечивают ее устойчивость к антибактериальным средствам и антителам.

Эпидемиология

Сифилис - строгий антропоноз. Инфекция персистирует только в организме человека, который является ее естественным резервуаром в природе. Входными воротами инфекции являются: поврежденный плоскоклеточный или цилиндрический эпителий ротовой полости или половых органов.

Распространение инфекционных агентов происходит:

• Половым путем во время полового акта через сперму,
• Бытовым путем через белье, средства гигиены, косметические принадлежности, при поцелуе,
• Вертикальным путем от инфицированной матери ребенку во время родов, а также через молоко при кормлении грудью,
• Трансплацентарным путем на поздних сроках беременности,
• Гематогенным путем при прямом переливании крови, во время операций, при использовании общего шприца у наркоманов.

Риск инфицирования повышен у медицинских работников — стоматологов, косметологов. Заражение происходит при проведении медицинских манипуляций и процедур, повреждающих кожные покровы. Заражаются treponema pallidum лица, ведущие беспорядочную половую жизнь, имеющие несколько половых партнеров, пренебрегающие барьерными методами контрацепции. Для того, чтобы произошло инфицирование, у больного в секрете должно быть много бактерий, а у партнера - должны присутствовать повреждения на слизистой оболочке.

первые проявления болезни

Больной максимально заразен в периоды первичного и вторичного сифилиса, когда на коже и слизистой половых органов появляются первые признаки болезни. В это время в окружающую среду выделяется много спирохет.

В настоящее время регистрируется большое число больных с экстрагенитальными шанкрами, расположенными на слизистой рта, глотки, ануса. У них высыпания локализуются на лице, сифилиды — на ладонях и подошвах. Третичный период сифилиса в последнее время развивается в очень редких случаях и протекает практически бессимптомно.

Симптоматика

Инкубация характеризуется миграцией бактерий по лимфатическим и кровеносным сосудам и их активным размножением в лимфоузлах. Продолжительность периода - от 3 недель до 3 месяцев.

Врожденный сифилис развивается в результате внутриутробного заражения плода. Эта тяжелейшая патология проявляется характерной триадой симптомов у ребенка: врожденной глухотой, кератитом, гетчинсоновыми зубами.

Диагностика

Диагностика сифилиса включает опрос и осмотр пациента, сбор анамнестических сведений, а также клинические испытания, которые играют важную роль в обнаружении бледной трепонемы и постановке диагноза.

• Микроскопическое исследование биоматериала. Бактериоскопию мазка-отпечатка шанкра или биоптата лимфатического узла проводят в первые 4 недели болезни. Для получения качественного мазка поверхность эрозии и язвы обрабатывают физраствором, производят соскоб и из полученного материала готовят препарат для микроскопии. Мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. Трепонема имеет бледно-розовый цвет. Живые микробы в неокрашенном и нефиксированном мазке не видны в световой микроскоп. Для их обнаружения применяют темнопольную или фазовоконтрастную микроскопию. Для проведения темнопольной микроскопии берут материал из сифилитической язвы и исследуют его в специальном аппарате. Бактерия обладает способностью преломлять свет: в микроскопе она имеет вид белой спиралевидной полоски. Для обнаружения трепонем в различных клинических материалах применяется также люминесцентная микроскопия.

Лечение

Лечением сифилиса занимается врач-дерматовенеролог. Он подбирает терапию индивидуально с учетом стадии, клиники болезни и особенностей пациента. Комплексное лечение способствует полному выздоровлению, которое должно подтверждаться лабораторно.

Лечение сифилиса этиотропное, направленное на уничтожение возбудителя — treponema pallidum. Больным назначают большие дозы антибиотиков, к которым чувствителен данный микроб. Обычно используют пенициллины «Бензилпенициллин», тетрациклины «Доксициклин», макролиды «Кларитромицин», «Сумамед», цефалоспорины «Цефазолин», фторхинолоны «Ципрофлоксацин». Антибактериальную терапию продолжают 2 месяца. Лечение беременных женщин проводят также.

Иммуностимуляция, витаминотерапия, физиопроцедуры дополняют этиотропное лечение и помогают больным восстановиться после болезни. Превентивная терапия проводится половому партнеру и лицам, контактировавшим с больным.

Видео: дерматовенеролог о лечении сифилиса

Профилактика

Профилактические мероприятия заключаются в соблюдении личной гигиены, использовании отдельного белья и посуды, индивидуальных косметических средств. Рекомендуется сразу после незащищенного полового акта обработать раствором хлоргексидина или альбуцида половые органы или другие части тела, с которыми произошел контакт. Эти средства необходимо иметь в домашней аптечке.

С профилактической целью обследуют:

1. Доноров,
2. Беременных женщин,
3. Работников детских садов, школ, общепита и лечебно-профилактических учреждений,
4. Больных, поступающих на стационарное лечение.

Современная противомикробная терапия позволяет избавиться от патологии и делает прогноз заболевания благоприятным. Только врач-дерматовенеролог сможет подобрать правильное и достаточное лечение, соответствующее стадии болезни. Заниматься самолечением сифилиса категорически запрещено. Не до конца излеченная патология может перейти в хроническую форму. Такой больной опасен для окружающих лиц.

Сифилис – социальный недуг, к лечению которого нужно подходить серьезно и ответственно.

Видео: сифилис в программе «Здоровье»

– это венерическое заболевание, имеющее длительное волнообразное течение и поражающее все органы. Клиника заболевания начинается с возникновения в месте внедрения инфекции твердого шанкра (первичной сифиломы), увеличением регионарных, а затем и отдаленных лимфоузлов. Характерно появление на коже и слизистых сифилитических высыпаний, которые безболезненны, не чешутся, протекают без лихорадки. В дальнейшем могут поражаться все внутренние органы и системы, что приводит к их необратимым изменениям и даже летальному исходу. Лечение сифилиса проводит венеролог, в его основе лежит системная и рациональная антибиотикотерапия.

(Lues) – инфекционное заболевание, имеющее длительное, волнообразное течение. По объему поражения организма сифилис относится к системным заболеваниям, а по основному пути передачи - к венерическим. Сифилис поражает весь организм: кожные покровы и слизистые оболочки, сердечно-сосудистую, центральную нервную, пищеварительную, опорно-двигательную системы. Нелеченный или плохо пролеченный сифилис может длиться годами, чередуя периоды обострений и скрытого (латентного) течения. В активный период сифилис проявляется на коже, слизистых оболочках и внутренних органах, в скрытый период практически ничем не проявляется.

Сифилис стоит на первом месте среди всех инфекционных заболеваний (в том числе ИППП), по уровню заболеваемости, заразности, степени вреда здоровью, определенным трудностям диагностики и лечения.

Особенности возбудителя сифилиса

Возбудитель сифилиса - микроорганизм бледная спирохета (трепонема - Treponema pallidum). Бледная спирохета имеет вид изогнутой спирали, способна двигаться разными способами (поступательно, вращательно, сгибательно и волнообразно), размножается поперечным делением, окрашивается анилиновыми красителями в бледно-розовый цвет.

Бледная спирохета (трепонема) оптимальные условия в организме человека находит в лимфатических путях и лимфоузлах, где активно размножается, в крови в высокой концентрации появляется в стадии вторичного сифилиса. Микроб долго сохраняется в тёплой и влажной среде (оптим. t = 37°С, во влажном белье до нескольких суток), устойчив и к низким температурам (в тканях трупов – жизнеспособен 1-2 суток). Бледная спирохета погибает при высыхании, нагревании (55°С – через 15 минут, 100°С – мгновенно), при обработке дезинфицирующими средствами, растворами кислот, щелочей.

Больной сифилисом заразен в любые периоды болезни, особенно в периоды первичного и вторичного сифилиса, сопровождающиеся проявлениями на коже и слизистых. Передается сифилис при контакте здорового человека с больным через секреты (сперму при половом акте, молоко - у кормящих женщин, слюну при поцелуе) и кровь (при прямом переливании крови, во время операций - у медперсонала, пользовании общей опасной бритвой, общим шприцем - у наркоманов). Основной путь передачи сифилиса – половой (95-98% случаев). Реже наблюдается непрямой бытовой путь заражения – через влажные предметы обихода и личные вещи (например, от больных родителей детям). Отмечаются случаи внутриутробной передачи сифилиса ребенку от больной матери. Необходимым условием заражения является наличие в секретах больного достаточного количества патогенных форм бледных спирохет и нарушение целостности эпителия слизистых оболочек и кожных покровов у его партнера (микротравмы: ранки, царапины, ссадины).

Периоды сифилиса

Течение сифилиса – длительное волнообразное, с чередованием периодов активного и скрытого проявления болезни. В развитии сифилиса выделяют периоды, различающиеся набором сифилидов - различных форм кожных высыпаний и эрозий, появляющихся в ответ на внедрение в организм бледных спирохет.

• Инкубационный период

Начинается с момента заражения, длится в среднем 3-4 недели. Бледные спирохеты распространяются по лимфатическим и кровеносным путям по всему организму, размножаются, но клинические симптомы не проявляются. Больной сифилисом не подозревает о своей болезни, хотя он уже заразен. Инкубационный период может укорачиваться (до нескольких дней) и удлиняться (до нескольких месяцев). Удлинение происходит при приеме лекарственных препаратов, которые несколько инактивируют возбудителей сифилиса.

• Первичный сифилис

Длится 6-8 недель, характеризуется появлением на месте проникновения бледных спирохет первичной сифиломы или твёрдого шанкра и последующим увеличением близлежащих лимфатических узлов.

• Вторичный сифилис

Может продолжаться от 2 до 5 лет. Происходит поражение внутренних органов, тканей и систем организма, появление генерализованных высыпаний на слизистых оболочках и коже, облысение. Эта стадия сифилиса протекает волнообразно, периоды активных проявлений сменяются периодами отсутствия симптомов. Различают вторичный свежий, вторичный рецидивный и скрытый сифилис.

Скрытый (латентный) сифилис не имеет кожных проявлений заболевания, признаков специфического поражения внутренних органов и нервной системы, определяется только лабораторными анализами (положительные серологические реакции).

• Третичный сифилис

Встречается сейчас редко, возникает при отсутствии лечения спустя годы после поражения. Характеризуется необратимыми нарушениями внутренних органов и систем, особенно центральной нервной системы. Является наиболее тяжёлым периодом сифилиса, приводящим к инвалидности и к летальному исходу. Обнаруживается появлением на коже и слизистой бугорков и узлов (гумм), которые, распадаясь, обезображивают больного. Подразделяют на сифилис нервной системы – нейросифилис и висцеральный сифилис, при котором повреждены внутренние органы (головной и спинной мозг, сердце, лёгкие, желудок, печень, почки).

Симптомы сифилиса

Первичный сифилис

Первичный сифилис начинается с того момента, когда в месте внедрения бледных спирохет появляется первичная сифилома – твёрдый шанкр. Твёрдый шанкр – это одиночная, округлой формы эрозия или язва, имеющая чёткие, ровные края и блестящее синюшно – красное дно, безболезненная и невоспаленная. Шанкр не увеличивается в размерах, имеет скудное серозное содержимое или покрыт пленкой, корочкой, в основании его ощущается плотный безболезненный инфильтрат. Твердый шанкр не поддается местной антисептической терапии.

Шанкр может находиться на любом участке кожи и слизистых (анальная область, ротовая полость – губы, уголки рта, миндалины; молочная железа , низ живота, пальцы рук), но чаще всего располагается на половых органах. Обычно у мужчин – на головке, крайней плоти и стволе полового члена, внутри уретры; у женщин - на половых губах, промежности, влагалище, шейке матки. Размеры шанкра около 1 см, но могут быть карликовые - с маковое зерно и гигантские (d =4-5 см). Шанкры могут быть множественными, в случае многочисленных мелких повреждений кожи и слизистых на момент заражения, иногда биполярными (на половом члене и губах). При появлении шанкра на миндалинах – возникает состояние, напоминающее ангину, при которой не повышается температура, и горло почти не болит. Безболезненность шанкра позволяет больным не замечать его, и не придавать никакого значения. Болезненностью отличаются щелевидный шанкр в складке анального отверстия, и шанкр – панариций на ногтевой фаланге пальцев руки. В период первичного сифилиса могут наблюдаться осложнения (баланит , гангренизация, фимоз) в результате присоединения вторичной инфекции. Неосложненный шанкр в зависимости от размера заживает через 1,5 – 2 месяца, иногда до появления признаков вторичного сифилиса.

Через 5-7 дней после возникновения твёрдого шанкра развивается неравномерное увеличение и уплотнение ближайших к нему лимфоузлов (чаще паховых). Может быть односторонним и двусторонним, узлы при этом не воспалены, безболезненны, имеют овоидную форму и могут достигать размера куриного яйца. Ближе к концу периода первичного сифилиса развивается специфический полиаденит – увеличение большинства подкожных лимфатических узлов. У больных может ощущаться недомогание, головная боль , бессонница , повышение температуры, артралгии , мышечные боли, невротические и депрессивные расстройства. Это связывают с сифилитической септицемией – распространением возбудителя сифилиса по кровеносной и лимфатической системе из очага поражения по всему организму. В отдельных случаях этот процесс протекает без лихорадки и недомогания, и переход от первичной стадии сифилиса к вторичной больной не замечает.

Вторичный сифилис

Вторичный сифилис начинается через 2-4 месяца после инфицирования и может длиться от 2 до 5 лет. Храктеризуется генерализацией инфекции. На этой стадии поражаются все системы и органы больного: суставы, кости, нервная система, органы кроветворения, пищеварения, зрения, слуха. Клиническим симптомом вторичного сифилиса являются – высыпания на коже и слизистых, которые носят повсеместный характер (вторичные сифилиды). Высыпания могут сопровождаться ломотой в теле, головной болью, лихорадкой и напоминать простуду.

Высыпания проявляются приступообразно: продлившись 1,5 – 2 месяца, без лечения исчезают (вторичный латентный сифилис), затем появляются снова. Первое высыпание характеризуется обильностью и яркостью окраски (вторичный свежий сифилис), последующие повторные высыпания - бледнее окрашены, менее обильные, но крупнее размерами и склонны к слиянию (вторичный рецидивный сифилис). Частота рецидивов и длительность латентных периодов вторичного сифилиса бывают различными и зависят от иммунологических реакций организма в ответ на размножение бледных спирохет.

Сифилиды вторичного периода исчезают без рубцов и имеют разнообразие форм - розеолы, папулы, пустулы.

Сифилитические розеолы представляют собой мелкие округлые пятна розового (бледно-розового) цвета, не поднимающиеся над поверхностью кожи и эпителия слизистых, которые не шелушатся и не вызывают зуд, при надавливании на них бледнеют и ненадолго исчезают. Розеолезная сыпь при вторичном сифилисе наблюдается у 75-80% больных. Образование розеол вызвано нарушениями в кровеносных сосудах, располагаются они по всему телу, в основном на туловище и конечностях, в области лица - чаще всего на лбу.

Папулезная сыпь представляет собой округлые узелковые образования, выступающие над поверхностью кожи, ярко-розового цвета с синюшным оттенком. Папулы располагаются на туловище, не вызывают никаких субъективных ощущений. Однако при надавливании на них пуговчатым зондом, появляется острая боль. При сифилисе высыпание папул с жирными чешуйками по краю лба образует, так называемую, «корону Венеры».

Сифилитические папулы могут разрастаться, сливаться друг с другом и образовывать бляшки, мокнуть. Особенно заразны мокнущие эрозивные папулы, и сифилис в этой стадии легко может передаваться не только при половых контактах, но и при рукопожатиях, поцелуях, пользовании общими предметами обихода. Пустулезные (гнойничковые) высыпания при сифилисе похожи на угревую или ветряную сыпь, покрыты коркой или чешуйками. Обычно возникают у больных с пониженным иммунитетом.

Злокачественное течение сифилиса может развиваться у ослабленных пациентов, а также у наркоманов, алкоголиков, ВИЧ-инфицированных . Для злокачественного сифилиса характерно изъязвление папуло-пустулезных сифилидов, непрерывные рецидивы, нарушение общего состояния, лихорадка, интоксикация, снижение массы тела.

У больных вторичным сифилисом может возникать сифилитическая (эритематозная) ангина (резко выраженное покраснение миндалин, с белёсыми пятнами, не сопровождающееся недомоганием и лихорадкой), сифилитические заеды в уголках губ, сифилис полости рта . Наблюдается общее легкое недомогание, которое может напоминать симптомы обычной простуды. Характерным для вторичного сифилиса является генерализованный лимфаденит без признаков воспаления и болезненности.

В период вторичного сифилиса возникают нарушения в пигментации кожи (лейкодерма) и выпадение волос (алопеция). Сифилитическая лейкодерма проявляется в потере пигментации различных участков кожи на шее, груди, животе, спине, пояснице, в области подмышек. На шее, чаще у женщин, может появляться «ожерелье Венеры», состоящее из мелких (3-10 мм) обесцвеченных пятен, окружённых более тёмными участками кожи. Оно может существовать без изменения длительно (несколько месяцев и даже лет), несмотря на проводимое противосифилитическое лечение. Развитие лейкодермы связывают с сифилитическим поражением нервной системы, при обследовании наблюдаются патологические изменения в спинномозговой жидкости.

Выпадение волос не сопровождается зудом, шелушением, по своему характеру бывает:

• диффузное - выпадение волос типично для обычного облысения, происходит на волосистой части головы, в височной и теменной области;
• мелкоочаговое - яркий симптом сифилиса, выпадение или поредение волос мелкими очагами, расположенными беспорядочно, на голове, ресницах, бровях, усах и бороде;
• смешанное - встречается и диффузное, и мелкоочаговое.

При своевременно проведённом лечении сифилиса волосяной покров полностью восстанавливается.

Кожные проявления вторичного сифилиса сопровождают поражения ЦНС, костей и суставов, внутренних органов.

Третичный сифилис

Если больной сифилисом не лечился или лечение было неполноценным, то через несколько лет после заражения у него появляются симптомы третичного сифилиса . Происходят серьезные нарушения органов и систем, внешность больного обезображивается, он становится инвалидом, в тяжелых случаях вероятен летальный исход. В последнее время частота развития третичного сифилиса уменьшилась в связи с лечением его пенициллином, редкими стали тяжелые формы инвалидизации.

Выделяют третичный активный (при наличии проявлений) и третичный латентный сифилис. Проявлениями третичного сифилиса являются немногочисленные инфильтраты (бугорки и гуммы), склонные к распаду, и деструктивные изменения в органах и тканях. Инфильтраты на коже и слизистых развиваются без изменения общего состояния больных, они содержат очень мало бледных спирохет и практически не заразны.

Бугорки и гуммы на слизистых мягкого и твёрдого нёба, гортани, носа изъязвляясь, приводят к расстройству глотания, речи, дыхания, (перфорации твёрдого нёба, «провал» носа). Гуммозные сифилиды, распространяясь на кости и суставы, кровеносные сосуды, внутренние органы вызывают кровотечения, перфорации, рубцовые деформации, нарушают их функции, что может привести к смертельному исходу.

Все стадии сифилиса вызывают многочисленные прогрессирующие поражения внутренних органов и нервной системы, наиболее тяжёлая форма их развивается при третичном (позднем) сифилисе:

• нейросифилис (менингит , менинговаскулит, сифилитические невриты , невралгии, парезы, эпилептические припадки , спинная сухотка и паренхиматозный кератит , гетчинсоновы зубы.

  Диагностика сифилиса

  Диагностические мероприятия при сифилисе включают в себя тщательный осмотр пациента, сбор анамнеза и проведение клинических исследований:

  1. Обнаружение и идентификация возбудителя сифилиса при микроскопии серозного отделяемого кожных высыпаний. Но при отсутствии признаков на коже и слизистых и при наличии «сухой» сыпи применение этого метода невозможно.
  2. Серологические реакции (неспецифические, специфические) ставятся с сывороткой, плазмой крови и ликвором – наиболее надежный метод диагностики сифилиса.

  Неспецифическими серологическими реакциями являются: RPR – реакция быстрых плазменных реагинов и RW - реакция Вассермана (реакция связывания комплимента). Позволяют определять антитела к бледной спирохете – реагины. Применяют для массовых обследований (в поликлиниках, стационарах). Иногда они дают ложноположительный результат (положительный в отсутствии сифилиса), поэтому этот результат подтверждают проведением специфических реакций.

  К специфическим серологическим реакциям относят: РИФ - реакцию иммунофлуоресценции, РПГА – реакцию пассивной гемагглютинации, РИБТ – реакцию иммобилизации бледных трепонем, RW c трепонемным антигеном. Используются для определения видоспецифических антител. РИФ и РПГА высокочувствительные анализы, становятся положительными уже в конце инкубационного периода. Используются в диагностике скрытого сифилиса и для распознавания ложноположительных реакциях.

  Положительными показатели серологических реакций становятся лишь в конце второй недели первичного периода, поэтому первичный период сифилиса делят на два этапа: серонегативный и серопозитивный.

  Неспецифические серологические реакции применяют для оценки эффективности проведенного лечения. Специфические серологические реакции у пациента, переболевшего сифилисом, остаются положительными на всю жизнь, для проверки эффективности лечения их не используют.

  Лечение сифилиса

  Начинают лечение сифилиса после постановки достоверного диагноза, который подтвержден лабораторными анализами. Лечение сифилиса подбирается индивидуально, проводится комплексно, выздоровление должно определяться лабораторно. Современные методы лечения сифилиса, которыми владеет в наши дни венерология , позволяют говорить о благоприятном прогнозе лечения, при условии правильной и своевременной терапии, которая соответствует стадии и клиническим проявлениям болезни. Но подобрать рациональную и достаточную по объему и времени терапию может только врач-венеролог . Самолечение сифилиса недопустимо! Недолеченный сифилис переходит в скрытую, хроническую форму, а больной остается эпидемиологически опасным.

  В основе лечения сифилиса – применение антибиотиков пенициллинового ряда, к которым бледная спирохета проявляет высокую чувствительность. При аллергических реакциях больного на производные пенициллина в качестве альтернативы рекомендуются эритромицин, тетрациклины, цефалоспорины. В случаях позднего сифилиса в дополнение назначают препараты йода, висмута, иммунотерапию, биогенные стимуляторы, физиолечение.

  Важно установить половые контакты больного сифилисом, обязательно провести превентивное лечение возможно зараженных половых партнеров. По окончании лечения все ранее больные сифилисом остаются на диспансерном наблюдении у врача до полного отрицательного результата комплекса серологических реакций.

  В целях профилактики сифилиса проводятся обследования доноров, беременных, работников детских, пищевых и лечебных учреждений, пациентов в стационарах; представителей групп риска (наркоманы, проститутки, бомжи). Сданная донорами кровь обязательно исследуется на сифилис и подвергается консервированию.

Возбудитель сифилиса - бледная трепонема

Возбудителем сифилиса является бактерия спиралевидной формы (т.наз. спирохета) - бледная трепонема . Латинское название - Treponema pallidum подвид pallidum.

Она была открыта в 1905 году Шаудином и Хоффманом (F. Schaudinn и Е. Hoffman) и получила свое название из-за слабой способности воспринимать окраску лабораторными красителями. В активном патогенном состоянии она имеет диаметр 0,2-0,4 мкм и длину от 6 до 14 мкм. В организме человека размножается поперечным делением через каждые 30-33 часа.

Существуют и другие патогенные трепонемы :

Treponema pallidum подвид pertenue - возбудитель фрамбезии,
Treponema pallidum подвид endemicum - возбудитель беджеля,
Treponema carateum - возбудитель пинты

Указанные возбудители и вызываемые ими болезни (трепонематозы) встречаются в регионах с жарким и влажным климатом. Это страны Африки, Азии, Латинской Америки и Тихоокеанского региона, расположенные в зонах тропических лесов.

Традиционно считалось, что, эта бактерия является строгим анаэробом, то есть может существовать только при отсутствии в среде обитания молекулярного кислорода (т.е. в анаэробных условиях). Но к настоящему времени выяснилось, что бледная трепонема относится к микроаэрофилам и растет в условиях пониженных концентраций кислорода (по сравнению с содержанием кислорода в обычном воздухе).

Несмотря на активные попытки исследователей вырастить эти бактерии вне живых организмов («in vitro»), трепонема не культивируется на простых питательных средах . Те культуральные трепонемы, которые удается вырастить комплексными методами на питательных средах, утрачивают свою вирулентность (патогенность), но частично сохраняют антигенные свойства. Разработаны сложные среды, в которых болезнетворные трепонемы не размножаются, но сохраняют свою жизнеспособность в течение 18-21 дней. Возбудители других трепонематозов также не удается вырастить in vitro.

Обычно T. pallidum культивируется путём заражения кроликов. Проявления сифилиса, наиболее сопоставимые у людей и у кроликов с экспериментальным сифилисом, получают при заражении кроликов в яичко патогенными бледными трепонемами (сифилитический орхит). Для этого используют лабораторный штамм Никольса (Nichols), специально адаптированный для животных.

Штамм Никольс был выделен в 1912 году из спинномозговой жидкости пациента с ранним нейросифилисом (работа американских ученых Nichols and Hough, 1913). Этот штамм стал эталонным в лабораторных исследованиях сифилиса и уже более столетия пассируется (перевивается) на кроликах. Штамм Никольс остается заразным и для человека; несмотря на многолетнее культивирование на кроликах, известны случаи случайного лабораторного заражения работников лабораторий.

Технология получения новых лабораторных штаммов из клинических изолятов, выделенных непосредственно от больных сифилисом, трудоемка и занимает длительное время. Это связано, в частности, с тем, что до настоящего времени не разработано эффективной технологии поддержания жизнедеятельности патогенных бледных трепонем в лабораторных условиях.

Трепонема способна размножаться в узком температурном диапазоне - около 37 °C.

В окружающей среде бледная трепонема слабоустойчива, при 55 °С гибнет в течение 15 мин, чувствительна к высыханию, свету, солям ртути, висмуту, мышьяку, пенициллину. При 60°С она гибнет через 10-15 минут, а при кипячении (при 100°С) гибнет мгновенно. При комнатной температуре во влажной среде трепонемы сохраняют подвижность до 12 часов. Кроме того, возбудитель сифилиса довольно чувствителен к большинству антисептических средств. К низким температурам бледные трепонемы устойчивы.

Грамотрицательные бактерии - бактерии, которые не окрашиваются кристаллическим фиолетовым при окрашивании по Граму. В отличие от грамположительных бактерий, которые сохранят фиолетовую окраску даже после промывания обесцвечивающим растворителем (спирт), грамотрицательные полностью обесцвечиваются. Бледная трепонема является грам-отрицательной бактерией.

Строение бледной трепонемы

Трехмерная рендер-модель бактерии T. pallidum. Изображены внешняя и цитоплазматическая мембрана (прозрачный желтый), базальные тела (темно-лиловый), аксиальные фибриллы (светло-лиловый), цитоплазматические нити (оранжевый), серповидная "шапочка" возле закругленного конца цитоплазматической мембраны (зеленый), и коническая структура на полюсе (розовый). Пептидогликановый слой не отображен на рендер-модели.

Строение бледной трепонемы (T. pallidum подв. pallidum) было изучено более подробно и изучается в настоящий момент параллельно с развитием иммунологии и электронной микроскопии, начиная с 70-80 годов XX века.

Строение T. pallidum во многом похоже на строение других спирохет.

Проведенные с помощью электронной микроскопии исследования морфологии бледной трепонемы показали, что центральной структурой клетки Т. pallidum является спирально извитой протоплазматический цилиндр .

Протоплазматический цилиндр снаружи окружен цитоплазматической мембраной и плотно прилегающей к нему тонкой клеточной стенкой , основу которой составляет пептидогликан.

Кроме этого, бледная трепонема имеет осевые фибриллы , которые плотно обвиваются вокруг протоплазматического цилиндра. Полагают, что именно они обеспечивают подвижность трепонем, хотя полная функциональность фибрилл не описана в достаточной степени.

Пептидогликан , также известный как муреин, является сложным полимером. Он поддерживает структурную целостность цитоплазматической мембраны и стабилизирует фибриллярный двигательный комплекс. Этот полимер достаточно эластичный, чтобы не мешать сгибательным движениям трепонем.

Бактерия имеет наружную (внешнюю) мембрану . Наружная мембрана охватывает протоплазматический цилиндр и фибриллы.

Аксиальные (осевые) фибриллы располагаются в периплазматическом пространстве , между клеточной стенкой и наружной мембраной. Эти нитчатые структуры тянутся вдоль клетки трепонемы, обвиваясь вокруг её тела в периплазматическом пространстве. Они берут начало от базальных тел, расположенных на обоих концах клетки, и заканчиваются, пройдя середину клеточного цилиндра. Они идут от обоих концов к центру микроорганизма и перекрывают друг друга в центре.

Каж­дая фибрилла одним концом прикреплена вблизи конца клетки, а дру­гой ее конец свободен. На обоих концах клетки при­креплено одинаковое число фибрилл; в середине или по всей длине клетки фибриллы перекрывают друг друга. В совокупности аксиальные фибриллы называются аксостилем (фибриллярным пучком).

По своим свойствам аксиальные фибриллы напоминают жгутики бактерий. Отличие заключается в том, что аксиальные фибриллы трепонем - внутриклеточные структуры и поэтому называются эндофлагеллами, т.е. внутренними жгутиками.

Т.к. пептидогликановый слой не защищает наружную мембрану, то она легко разрушается при экспериментальных манипуляциях. Фибриллы тоже при этом повреждаются и отстают от тела бактерии, что хорошо видно на многих снимках, полученных в результате электронной микроскопии.

Кроме того, внутри протоплазматического цилиндра также содержатся другие нитевидные структуры, функция которых до сих пор не ясна - цитоплазматические фибриллы , направленные параллельно периплазматическим эндофлагеллам (аксиальным фибриллам).

На концах трепонем наблюдаются структуры конической формы, расположенные в периплазматическом пространстве. По всей видимости, эти уникальные структуры состоят из липопротеинов, упорядоченных в виде спиральной решетки, примыкающей к наружной мембране.

Трепонема, штамм Казань. Электронная микроскопия. K - головная структура. F - фибриллы. F" - цитоплазматические нити.

Срез бледной трепонемы (электронная микроскопия). (ME) - наружная мембрана. (MC) - цитоплазматическая мембрана. (F) - фибриллы. (R) - рибосомы. (N) - вакуоли.

Срез концевого сегмента бледной трепонемы на крио-электронной томограмме. Белые треугольники указывают на пептидогликановый слой клеточной стенки, который хорошо видно рядом с концом клетки.

Большинство (50-80%) свежеизолированных штаммов T. pallidum окружены слоем кислых мукополисахаридов, напоминающим капсулу. Однако не все уверены, что это собственный продукт трепонем, а не производное соединительной ткани хозяина. Если это так, то правильнее говорить о псевдокапсуле.

Так как бледная трепонема весьма важна с медицинской точки зрения, и не поддается культивированию на искусственных средах, то она стала одним из первых микроорганизмов, чей геном расшифровали исследователи. Для секвенирования был выбран штамм Nichols, выделенный в США еще в 1912 году. Геном микроорганизма представлен кольцевой двуцепочечной молекулой ДНК размером 1 138 006 пар оснований. ДНК содержит 1041 предсказанную кодирующую последовательность. Впоследствии были полностью секвенированы еще несколько штаммов T. pallidum. Ученые выяснили, что геномы штаммов отличаются, хотя и не очень значительно.

У микроорганизма идентифицировано 42 семейства генов, ответственных за основные жизнеобеспечивающие функции: механизмы репликации ДНК, транскрипции, трансляции, энергетический метаболизм, процессы клеточного деления и секреции белков.

Наличие небольшого генома с лимитированием процессов биосинтеза объясняет некоторые свойства этой бактерии. Помимо своего небольшого размера, геном бледной трепонемы имеет еще и другие своеобразные черты в виде повторяющихся генов или генов с внутренними повторами.

После расшифровки генома трепонем было выяснено, что 55% генома бледной трепонемы - это гены с предсказанной биологической ролью, 28% - ранее неизвестные гены и 17% генов не уникальны для T. pallidum, т.е. соответствуют белкам других видов бактерий.

Важную роль в жизнедеятельности возбудителя сифилиса играет транспорт необходимых питательных веществ из окружающей среды. Этим объясняется присутствие широкого спектра транспортных белков с большим выбором субстратных специфичностей, кодируемых 5,7 % генома. Транспортные белки - это переносчики, связывающиеся с соответствующими субстратами внешней среды и транспортирующие их от наружной мембраны к цитоплазматической.

Как высокоспециализированный патоген, Т. pallidum не имеет в своем геноме генов, отвечающих за синтез ферментов, расщепляющих жирные кислоты, она использует сахара, содержащиеся в жидких средах организма хозяина. В качестве источников энергии микроорганизм использует глюкозу, галактозу, мальтозу и глицерин. Пути использования аминокислот как источника углерода и энергии в настоящее время не известны. Предполагают, что Т. pallidum не способна использовать аминокислоты как альтернативный источник энергии.

Одной из важнейших функций Treponema pallidum является движение, что обусловливает ее высокую инвазивность и возможность распространяться по жидкостям организма: внутрисуставной, глазной, экстрацеллюлярном матриксе и в коже. Двигательная активность обеспечивается 36 генами, кодирующими белки жгутиковых структур.

Антигенный состав бледной трепонемы

Бледная трепонема имеет сложный антигенный состав: в структуре клетки этой бактерии выявлено содержание большого количества соединений, обладающих выраженными антигенными свойствами. При этом антигены, входящие в состав клетки возбудителя сифилиса качественно неравноценны с точки зрения иммунного ответа (так называемая антигенная мозаичность).

Тело трепонемы (бактериальная клетка) содержит липидные компоненты, протеиновые (белковые) и полисахаридные комплексы, основная их часть локализуется в клеточной стенке. В сухом весе в составе бледных трепонем примерно 70% белков, 20% липидов и 5% углеводов. Это довольно высокое содержание липидов среди бактерий. Разными исследователями из клеток были выделены липополисахариды (ЛПС) и белковые фракции.

Практическое применение получили белковые и липидные антигены, поскольку серологическая диагностика сифилиса исторически основана на выявлении антител именно к этим антигенам. Белковые и липидные антигены используют при конструировании диагностикумов для поиска сывороточных антител. Некоторые липопротеины являются сильными иммуногенами, и антитела к ним можно обнаружить уже в конце инкубационного периода.

1. Липидные антигены бледной трепонемы

Липидный состав T.pallidum сложен: в составе бактерии обнаружены различные фосфолипиды, в том числе кардиолипин и недостаточно изученные гликолипиды. Фосфолипиды входят в состав цитоплазматической мембраны трепонемы. Эта мембрана экранирована внешними структурами бактериальной клетки.

Основной фосфолипидный антиген - кардиолипин. Неспецифический липидный антиген по своему составу аналогичен кардиолипину, фосфолипиду экстрагированному из бычьего сердца и пред­ставляющему по химической структуре дифосфатидилглицерол. Кардиолипин широко распространен в живой природе, и в конце концов его удалось обнаружить у трепонем. В отличие от кардиолипина, фосфолипиды и гликолипиды, обнаруженные в наружной мембране трепонемы, не реагируют с иммуноглобулинами в сыворотке больного сифилисом.

2. Белковые антигены бледной трепонемы.

Наибольший интерес для поиска новых антигенов T. pallidum представляют белки цитоплазматической и наружной мембраны, так как именно они в первую очередь являются мишенями для иммунной системы организма хозяина. На экспериментальных животных моделях было показано, что антитела к белкам наружной мембраны играют важную роль в элиминации возбудителя из макроорганизма. В то же время известно, что наибольшей иммуногенностью обладают липопротеины, локализующиеся на цитоплазматической мембране со стороны периплазмы, ввиду содержания в их структуре высокоиммуногенных радикалов жирных кислот.

Клеточная архитектура T. pallidum в виде поперечного среза. (OM) - наружная мембрана с редкими белками (фиолетовый), (LP) - липопротеины, (PG) - тонкий слой пептидогликана, (CM) - цитоплазматическая мембрана, (CF) - цитоплазматические фибриллы Второе изображение - эти же структуры показаны на продольном срезе трепонемы, (PF) - аксиальные фибриллы

3. Белки наружной мембраны.

Наружная мембрана клетки возбудителя сифилиса состоит из двух слоев липидных молекул (липидный бислой), в которые встроены белки.

Наружная мембрана трепонем напоминает внешнюю мембрану грамотрицательных бактерий, но, в отличие от них, не содержит потенциально вызывающего воспаление гликолипида липополисахарида (липополисахаридного эндотоксина).

В составе наружной мембраны трепонемы преобладают липиды. Количество белков, экспонированное на поверхности трепонем весьма мало, примерно в 100 раз меньше, чем у других грам-отрицательных бактерий. Поверхностные антигены T. pallidum представляют собой трансмембранные липопротеины. «Трансмембранные» - это означает, что белки пронизывают двойной слой липидов мембраны. Эти трансмембранные белки получили особое название - "редкие белки наружной мембраны бледной трепонемы" (T. pallidum rare outer membrane proteins, TROMP).

Эти белки слабоиммуногенны. Наружная мембрана бледной трепонемы почти лишена белков, которые могут служить мишенями для иммунной системы хозяина.

Данные о строении наружной мембраны существенно повлияли на представления о патогенезе сифилиса и физиологии трепонем.

Высказывается предположение, что малочисленность поверхностно-экспонированных белков, а не внешний чехол, ограничивает антигенность вирулентного микроорганизма и позволяют ему уклоняться от интенсивного гуморального иммунного ответа, развивающегося при вторичном сифилисе и более поздних стадиях болезни.

4. Высокоиммуногенные белки бледной трепонемы.

Основными антигенными детерминантами бледной трепонемы являются липопротеины, локализованные в периплазматическом пространстве и покрывающие наружный слой цитоплазматической мембраны.

Ряд исследований показал, что основными мембранными антигенами трепонем являются гидрофильные полипептиды, привязанные ковалентносвязанными N-концевыми липидами к периплазматической стороне цитоплазматической мембраны.

5. Белки цитоплазматической мембраны

Электронно-микроскопическое исследование замороженных срезов возбудителя показало, что белки цитоплазматической мембраны располагаются внутримембранно между двойным слоем липидов.

6. Модель молекулярной архитектуры бледной трепонемы

На основании комплекса молекулярных, биохимических и ультраструктурных исследований создана предположительная модель молекулярной архитектуры бледной трепонемы.

Молекулярная структура патогенной бледной трепонемы. Наружная мембрана содержит малое количество интегральных мембранных белков, т.наз «редких трансмембранных белков».
(CM) - цитоплазматическая мембрана и (pg) - пептидогликановый слой образуют комплекс. (LP1), (LP2) - мембранные иммуногены закрепляются посредством липидного якоря с внешней стороны цитоплазматической мембраны. (Ef) - фибриллы (эндофлагеллы), расположенные в периплазматическом пространстве.

Эта необычная молекулярная архитектура может объяснить впечатляющую способность бактерии ускользать от механизмов иммунологического надзора и наименование этого микроорганизма как стелс-патогена. Несмотря на значительные усилия исследователей, молекулярные механизмы, лежащие в основе патогенности бледной трепонемы в настоящее время недостаточно изучены.

7. Антегенная общность с непатогенными трепонемами

Основными антигенными детерминантами бледной трепонемы являются протеины, имеющие в своем составе фракции, общие для патогенных и сапрофитных трепонем, против которых синтезируются групповые антитела.Поэтому цельноклеточный антиген, полученный из разрушенной ультразвуком T. pallidum, редко используется для серологической диагностики сифилиса. В современных тест-системах в качестве антигена нашли применение рекомбинантные или синтетические пептиды. Первые получили большое распространение.

8. Подробное описание белковых антигенов бледной трепонемы

Описано около 30 разнообразных антигенов, сконцентрированных
 главным образом в клеточной стенке и цитоплазматической мембране бледной трепонемы. На сегодняшний день описаны различные белки, имеющих молекулярную массу от 12 (сейчас известен как ТрN 15) до 97кДа. С помощью метода иммуноблоттинга были обнаружены и изучены полипептиды бледной трепонемы с молекулярной массой 15, 17, 24, 28, 29, 31, 33, 35, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44,5, 45, 47, 53, 54, 57, 61, 62, 63, 65, 88, 97 кДа. Тр15-47 кДа (15, 17, 23, 37, 39, 45, 47) – встроенные в мембрану и флагеллярные белки, большинство из которых явяляются специфичными для T. pallidum.

В 1982 году S. A. Lukehart et al. исследовали большинство антигенов Т. pallidum путем электрофореза в полиакриламиде в технике Вестерн-блота и получили около 35 полипептидов с молекулярной массой от 14 до 100 кДа. Авторы обнаружили, что высоко иммуногенные липопротеины локализованы в периплазматическом слое цитоплазматической мембраны, а не содержатся в наружной мембране.

Наиболее иммунореактивными белками мембраны Т. pallidum являются 15, 17, 42 и 47 кД. Под иммунореактивностью в этой связи понимают способность реагировать со специфичными к возбудителю антителами.

Наименьшей молекулярной массой обладает белок цитоплазматической мембраны Тр 15. Во время сифилитической инфекции он вызывает образование IgМ. Тр 17 в основном представлен во внутренней мембране протоплазматического цилиндрического комплекса T. pallidum, в небольших количествах он обнаружен на наружной мембране. С определением антител к белкам Тр 47 и Тр 44,5 возлагают надежду для постановки серологического дифференциального диагноза сифилиса и болезни Лайма.

В структуре флагелл выделен белок Тр 37, а Тр 39 считается основным мембранным протеином. Ему принадлежит ведущая роль в запуске иммунного ответа.

Первым белком, используемым для ИФА, стал трансмембранный протеин TmpA (АГ с молекулярной массой 42 кДа). Он является периплазматическим металлосвязывающим протеином и вовлечен в транспорт металлов через цитоплазматическую мембрану. К его концевому фрагменту из 19 аминокислотных остатков АТ наиболее активны и встречаются в сыворотке большинства больных. Выявлена зависимость между титром АТ к TmpA и эффективностью терапии. По- этому он предлагался для использования с целью оценки качества лечения.

Поиск IgM к белкам Тр 37 и Тр 47 рассматривается в качестве варианта для постановки диагноза врожденного сифилиса у детей, рожденных от больных матерей. Протеин Тр 47 является цинк-зависимой карбоксипептидазой. Он принадлежит к иммунодоминантным белкам, продуцируется в больших количествах и для него не обнаружено перекрестных реакций с белками трепонем-комменсалов. В большинстве современных тест-систем для специфической диагностики сифилиса используют этот белок, чаще в комбинации с другими протеинами.

Образование АТ к Тр 83 обнаружено только при врожденном сифилисе, а среди фракций иммуноглобулинов найдено преобладание IgG1, IgG3.

Антиген T. pallidum с молекулярной массой 92кДа – это белок наружной мембраны, индуцирующий иммунный ответ. Он является мишенью для опсонизирующих антител. Гены, его кодирующие, консервативны в 95,5–100% случаев. Они очень похожи на гены, кодирующие белки мембран целого ряда бактерий, включая спирохету Borrelia burgdorferi и возбудителей инфекций, передающихся половым путем, Neisseria gonorrhoeae и Chlamidia trachomatis.

В экспериментах на морских свинках показано, что первыми в сыворотке появляются полипептиды с молекулярной массой 80–90 кДа и 47 кДа. Через 2 недели регистрировался спектр из 10 белков, молекулярная масса которых составила от 18 до 90 кДа. Через 2 месяца наблюдений среди 11 белков обнаружены новые с молекулярной массой 39 и 45 кДа на фоне элиминации белка 90 кДа.

Через 90 дней от момента появления первичного аффекта изучено 17 белков с молекулярной массой от 14 до 80 кДа. При определении титра АТ к Тр 18, 45-49, 70 показано, что он выше через 2 месяца от начала инфекции, чем через 5.

Ряд исследователей указывает на частую регистрацию ложноположительных результатов в трепонемных исследованиях для выявления сифилиса у пациентов с воспалительными заболеваниями периодонта за счет определения у них антител к антигенам TpN17 и TpN47. Указанное явление свидетельствует о недостаточной специфичности используемых для исследования антигенов ввиду их иммуногенной близости с антигенами микроорганизмов, вызывающих воспалительные изменения периодонта, в том числе и трепонем-комменсалов.

Исследования бледной трепонемы методами протеомики и функциональной геномики

Исследования особенностей бледной трепонемы в течение долгого времени были затруднены из-за невозможности длительного культивирования патогенных штаммов T. pallidum на искусственных средах. Это же служило препятствием для изучения иммунологических и физико-химических свойств большинства белков, входящих в структуру T. pallidum.

После расшифровки генома возбудителя сифилиса, осуществленного группой американских исследователей в 1998 году, произошел качественный скачок в области изучения бледной трепонемы, как и многих других микроорганизмов, геномы которых были расшифрованы в начале 90-х годов. Если раньше изучением структуры, функций и механизмов работы отдельных наборов генов занималась классическая генетика , то возникшая как область знаний геномика стала изучать огромные объемы данных о последовательностях нуклеотидов, полученные в результате исследований ДНК.

Хотя наличие данных по геному - это настоящая сокровищница информации для исследователей, однако геномные последовательности дают только "взгляд с высоты птичьего полёта" на биологические процессы, свойственные микроорганизмам. Рекордное обилие сведений по ДНК, которое нарабатывается методами современной геномики становится основанием для глобальной экспериментальной платформы - протеомики . Современные глобальные методы протеомики сочетают компьютерные и биологические подходы.

Протеомика - современное направление молекулярной биологии, занимающееся сравнительным изучением белков, которые могут быть экспрессированы микроорганизмом в определенную фазу жизнедеятельности, предсказанием функциональной роли отдельных белков путем экспериментального сопоставления их качественного и количественного составов в разных клетках, а также установлением взаимосвязи структуры белка и его функций.

Благодаря развитию методов протеомики стало возможным широкомасштабное изучение белкового состава различных организмов, в том числе и возбудителя сифилиса.

Состав белков T. pallidum в настоящее время изучается методами протеомики и функциональной геномики, что значительно расширило знания об антигенной структуре микроорганизма. С использованием протеомных методов исследования было выявлено и охарактеризовано более сотни новых иммуногенных белков T. pallidum. В частности, появилась серия работ по изучению протеома возбудителя сифилиса с целью выявления новых белков, представляющих интерес для создания вакцины или диагностикумов на их основе.