Главная · Налет · Исследование костного мозга. Пункция и биопсия костного мозга: показания, проведение, анализ и результаты. Способ проведения процедуры: общие сведения

Исследование костного мозга. Пункция и биопсия костного мозга: показания, проведение, анализ и результаты. Способ проведения процедуры: общие сведения

Костный мозг представлен в виде губчатого мягкого вещества. При развитии и взрослении человека красная субстанция заменяется желтой. Она представлена жировой тканью. Красный костный мозг сохраняется в течение жизни в грудине, ребрах и эпифизах. Он также присутствует в трубчатых, черепных, тазовых элементах. Исследование костного мозга имеет важное диагностическое значение. Оно позволяет получить наиболее полное представление о кроветворной системе. Для оценки ее состояния осуществляется пункция костного мозга и трепанобиопсия. Взятие материала осуществляется разными методами. Далее рассмотрим, что собой представляет пункция костного мозга.

Из какого участка берут материал?

Осуществляется пункция костного мозга из грудины, как правило. В процессе манипуляций пациент должен находиться в положении лежа на спине. Пункция костного мозга ребенку, особенно новорожденному, делается в область пятки либо в верхнюю треть большеберцового скелетного сегмента. Существует также возможность взятия материала из подвздошной области, а также остистых отростков позвонков и ребер. У детей кости грудины отличаются разной толщиной и небольшой плотностью. Поэтому манипуляции в этой области могут быть опасны.

Способ проведения процедуры: общие сведения

Стернальная пункция костного мозга методом Аринкина осуществляют с помощью иглы Кассирского. Она безопасна и удобна, поскольку в ней предусмотрен предохранительный щиток. Он может устанавливаться на необходимую глубину проникновения в соответствии с толщиной подкожной клетчатки и кожи. Щиток-ограничитель предотвращает прокол задней пластинки в грудине. Забор материала осуществляется шприцем. Его емкость - в пределах 10-20 мл. Предварительно специалист удостоверяется, что шприц не пропускает воздух, только так будет обеспечен необходимый вакуум.

Описание процедуры

Многие пациенты интересуются, как проводится пункция костного мозга, больно ли это? Прокол осуществляется в области тела либо рукоятки грудины. Манипуляцию производят на уровне третьего-четвертого ребра по срединной линии. Стенка тела грудины, расположенная спереди, отличается меньшей толщиной, а ее поверхность ровная либо несколько вогнутая, поэтому является наиболее удобным участком для пункции. Кроме прочего, в этой зоне присутствует большое скопление клеток. У детей пункция костного мозга выполняется в области большеберцового скелетного сегмента с внутренней части дистального эпифиза. Забор материала из подвздошного элемента выполняется на 1-2 см кзади от верхней (передней) ости гребешка. Что касается ребер и остистых отростков позвонков, то пункция костного мозга в этих случаях выполняется на уровне 3-4 позвоночного сегмента. При заборе материала пациент должен сидеть, наклонившись вперед. Участок, где будет совершаться прокол, дезинфицируют йодной настойкой и спиртом. Далее с помощью тонкой иглы надкостницу, подкожную клетчатку и кожу инфильтруют двумя миллилитрами 1-2-процентного раствора новокаина. В качестве местной анестезии покрова может быть использован хлорэтил. Когда проводится пункция костного мозга, больно бывает не всем пациентам. Кто-то ощущает лишь небольшой дискомфорт в области прокола. Некоторые больные плохо переносят процедуру.

Выполнение прокола

Пункционная игла и шприц стерилизуются сухим методом либо кипячением. После этого их тщательно просушивают эфиром или спиртом. Непосредственно перед уколом, используя винтовую нарезку, осуществляют установку предохранителя-ограничителя на нужную глубину. Игла направляется к грудине перпендикулярно по срединной линии. Подкожная клетчатка и кожа прокалываются быстрым движением, далее игла проходит в наружную пластинку. В этот момент сопротивление снижается. Игла, проваливаясь, входит в полость и устанавливается неподвижно и вертикально. Если она подвижна, то, не вынимая ее, предохранитель передвигают немного выше. Далее иглу снова продвигают в полость. При этом необходимо помнить, что при наличии миеломной болезни, рака, остеомиелита и прочих остеолитических процессов при попадании в очаг поражения игла встречается с меньшим сопротивлением и недостаточно хорошо фиксируется.

Взятие материала

Когда игла войдет в полость, мандрен вынимают и насаживают плотно шприц. После этого его поршень оттягивают, закачивая костный мозг в объеме не больше 0.5-1 мл. При взятии большего количества в нем может присутствовать много периферической крови. В случае затруднений при взятии материала, не вынимая иглы снимают шприц, вставляют снова мандрен. Иглу (не вынимая) переводят в иное положение - в стороны, ниже либо выше. Далее снова надевают шприц и закачивают пунктат.

Завершение процедуры

После взятия материала, шприц с иглой вытаскивают из грудины. Участок прокола закрывается стерильной наклейкой. Полученный пунктат переносится на часовое стекло. Из него выбирают костный мозг и готовят тонкие мазки. В случае наличия примеси крови ее удаляют при помощи пастеровской пипетки либо фильтрованной бумаги. Если костный мозг слишком жидкий, то, используя метод лейкоконцентрации, осуществляют отделение клеток от плазмы. Мазки в этом случае делают из осадка.

Важный момент

Особое значение имеет грамотное приготовление мазков и ткани пунктата. При неправильном проведении этого этапа примеси периферической крови не позволят получить точного представления о составе материала. В препарате, приготовленном хорошо, расположение клеток густое, но при этом элементы находятся отдельно, а их структура хорошо просматривается. Мазков рекомендовано делать как можно больше, используя при этом весь полученный материал. Приготовление необходимо осуществлять быстро, поскольку высока скорость свертывания костного мозга (выше, чем у периферической крови). При этом происходит значительное повреждение клеток, из-за чего их невозможно дифференцировать.

Дополнительно

На фоне апластических и гипопластических состояний в мазках присутствует небольшой объем клеток (или они отсутствуют вообще). Выявить, является ли это результатом патологического процесса или следствием неверного выполнения пункции, можно лишь при повторной процедуре. Мазки материала фиксируются и окрашиваются так же, как и мазки периферической крови.

Замедление свертывания

В соответствии с рекомендацией В. И. Каро используют специальный прием. На покрытое парафином часовое стекло насыпается перед пункцией тонкий слой порошкообразного цитрата натрия. Материал сразу же помещают поверх него. Цитрат натрия растворяется в жидком компоненте пунктата, замедляя его свертывание. Мельчайшие частицы вещества не мешают при приготовлении мазков и не деформируют клетки.

Трепанобиопсия

Она применяется в случае, когда не удается получить необходимое количество материала в процессе пункции. Гистологический метод имеет особое диагностическое значение при таких патологиях, как остеомиелосклероз, эритремия, лейкозы и прочие. Спонгиозная ткань (трепанат) богата костным мозгом. На фоне апластических процессов тяжелого течения она желтого цвета. Это обусловлено практически полным отсутствием костномозговых компонентов. На фоне всех форм миелофиброза и остеомиелосклероза полученный фрагмент ткани нередко выглядит "сухим". Из такого материала удается извлечь очень небольшой объем костного мозга для мазков.

Пациентами с тяжелыми анемиями, при подозрении на некоторые виды опухолей и заболеваний крови в период диагностики патологии часто назначается миелограмма.

Это исследование помогает выявить отклонения в косном мозге и в процессах кроветворения. По результатам миелограммы подбирается лечение и оценивается проводимая терапия.

Что такое миелограмма?

Миелограмма на самом деле не сам метод диагностики, а результат микроскопического анализа мазка, полученного из костного мозга.

Пунктат или биопсия красного костного мозга называется также стернальной пункцией и это стандартный диагностический метод в гематологии. Это исследование обязательно проводится одновременно с развернутым анализом периферической крови.

Забор материала берется у взрослых людей из грудины или из подвздошной кости.

Показания и противопоказания

Миелограмма позволяет установить характер эритропоэза, выявляет клетки, появляющиеся при разных патологиях кроветворной системы.

Исследование позволяет подтвердить диагноз , и , .

Изменения в косном мозге выявляются при болезнях Ниммана-Пика, Гоше, при развитии метастазов.

Оценка костномозгового кроветворения совместно с показателями общего и развернутого анализа крови требуется для уточнения причины снижения гемоглобина, то есть анемии.

К абсолютным показаниям, при которых обязательно назначается биопсия костного мозга, относят:

  • Все виды анемий, кроме протекающей типично железодефицитной.
  • Цитопении.
  • Острые лейкозы и хронический вид этого заболевания на начальной стадии развития.
  • Значительное увеличение СОЭ, при котором не удается выяснить основную причину этой патологии. Рост СОЭ может быть у людей с или при множественной миеломе.
  • Повышенный риск развития метастазов в косном мозге у пациентов с разными злокачественными образованиями.

В некоторых случаях миелограмма необходима для выяснения причины железодефицитной анемии и для установления изменений при хроническом длительно протекающем лейкозе. Эти показания для получения пунктата костного мозга считаются относительными.

Стернальная пункция не проводится пациентам:

  • С острым инфарктом миокарда.
  • При остром нарушении мозгового кровообращения.
  • В момент приступа удушья, стенокардии и при гипертоническом кризе.

Подготовка к анализу

Стернальная пункция – это достаточно распространенная процедура и она не требует особой подготовки пациента.

Нет необходимости переходить на изменение пищевого режима, только нужно перед исследованием покушать за два-три часа.

Врач обязательно должен знать обо всех используемых лекарствах, на несколько дней оставляют только те, которые необходимы по жизненным показаниям. Обязательно отменяют гепарин, так как он разжижает кровь и может вызвать кровотечение.

Как проходит процедура?

Стернальная пункция по времени занимает всего несколько минут, проводится она под местным обезболиванием.

Исследование состоит из нескольких этапов:

  • Пациент укладывается на спину на кушетку.
  • Кожа грудины обрабатывается антисептиком.
  • Местные анестетик вводится под кожу и в надкостницу.
  • Прокол грудины делают специальной иглой с полым каналом. Локализация места прокола – уровень грудины напротив третьего ребра и посередине.
  • Глубина прокола контролируется специальным диском, расположенным на игле.
  • Шприцем отсасывается примерно 0,3 мл костного мозга.
  • После удаления иглы на место прокола накладывают стерильную повязку.

Мазок из полученного материала готовится сразу же, в связи с высокой скоростью свертывания крови исследование должно проводиться немедленно. Примерный срок подсчета миелограммы – 4 часа.

Если необходимо получение пунктата из гребня подвздошных костей, то его забирают при помощи специального хирургического инструмента. Детям младшего возраста грудину обычно не прокалывают, а материал получают из пяточной или большеберцовой кости.

Высокий риск прокола грудины имеется у тех пациентов, которые принимают кортикостероиды. Под влияниями этих лекарств часто развивается остеопороз, приводящий к разряжению костной ткани.

Расшифровка результатов миелограммы

Расшифровкой показателей мазка костного мозга занимаются не только гематологи, но и терапевты, онкологи, неврологи. Перед тем как выставить определенный диагноз учитываются данные всех остальных обследований и обязательно показатели анализов крови.

Показатели нормы

Миелограмма в таблице:

Параметр У взрослых У новорож­денных Возраст 3 года Возраст 5-6 лет
Количество миело­кариоцитов,
X 109/л
41,6- 195,0 146,5- 222,5 170,8- 296,8 100,4- 300,0
Количество мегака­риоцитов,
X 106/л
50,0- 150,0 51,8- 108,2 53,8- 113,8 52,8- 157,2
Бластные клетки, % 0,1-1,1 0,7-2,1 1,3-2,7 0-1,2
Промиелоциты 1,0-4,1 4,2-6,2 2,8-5,8 1,2-3,8
Миелоциты 7,0- 12,2 8,1- 12,3 8,5- 11,9 4,2-8,7
Метамиелоциты 8,0- 15,0 6,8-8,8 7,1-9,0 6,5- 10,3
Палочкоядерные 12,8- 23,7 20,0- 25,2 14,0- 25,4 13,2- 24,0
Сегментоядерные 13,1- 24,1 18,0- 23,6 13,3- 22,5 8,3- 13,9
Все нейтрофильные клетки, % 52,7- 68,9 43,0- 54,7
Эозинофилы всех генераций, % 0,5-5,8 2,7-5,3 2,8-6,8 2,4-7,4
Базофилы, % 0-0,5 0-0,3 0-0,1 0,2-0,8
Лимфоциты, % 4,3- 13,7 2,0-3,8 6,7- 14,6 18,7- 29,5
Моноциты, % 0,7-3,1 0-0,1 0-0,2 1,8-5,5
Плазматические клетки, % 0,1-1,8 0,1-0,1 0-0,3 0-0,5
Эритробласты, % 0,2-1,1 1,0-1,8 0,8-2,0 0,3-1,0
Пронормобласты, % 0,1-1,2
Базофильные 1,4-4,6 2,5-5,1 1,4-3,4 1,2-2,4
Полихроматофильные 8,9- 16,9 6,9- 10,6 7,5- 11,2 7,8- 16,0
Оксифильные 0,8-5,6 5,9- 10,0 5,5-7,3 0,1-1,9
Все эритроидные клетки
(эритрока- риоциты), %
14,5- 26,5 11,3- 19,4
Ретикулярные клетки 0,1-1,6 0,6-1,9 0,1-1,4 0,2-1,2
Лейкоэритробластное отношение 2,1-4,5
Индекс созревания эритрокариоцитов 0,8-0,9
Индекс созревания нейтрофилов 0,5-0,9

При каких заболеваниях повышен показатель?

Повышение количества клеточных элементов костного мозга возможно при самых разных заболеваниях системы крови:

  • Рост мегакариоцитов указывает на метастазы в косном мозге, на миелопролиферативные процессы.
  • Повышение соотношения между эритроцитами и лейкоцитами указывает на лейкемоидные реакции, хронический миелолейкоз, сублейкемический миелоз.
  • Повышение бластов больше чем на 20% от нормы бывает при остром лейкозе. До 20% бласты увеличиваются также при остром лейкозе, но еще и миелоидных формах хронического лейкоза и у людей с миелодиспластическим синдромом.
  • Индекс созревания нейтрофилов возрастает у пациентов с бластным кризом, при хроническом миелолейкозе.
  • Миелобласты больше чем на 20% возрастают при бластном кризе, у пациентов с хроническим миелолейкозом. Рост миелобласт менее чем на 20% отмечается и при миелодиспластическом синдроме.
  • Повышение промиелоцитов возникает при лейкемоидных реакциях, промиелоцитарном лейкозе, у пациентов с хронической формой миелолейкоза.
  • Нейтрофильные миелоциты и метамиелоциты возрастают при хроническом миелолейкозе, сублейкемическом миелозе, лейкемоидных реакциях организма.
  • Рост палочкоядерных нейтрофилов указывает на лейкемоидные реакции, на сублейкемический миелоз, миелолейкоз с хроническим протеканием и на синдром «ленивых» лейкоцитов.
  • Сегментоядерные нейтрофилы растут у пациентов с хронической формой миелолейкоза и с сублейкемическим миелозом. Изменение в сторону увеличения этих элементов может быть при синдроме «ленивых» лейкоцитов и при лейкемоидных реакциях.
  • Растущие эозинофилы определяются при аллергических реакциях, злокачественных образованиях, гельминтозах, остром лейкозе, хроническом миелолейкозе и при лимфогранулематозе.
  • Базофилы повышаются при хронической форме миелолейкоза, эритремии, при базофильном лейкозе.
  • Повышение лимфоцитов указывает на апластическую анемию или на хронический лимфолейкоз.
  • Большое количество моноцитов может быть при , туберкулезе, сепсисе, хроническом миелолейкозе.
  • Плазматические клетки костного мозга возрастают в количестве при миеломной болезни, инфекциях, апластической анемии, иммунном агранулоцитозе.
  • Эритробласты откланяются от нормы в сторону увеличения при разных форах анемии и у пациентов с остро протекающим эритромиелозом.

Понижена норма, о чем это говорит?

  • Снижение мегакариоцитов указывает на гипопластические и апластические аутоиммунные и иммунные процессы в организме. Снижение мегакариоцитов определяется у больных после лучевого облучения и приема цитостатиков.
  • Снижение соотношения между лейкоцитами и эритроцитами может возникать по причине кровопотери, гемолиза, эритремии и острого эритро-миелоза.
  • Снижение промиелоцитов возникает при апластической анемии, под воздействием ионизирующего излучения, цитостатиков.
  • Снижение индекса созревания эритробластов наблюдается у больных с В 12 дефицитной анемией, с кровопотерей и отражает неэффективный эритропоэз при проведении гемодиализа.
  • Понижение количества нейтрофильных миелоцитов и метамиелоцитов, палочкоядерных и сегментоядерных указывает на апластическую анемию, иммунный афанулоцитоз, развивается часто под влиянием цитостатиков и ионизирующего излучения.
  • Снижение количества эритробластов возникает при апластической анемии, парциальной красноклеточной аплазии и развивается при приеме цитостатиков и при воздействии на организм ионизирующего излучения.

Осложнения

Стернальная пункция при выполнении опытным врачом практически не дает осложнений.

Если забор пунктата проводится неопытным специалистом, то возможен прокол грудины насквозь, кровотечение. Но чаще возникает инфицирование, избежать которого помогает использование одноразовых инструментов и правильный послеоперационный уход за местом прокола.

Стоимость анализа

Стоимость стернальной пункции и миелограммы в клиниках Москвы начинается примерно от 800 рублей. Средняя стоимость процедуры около трех тысяч.

Пункция - это процедура, которая может иметь диагностические или лечебные цели. Она подразумевает прокол органа для получения необходимого биологического материала для дальнейших исследований. В лечебных целях процедура применяется для введения лекарственных препаратов, аспирации жидкости из кист, суставов, легких и т.д. При диагностике и лечении ряда заболеваний проводится пункция костного мозга .

Необходимость пункции

Необходимость проведения пункции у пациентов обосновывается диагностическими исследованиями, а донорский костный мозг берут для определения его качества, которое играет важную роль при трансплантации. Она проводится из различных костей. Это могут быть грудинные кости, подвздошные и пяточные кости, а также эпифиз большой берцовой кости. В большинстве случаев пункцию из подвздошных и грудинных костей берут у взрослых пациентов. В некоторых случаях для пункции используется остистый отросток позвонка поясничного отдела. Для детей прокол костей грудины является опасным из-за небольшой плотности и толщины костей. Для пункции у детей, в том числе и у новорожденных, используется верхняя треть большой берцовой кости.

Что представляет собой костный мозг?

Внутри всех костей есть содержимое, называемое костным мозгом. Структура костного мозга похожа на губку. Детские кости наполнены красным мозгом. По мере того, как ребенок растет и развивается, красный костный мозг сменяется жировой тканью, которая называется желтым костным мозгом. Но замещение происходит не во всех костях. Грудинные, черепные, трубчатые и позвонковые кости остаются до конца жизни наполненными красным мозгом

Техника проведения пункции

Процедура является серьезной для пациента, поэтому ее проведение можно доверить только опытному врачу. Получение костного мозга из губчатых костей проводится с использованием метода Аринкина. Пункция проводится прокалыванием стенок кости с помощью специальной иглы, которая перед процедурой тщательно высушивается и обезжиривается. На игле устанавливается специальный ограничитель. Расчет глубины погружения иглы производится на основе данных о толщине кожного покрова и подкожной клетчатки. Для проведения пункции используют шприц объемом 10-20 мл. Определяется место, где будет делаться прокол и тщательно обрабатывается спиртом.

Пункция костного мозга может выполняться с применением анестезии или без нее. Если в обезболивании нет необходимости, проводится обкалывание участков кожи и надкостницы вокруг прокола, для которого используют 2% раствор новокаина. Обкалывание новокаином может усложнить процесс морфологического исследования, из-за действия обезболивающих препаратов на костный мозг. Под их воздействием происходит лизирование и деформация костномозговых клеток. Причиной этого может быть попадание лекарственного препарата через кожный прокол.

Подготовка пункционной иглы

Перед началом процедуры ограничитель на игле фиксируется специальным диском, затем вставляется мандрен. Когда игла будет подготовлена к выполнению пункции, ее ставят в перпендикулярное положение на среднюю линию грудины. Прокол выполняется быстрым и точным движением в определенном для пункции месте. При этом одновременно происходит прокол кожи, подкожных тканей и одной стороны кости. О достижении иглой костного мозга говорит ощущение, что она вошла в пустоту. После этого она фиксируется в вертикальном положении, чтобы обеспечить ее неподвижность во время манипуляции по взятию костного мозга. При определенных заболеваниях наблюдается плохая фиксация иглы.

Лабораторные исследования костного мозга

Выделяют следующие типы исследований:

. Перед микроскопическим исследованием мазок костного мозга окрашивают.

Это необходимо для выявления атипичных клеток и других патологических изменений.

Содержащуюся в образце костного мозга кровь устраняют, используя фильтровальную бумагу или пипетку, так как наличие крови не дает возможности дать точную оценку составу костного мозга на клеточном уровне.

Если вам необходимо проведение пункции, приходите в наш медицинский центр в Москве. Процедуру проведут квалифицированные специалисты. Звоните, задавайте вопросы, приходите!

Наиболее полное представление о состоянии кроветворной системы дают изучение пунктата костного мозга (из грудины) и трепанобиопсия, которыми широко пользуются в гематологической клинике.

Как берут пункцию костного мозга:

Пункцию грудины по методу Аринкина производят при помощи иглы Кассирского, которая удобна и безопасна, так как имеет предохранительный щиток. Щиток-ограничитель может быть установлен на требуемую глубину проникновения в зависимости от толщины кожи и подкожной клетчатки и предохраняет от прокола задней пластинки грудины. Костный мозг забирают шприцем емкостью 10-20 мл. Для обеспечения требуемого вакуума предварительно удостоверяются, что шприц не пропускает воздуха.

Производят прокол рукоятки или тела грудины на уровне 3-4 ребра по средней линии. Передняя стенка тела грудины тоньше и имеет ровную или слегка вогнутую поверхность, наиболее удобную для пункции. Кроме того, эта область костного мозга содержит большее количество клеток.
Во время пункции грудины больной лежит на спине.

У детей существует опасность прокола грудины ввиду ее меньшей плотности и индивидуальных различий в толщине кости. Поэтому у детей, особенно у новорожденных и грудных, предпочтительно делать пункцию в верхней трети большеберцовой кости с внутренней стороны дистального эпифиза бедренной кости или пяточной кости.

Пункцию подвздошной кости производят на 1-2 см кзади от передней верхней ости ее гребешка. Можно пунктировать ребра и остистые отростки позвонков (удобнее - 3-4-й поясничные позвонки).

Пункция остистых отростков:

При пункции остистых отростков позвонков пациент занимает сидячее положение, наклонившись вперед. Место пункции дезинфицируют спиртом и йодной настойкой. Затем кожу, подкожную клетчатку и надкостницу при помощи тонкой иглы инфильтрируют 1-2%-ным раствором новокаина в количестве 2 мл. Для анестезии кожи можно применять хлорэтил. Пункцию производят и без обезболивания.

Шприц и пункционную иглу (игла Кассирского) стерилизуют сухим методом или кипячением и тщательно высушивают спиртом, а затем эфиром. Перед тем как сделать укол, при помощи винтовой нарезки предохранитель-ограничитель устанавливают на необходимую глубину прокола. Иглу направляют перпендикулярно к грудине по ее средней линии, быстрым движением прокалывают кожу и подкожно-жировой слой и проходят наружную пластинку грудины. В этот момент уменьшается сопротивление и игла, как бы проваливаясь, входит в полость костного мозга. При этом она устанавливается вертикально и неподвижно. Если игла не находится в неподвижном состоянии, то, не вынимая ее, отодвигают предохранитель несколько выше и вновь продвигают иглу в полость костного мозга.

Следует помнить, что при наличии рака, миеломной болезни, остеомиелита и других остеолитических процессов игла, попадая в очаг поражения, встречает меньшее сопротивление и плохо фиксируется в кости.

После того как игла войдет в полость костного мозга, вынимают мандрен и плотно насаживают шприц. Далее оттягивают поршень шприца и насасывают не более 0,5-1 мл костного мозга (при большем количестве пунктата в нем может содержаться больше периферической крови). Если не удается получить костный мозг, то, не вынимая иглы, снимают шприц, вставляют вновь мандрен и, не вынимая иглы, переводят ее в другое положение - выше, ниже или в стороны. Затем снова с помощью шприца насасывают немного пунктата. После взятия костного мозга иглу, не разъединяя со шприцем, извлекают из грудины, а место прокола закрывают стерильной наклейкой.

Полученный материал переносят на часовое стекло, затем выбирают кусочки костного мозга и готовят из них тонкие мазки. Если пунктат содержит примесь крови, то последнюю удаляют с помощью фильтровальной бумаги или отсасывают пастеровской пипеткой. Если же получено большое количество жидкого костного мозга, то методом лейкоконцентрации отделяют клетки от плазмы и уже из осадка делают мазки. Очень большое практическое значение имеет правильное приготовление мазка из ткани костного мозга, иначе примесь периферической крови не даст точного представления о клеточном составе костного мозга. В хорошо приготовленном препарате клетки расположены густо, но отдельно, и их структура хорошо видна.

Рекомендуется делать как можно больше мазков, использовав для этого весь полученный материал костного мозга. Мазки необходимо готовить быстро, так как свертывание костного мозга наступает быстрее, чем периферической крови. При этом клетки повреждаются настолько, что их невозможно дифференцировать.

При гипопластических и апластических состояниях костного мозга мазки содержат небольшое количество клеток, а иногда они полностью отсутствуют. Вопрос о том, является ли это следствием патологических процессов или результатом неправильно проведенной пункции, можно решить при повторной пункции. Мазки пунктата фиксируют и окрашивают так же, как и мазки периферической крови.

Для замедления свертывания пунктата костного мозга, которое создает известные трудности при его исследовании, В.И. Каро рекомендует следующий простой прием: на часовое стекло, покрытое парафином, перед пункцией насыпают очень тонким слоем (припудривают) порошкообразный цитрат натрия. Полученный при пункции костный мозг сразу же помещают на часовое стекло поверх цитрата натрия, который, растворяясь в жидкой части пунктата, тормозит его свертывание. Мельчайшие кристаллики цитрата натрия не мешают приготовлению мазков, не деформируют клеток.

Трепанобиопсия подвздошной кости:

Прижизненное изучение гистологических препаратов, полученных методом трепанобиопсии, становится необходимым в тех случаях, когда при пункции не удается получить достаточное количество костного мозга, подтверждающее тот или иной патологический процесс. Гистологический метод приобретает особо важное значение при таких заболеваниях, как лейкозы, эритремия, остеомиелосклероз, гипо- и апластические процессы и др.

Для прокола и извлечения кусочка костной ткани М.Г. Абрамов предложил пользоваться иглой-троакаром. Игла сконструирована по принципу стернальной иглы Кассирского. Толщина иглы-троакара - 3 мм, внутренний диаметр - 2 мм, длина - 6 см. Периферический конец иглы имеет подобие фрезы и спиралевидное очертание, благодаря чему игла приобретает способность при ее вращении срезать костную ткань. Составными частями иглы являются мандрен (стилет с заостренным концом) и рукоятка. В.А. Ершов, Н.А. Климков модернизировали иглу-троакар Абрамова, сделав ее более удобной в работе. Игла отличается от описанной выше тем, что мандрен ее ввинчивается в нижний конец рукоятки и при проколе кортикального слоя быстро извлекается из иглы без предварительной разборки, что ускоряет процесс трепанобиопсии.

Прокол производят в гребешок подвздошной кости, отступив 2-3 см кзади от ее передней верхней ости. Технически удобнее прокалывать левую подвздошную кость. Место прокола дезинфицируют спиртом и йодной настойкой. Предварительно иглу стерилизуют сухим методом или кипячением и высушивают спиртом и эфиром. На сухой игле при помощи винтовой нарезки устанавливают щиток-ограничитель на необходимую глубину прокола с учетом толщины подкожного жира. Перед введением иглы-троакара производят анестезию кожи, подкожной клетчатки и надкостницы 2%-ным раствором новокаина.

Проникнув иглой-троакаром в мягкие ткани, нащупывают концом заостренного мандрена место кости, где должен быть произведен прокол. Иглу вводят в костную ткань под некоторым давлением вращательными движениями. При появлении ощущения прочной фиксации иглы мандрен извлекают. Разъединив мандрен и ручку, последнюю вновь навинчивают на иглу, зафиксированную в кости. Производя вращательное движение по часовой стрелке, иглу без большого труда удается ввести в спонгиозное вещество костной ткани.

После этого вращательным движением иглу извлекают. Цилиндрический столбик костной ткани, находящейся в игле, выталкивают мандреном из просвета иглы на предметное стекло, а оттуда переносят в банку с формалином и отправляют на гистологическое исследование. Из оставшегося на стекле, в игле и на мандрене костного мозга делают мазки. Чаще всего удается вырезать и извлечь кусочек костной ткани длиной от 6 до 10 мм, иногда больше.

Трепанат (спонгиозная костная ткань) у здоровых людей и у больных с гиперпластическими процессами богат костным мозгом. При тяжелых апластических процессах трепанат имеет желтый цвет, что обусловливается почти полным исчезновением костно-мозговых элементов и заменой их жировой тканью.

При всех формах остеомиелосклероза и миелофиброза извлеченный кусочек костной ткани выглядит нередко “сухим”, и из него удается извлечь лишь очень небольшое количество костного мозга для приготовления мазков.

Казалось бы, о состоянии системы крови можно и нужно судить по общему анализу – с детства известной рутинной медицинской процедуре. Но на самом деле, данные этого анализа — отражение процессов, происходящих в кроветворной системе, и ее главном органе – костном мозге. Поэтому при подозрении на болезнь кроветворной системы анализируют состояние костного мозга. Пункция костного мозга – это вмешательство, которое позволяет получить 0,5-1мл. этой субстанции для дальнейшего исследования.

Что такое костный мозг и зачем его изучают?

Красный костный мозг находится в плоских костях – ребрах, грудине, позвонках, костях черепа и таза – и в эпифизах (концевых частях) трубчатых костей. Он состоит из двух типов клеток – стромы, или, говоря простым языком, основной структуры, и кроветворных ростков из которых, собственно, и формируются форменные элементы: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты.

Все элементы крови развиваются из одинаковых стволовых клеток-предшественников. Созревая (в медицине этот процесс называется дифференцировкой), клетки формируют два ростка кроветворения: лимфоидный, из которого потом созревают лимфоциты и миелоидный, создающий остальные форменные элементы. Незрелые клетки крови называются бластами. Обычно 90% всех стволовых клеток находятся в состоянии покоя.

В организме взрослого мужчины в сутки созревает 300г. форменных элементов крови, то есть 9 кг за год и около 7 тонн за 70 лет жизни. Новые клетки формируются взамен состарившихся или погибших по другим причинам (например, в борьбе с инфекциями).

В норме количество вновь созревших клеток строго равно числу погибших. При гемобластозах (лейкозах) клетки кроветворного ростка мутируют, перестают реагировать на регуляторные сигналы организма, и начинают бесконтрольно делиться. Если активность этого процесса настолько велика, что вновь сформированные клетки не успевают созреть, лейкоз называется острым. Если преобладают зрелые формы – хроническим.

Прежде чем выйти в кровоток, измененные лейкозные клетки накапливаются в красном костном мозге. И только инфильтрировав (заполонив) его, поступают сосуды. Изменения в далеко не всегда соответствуют происходящему в костном мозге: на некоторых стадиях развития лейкоза количество форменных элементов в крови может не только не увеличиваться, но и уменьшаться.

Если же баланс нарушается в другую сторону, и созревание клеток крови не успевает за их гибелью, формируются анемии, тромбоцитопении, лейкопении. И опять изменения в периферической крови могут «не поспевать» за процессами, происходящими в костном мозге.

Именно по этим причинам пункцию костного мозга и миелограммы выполняют при подозрении на любые болезни кроветворной системы.

Как и для чего выполняют пункцию костного мозга?

Чтобы получить материал для исследования, нужно проткнуть (пунктировать) кость там, где она находится близко к коже. В зависимости от возраста (а количество костного мозга в разных анатомических структурах изменяется со временем), это могут быть:

  • у детей младше 2 лет – пяточная или большеберцовая кость;
  • у детей старшего возраста – гребень подвздошной кости;
  • у взрослых – грудина или гребень подвздошной кости.

Игла для стернальной пункции

Прокол делают специальной иглой с ограничителем – иглой Кассирского.

Она может выглядеть по-разному. Но суть в том, что ограничитель позволяет зафиксировать глубину прокола.

Методика

Пункцию ребенку обычно делают под общей анестезией, «наркозом». Взрослому – под местной. Обезболивающим «обкалывают» не только кожу, но и надкостницу, тем не менее момент непосредственной аспирации (всасывания) пунктата, довольно болезненный. Из полученного пунктата делают мазки для исследования под микроскопом и пробы для автоматического подсчета клеток.

Иногда полученный материал бывает неинформативен. Тогда (и при некоторых других показаниях) делается трепанобиопсия – метод, при котором специальной толстой иглой одним блоком забирают не только красный костный мозг, но и участок костного фрагмента над ним. Такую биопсию обычно делают в области гребня подвздошной кости.

Место прокола закрывается стерильной повязкой или пластырем. Боль может беспокоить и некоторое время после процедуры. Если нет противопоказаний, можно принять обезболивающие. Место прокола нельзя мочить в течение суток, соответственно, не рекомендуют принимать душ или ванну. Какого-то дополнительного ухода после пункции костного мозга не требуется.

Противопоказания

Процедура эта безопасна, единственное абсолютное противопоказание – тяжелые нарушения свертывающей системы крови, когда любая травма приводит к обширным гематомам. Относительные противопоказания (когда сравнивают возможную пользу и вред), это:

  • острый инфаркт миокарда;
  • декомпенсированная сердечнососудистая патология;
  • декомпенсированный сахарный диабет;
  • гнойные поражения кожи в области предполагаемой пункции.

Возможные осложнения

  • кровотечение;
  • инфицирование;
  • аллергия – при непереносимости обезболивающих средств;
  • сквозной прокол грудины, перелом (если пункция выполняется из грудины).

Вероятность осложнений невелика – по данным Британского общества гематологов за время с 1995 по 2001 год на 54890 проведенных пункций пришлось 26 осложнений разной степени тяжести.

Расшифровка и оценка результатов: миелограмма.

В первую очередь, в счетной камере подсчитываются мегакариоциты и миелокариоциты.

Миелокариоцитами называют те клетки костного мозга, содержащие ядро, то есть подсчет их – это оценка «клеточности» костного мозга, активности кроветворения. В норме — 8тыс. – 150тыс. в 1 мкл.

Мегакариоциты – это крупные клетки с большими ядрами, предшественники тромбоцитов. Их должно быть более 20, но менее 50 в 1 мкл.

Непосредственно перед подсчетом мазок обязательно рассматривают при небольшом увеличении – это позволяет оценить картину «в целом», увидеть патологические опухолевые клетки.

Итак, отвечая на вопрос «нормальная миелограмма – что это такое», нужно сказать, что это процентное соотношение кроветворных клеток на разной стадии созревания.

Чтобы оценить по миелограмме качество костного мозга, важно знать не только процентное и количественное содержание гемопоэтических (кроветворных) элементов, но и их соотношение. Вот расшифровка некоторых показателей.

Индекс содержания лейко/эритро или соотношение между предшественниками белых и красных кровяных клеток.

В норме 2:1 – 4:1. Если индекс увеличен при «богатом» костном мозге, это, скорее всего, говорит о чрезмерной активности белого ростка (например, развернутой стадии хронического лейкоза). Увеличение индекса при «бедном» костном мозге может стать показателем сниженной активности красного ростка (апластических анемиях). Если индекс снижен при «бедном» костном мозге, это может быть показателем чрезмерной активности красного ростка кроветворения или о снижении активности белого ростка.

Индекс созревания нейтрофилов.

Высчитывается по формуле: (Промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты) / (Палочкоядерные + сегментоядерные нейтрофилы). Нормальное значение 0,6 – 0,8.

Повышение индекса при «богатом» костном мозге свидетельствует о задержке созревания нейтрофилов (к примеру, при хроническом миелолейкозе), при «бедном» костном мозге – о чрезмерно активной продукции (и расходе) зрелых клеток и истощении резерва кроветворение – подобная ситуация возможна при тяжелом сепсисе. Снижение индекса при «богатом» костном мозге может означать ускоренное созревание гранулоцитов или их задержку в костном мозге.

Индекс созревания нормобластов.

Формула расчета: (Полихроматофильные + оксифильные нормобласты) / (Все ядросодержащие клетки красного ростка этого пунктата). Норма 0.8 – 0.9 и снижение индекса говорит о чрезмерно медленном наполнении гемоглобином эритроцитов (например, при железодефицитной анемии).

Как и у любого инструментального исследования, референсные значения (нормы) миелограммы могут изменяться в зависимости от лаборатории и используемых аппаратов.

Особенности миелограммы при лейкозах.

Лейкемический клон, активно делясь, нарушает нормальный гемопоэз (выработку и созревание клеток крови). Патологические клетки вырабатывают вещества, подавляющие размножение и дифференцировку других ростков кроветворения. Отягащяющим фактором является то, что эти клетки «захватывают» все ресурсы, и на нормальные форменные элементы резервов организма просто не хватает. Поэтому при в костном мозге преобладают опухолевые клетки, какие именно – зависит от вида лейкоза, а клетки других ростков кроветворения будут присутствовать в количествах значительно меньших, чем нормальные. При остром лейкозе главный диагностический критерий – 25% и более бластных клеток. При хроническом лейкозе число бластов остается в пределах нормы или незначительно повышено, резко увеличено количество клеток пораженного ростка на разных стадиях созревания. Например, при хроническом лимфолейкозе увеличивается количество лимфоцитов, при миелолейкозе – промиелоцитов, миелоцитов и миелокариоцитов и так далее.

Как при остром, так и при хроническом лейкозе усиленный рост патологических клеток сопровождается уменьшением количества эритроцитов и тромбоцитов на всех стадиях созревания.

Если в миелограмме видны признаки лейкоза, пунктат костного мозга дополнительно проходит иммуногистохимическое, цитохимическое и генотипическое исследования – они нужны чтобы определить характерные особенности мутации опухолевого клона. Это важно для выбора схемы лечения конкретного пациента.