Тест ифа 4 поколения комбо. Анализ крови ифа на вич-инфекции. А какие подтипы выявляет ИФА? Что если я заразился редким подтипом и тест его не видит

Анализ крови на ВИЧ или тест на ВИЧ включает в себя несколько методов лабораторной диагностики, позволяющих выяснить присутствие вируса иммунодефицита (ВИЧ), обнаружить антитела к его белкам (иммуноглобулины) или антигены (белки вируса) в крови больного, слюне или моче. Вирусу иммунодефицита человека присуща уникальная антигенная изменчивость, что связано с большой скоростью транскрипции (размножения), в связи с чем затрудняется как диагностика ВИЧ-инфекции, так и ее профилактика.

В основе диагностики ВИЧ-инфекции, как и любого другого инфекционного заболевания лежит:

эпидемиологический анамнез,
характерные жалобы больного,
клиническая картина заболевания,
данные лабораторных методов исследования.

Как только диагноз ВИЧ-инфекции установлен, с целью уточнения характера течения основного заболевания и вторичных заболеваний проводится дальнейшее обследование больного и назначается соответствующее лечение.

Тяжесть заболевания оценивается по уровню концентрации вирусов в крови, количеству CD4-лимфоцитов и определению антигена р24.

Основные виды диагностики ВИЧ-инфекции

Вирусологическая диагностика основана на выявлении ВИЧ в тканях и биологических жидкостях больного.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) применяется с целью выявления вируса и оценки вирусной нагрузки, что позволяет судить об эффективности специфического лечения и прогнозировать течение инфекционного заболевания.

Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции предполагает выявление антигенов вируса и антител в сыворотке крови. Обнаружение антител к с помощью ИФА (иммуноферментного анализа) является основным методом лабораторной диагностики. Все положительные результаты подтверждаются методом иммуноблоттинга. основан на выявлении антител в крови и биологических жидкостях исследуемого. Используются в случаях, когда необходимо быстро получить результат.

Уровень иммуносупрессии определяется методикой подсчета СD4 и СD8-лимфоцитов, с последующим определением соотношения CD4: CD8.

Каждый из лабораторных методов диагностики ВИЧ-инфекции характеризуется определенной чувствительностью (% верно определенных среди заведомо (+) образцов) и специфичностью (% правильно определенных тестов среди заведомо отрицательных образцов). Результаты теста на ВИЧ интерпретируются как отрицательные, положительные или сомнительные.

Рис. 1. На фото слева ВИЧ заражают иммунную клетку (обозначено желтым). На фото справа лимфоцит, поражённый ВИЧ. Вытянутые структуры на поверхности клетки вызваны гиперпродукцией белка.

Рис. 2. На фото зафиксирован процесс выхода (отпочкования) вирионов из инфицированной клетки.

Анализ крови на ВИЧ. Что надо знать

Анализ крови на ВИЧ может сделать любой житель нашей страны по своему желанию анонимно и бесплатно. Но есть категории лиц, которые обследуется на ВИЧ в обязательном порядке. К ним относятся:

все доноры крови и ее компонентов, а также тканей и других биологических жидкостей;
лица, которым была проведена трансфузия или осуществлена трансплантация (проводится в течение первых 3-х месяцев после проведения процедуры);
беременные;
лица, пострадавшие в результате аварии;
лица, имеющие клинические показания — лихорадку, диарею, постоянный кашель и увеличение более 2-х групп лимфатических узлов, длящиеся более 1-го месяца, необъяснимую потерю веса, СПИД-ассоциированные и оппортунистические инфекционные заболевания, соматическая и онкопатология;
иностранные граждане;
лица из группы риска (наркоманы и страдающие венерическими заболеваниями).

Тест на ВИЧ необходимо проводить всем, кто был подвергнут риску заражения.

Рис. 3. Анализ крови на ВИЧ в нашей стране можно сдать анонимно и бесплатно.

Где сдать кровь на ВИЧ

Анализ на ВИЧ можно сдать бесплатно в учреждениях здравоохранения, работающих на бюджетной основе при наличии паспорта и медицинской страховки. Врачи при этом обязаны хранить врачебную тайну. Бесплатно и анонимно можно сдать анализ в Центрах профилактики и борьбы со СПИДом и там же получить врачебную консультацию до и после обследования. На платной основе проводится тестирование на ВИЧ в коммерческих лечебных учреждениях. Тест на ВИЧ может пройти любой человек, временно проживающий на данной территории.

В лаборатории будет сделан анализ крови на ВИЧ иммуноферментным методом (ИФА).

Анализ на ВИЧ анонимно

В государственных учреждениях здравоохранения (поликлиниках и больницах) анонимно сдать анализ крови на ВИЧ нельзя. Сведения о результатах исследования будут известны узкому кругу медиков, которые обязаны хранить врачебную тайну.

Кабинеты анонимного тестирования существуют на базах Центров СПИДа, где каждому исследованию присваивается номер.

Рис. 4. Пробирки с кровью отправляются на серологическое исследование.

Анализ на ВИЧ принудительно

Существует четыре группы населения, тестирование на ВИЧ которых является обязательным, но не насильственным:

Доноры крови и другого биологического материала.
При устройстве на работу в учреждения, где работник может иметь контакт с заведомо инфицированным материалом и больными.
Иностранные граждане при получении виз для проживания (более 3-х месяцев) на территории РФ.
При наличии клинических показаний лицам, находящихся в местах лишения свободы.

Принудительное тестирование населения на ВИЧ является бесперспективным и противоречит соблюдению прав человека. Принудительное тестирование населения в РФ является незаконным.

Рис. 5. Тестирование на ВИЧ осужденных проводится по клиническим показаниям.

Сколько стоит анализ на ВИЧ

В государственных учреждениях обследование на ВИЧ бесплатное, в частных клиниках — платное:

Стоимость ИФА составляет от 400 до 800 руб. Ответ будет готов по истечении одних суток. Существует срочная диагностика, когда ответ можно получить в течение 2-х часов.
Стоимость анализа на ВИЧ методом иммуноблота составляет от 3 до 5 тыс. рублей. Результат будет готов через 4 — 7 дней.
Стоимость теста на ВИЧ методом ПЦР составляет 10 — 12 тыс. руб. Результат будет готов через 10 — 14 дней.

Сколько делается анализ на ВИЧ

В государственных учреждениях срок получения результатов анализа на ВИЧ составляет:

При применении ИФА 3-го поколения результаты дают самый достоверный результат через 12 недель от момента предполагаемого инфицирования.
При применении ИФА 4-го поколения — 6 недель.
При применении ПЦР — 4 недели.

Как сдавать анализ на ВИЧ

Сдавать анализ на ВИЧ необходимо не ранее, чем через 3 — 4 недели от предполагаемого заражения.
Тестирование проводится не ранее, чем через 8 часов после приема пищи.

Из жидкости можно употреблять только обычную воду.

Для анализа осуществляется забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены, для чего используется обычный шприц или игла с помпой.
До транспортировки в лабораторию сыворотка крови может храниться в холодильнике до 7-и дней. Без холодильника не более 30 минут после забора.
Транспортировка пробирок с сывороткой крови осуществляется в специальных термоконтейнерах при температуре +4 — +8 о С.

Рис. 6. Для анализа на ВИЧ необходимо провести забор 3 — 5 мл крови, взятой из локтевой вены — для чего используется обычный шприц (фото слева) или игла с помпой (фото справа).

При заборе крови из вены вирусом иммунодефицита человека заразиться невозможно.

Ложноположительный анализ на ВИЧ и другие виды результатов исследования

Результаты анализа на ВИЧ могут трактоваться как положительные, отрицательные и сомнительные.

Сомнительный результат теста на ВИЧ получается при присутствии в сыворотке крови антител, которые перекрестно реагируют с белками вируса иммунодефицита человека. Анализ в данном случае сдается повторно, а при его проведении будут применяться белее специфичные тест-системы. Если сомнительный результат сохраняется, то тестирование необходимо проводить каждые 1 — 3 месяца в течение полугода.

Положительный результат теста на ВИЧ (серопозитивный) говорит о наличии в крови исследуемого антител к вирусу. В данном случае иммуноферментный анализ (ИФА) повторяется и при получении повторного положительного результата подтверждается тестом иммуноблотинга с тем же образцом крови.

Отрицательный результат теста на ВИЧ (серонегативный) говорит об отсутствии ВИЧ-инфекции, либо инфицирование произошло совсем недавно и в крови обследуемого еще не выработались антитела (период «окна»). В таком случае обследование следует повторить через 3 и 6 месяцев.

Ложноположительный результат теста на ВИЧ регистрируется тогда, когда его причиной явился не вирус иммунодефицита человека, а беременность, аутоиммунное заболевание, аллергия, любое другое инфекционное заболевание, недавно сделанная прививка, онкопатология, трансплантация органа и даже обычная еда (семечки, острая, жирная и кислая пища, употребленная накануне, и даже минеральная сильногазированная вода). Большое количество ложноположительных результатов получается при проведении тестирование в домашних условиях.

Ложноотрицательный результат теста на ВИЧ говорит о том, что вирус в крови больного присутствует, но антитела еще не выработались. При проведении анализа ПЦР ложноотрицательный результат может быть получен у ВИЧ-инфицированных больных в период проведения специфического лечения, когда концентрация вирусов в крови настолько мала, что приводит к несрабатыванию тест-системы. В большинстве случаев ложноотрицательный результат получается при технической ошибке или браке в тест-системе, что встречается крайне редко ввиду проведения жесткого контроля качества на всех уровнях.

Анализ на ВИЧ необходимо отложить минимум на две недели после перенесенного инфекционного заболевания или вакцинации.

Рис. 7. Проведение серологического исследования крови.

Тест-системы, определяющие наличие антител к ВИЧ

При помощи тестирования на антитела к вирусу иммунодефицита человека оценивается ответ организма на инфицирование. С этой целью применяется иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), позволяющий обнаружить антитела к белкам вируса и подтверждающий анализ иммуноблотинг (вестерн-блот), при помощи которого определяется реакция антител на белки вируса.

Антитела к ВИЧ

Вирусы иммунодефицита человека обладают антигенными свойствами и при попадании в организм человека вызывают синтез антител — специфических иммуноглобулинов. С помощью современных тест-систем в сыворотке крови и других биологических жидкостях больного ВИЧ можно определить класс иммуноглобулинов (антител). Раньше всех (через неделю после инфицирования) появляются иммуноглобулины класса IgМ. Их рост отмечается в течение месяца и далее они сохраняются еще около 30 дней. Иммуноглобулины класса IgG циркулируют в крови несколько лет. Их выявление является показателем наличия ВИЧ-инфекции.

Антитела к ВИЧ появляются через 2 — 4 нед. после инфицирования и далее они определяются в крови на протяжении всего заболевания.

Период «окна» при ВИЧ

Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела появляются в крови в среднем через 2 — 3 месяца от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной становится опасным в плане заражения контактных лиц. Выявить инфицированного можно через более короткий (1 — 2 недели) период после заражения, для чего применяется полимеразная цепная реакция (ПЦР). Однако из-за дороговизны данный вид исследования для скрининга не используется.

Иммуноферментный анализ при диагностике ВИЧ

У 90 — 95% инфицированных лиц антитела в сыворотке крови появляются через 3-и месяца после заражения, У небольшой части больных (5 — 9 %) антитела появляются в период от 3 до 9 месяцев и у 0,5 — 1% — в более поздние сроки. В терминальной стадии СПИДа количество антител снижается значительно, а в некоторых случая исчезают вовсе.

С 1985 года данная методика используется на территории РФ с целью массовых исследований. Он прост в исполнении, показывает довольно точные результаты, является дешевым по сравнению с другими методиками. В связи с возможностью получения ложноположительных результатов все положительные результаты исследуются дважды, после чего сыворотка крови больного исследуется подтверждающим тестом — иммунного блота. При этом используется тот же образец крови. При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.

В РФ используются обычно ИФА 4-го поколения. Исследование проводится с целью получения суммарного спектра антител против белков (антигенов) ВИЧ — р24 и gр160.

Тест видит как антитела, которые вырабатываются организмом больного, так и антигены (белки вируса) р24. «Период окна» для тестов 4-го поколения более короткий. Уже через месяц можно получать достоверные результаты. Однако более надежными, как считают специалисты здравоохранения РФ, являются сроки 6, 8 или 12 недель.

Рис. 8. На фото иммуноферментные анализаторы.

Рис. 9. На фото иммуноферментный автоматический анализатор.

Для первичного обследования групп лиц с целью выявления ВИЧ-инфекции применяется только методика ИФА.

Метод иммуноблотинга

Метод иммуноблотинга является более точным, чем ИФА, по мнению большинства специалистов — эталонным. С его помощью в сыворотке крови обнаруживают антитела к белкам ВИЧ. Методика применяется с целью подтверждения результатов, полученных при проведении ИФА. Обладает высокой специфичностью. Ложноположительные результаты встречаются редко. Достоверность полученных результатов достигает 99%. Иммуноблотинг является дорогостоящей методикой и требует высокой специализации специалиста, проводящего исследование. Возможно получение сомнительных результатов.

Метод основан на разделении антигенов (белков) ВИЧ с применением электрофореза по молекулярной массе. Первыми при инфицировании выявляются антитела против капсидных белков «Gag» (р24 и р17) и прекурсор р55. Вслед за ними появляются антитела против суперкапсидных белков «Env » (гликопротеидов gр 160, gр120, gр41 и белков р88) и неструктурных белков «Pol» (р31, р51 и р66). В ряде случаев могут определяться антитела против генов «vpu », «vpr », «vif », «tat », «nef », «rev », «tat ».

Сыворотка крови больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержит антитела ко всем белкам вирусов, но для подтверждения диагноза определяются у ВИЧ-1 только антитела к белкам р24, gр41, gр120 и gр160, у ВИЧ-2 — антитела к белкам gр105, gр140 и gр36.

При наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе ставиться диагноз ВИЧ-инфекции.

Рис. 10. Аппарат для проведения исследования методом иммуноблота.

Рис. 11. Диагноз ВИЧ-инфекции ставиться при наличии 2-х положительных результатов с применением ИФА и иммуноблота в одной пробе.

Тест-системы для подсчета СД4-лимфоцитов

Одним из иммунологических тестов, применяемых при ВИЧ-инфекции, является методика подсчета СD4 и СД8-лимфоцитов в крови.

СD4-лимфоциты (Т-хелперы) поражаются вирусами иммунодефицита. Постепенное истощение их популяции приводит к снижению иммунитета и организм больного перестает противостоять инфекции. Подсчет CD4-лимфоцитов осуществляется методом проточной цитометрии с помощью автоматических анализаторов или вручную при оптической или флюоресцентной микроскопии. По количеству СD4-лимфоцитов определяется время начала специфического лечения (антиретровирусной терапии) и профилактики оппортунистических инфекций, оценивается эффективность лечения.

При количестве CD4-лимфоцитов в сыворотке крови от 500 и ниже в 1 мл говорит о развитии иммунодефицита.
При снижении количества CD4-лимфоцитов до 200 в 1 мл (норма от 600 до 1900 клеток в 1 мл) развивается синдром приобретенного иммунодефицита — СПИД.
При снижении уровня CD4-лимфоцитов до 50 и ниже в 1 мкл СПИД переходит в терминальную стадию.

Удельный вес CD4-лимфоцитов среди всех лимфоцитов в норме составляет около 40%. Снижение показателя до 20% говорит о развитии СПИДа.

CD 8-лимфоциты (Т-киллеры, на англ. killer - убийца) уничтожают вирусы ВИЧ путем цитолиза. Их пролиферация (увеличение количества) зависит от активности Т-хелперов. При ВИЧ-инфекции количество CD4 и CD8-лимфоцитов уменьшается, но более всего падает уровень CD4-лимфоцитов. Соотношение CD4/ CD8 в норме составляет 1,5 — 2,5. При снижении количества CD4- лимфоцитов отмечается снижение индекса.

Его величина менее 1 говорит о развившемся иммунодефиците, при показателе соотношения 0,6 — 0,8 развивается СПИД.

При получении положительных результатов тестирования человек должен стать на учет в государственное учреждение Центр профилактики и борьбы со СПИД, где будет установлен мониторинг за его состоянием и назначено адекватное специфическое лечение.

Рис. 12. На фото проточные автоматические анализаторы с помощью которых осуществляется подсчет CD4-лимфоцитов в крови исследуемого.

Тест на ВИЧ с применением ПЦР

Все большее распространение в последние годы получает молекулярно-генетический метод диагностики ВИЧ-инфекции — полимеразная цепная реакция (ПЦР). С ее помощью определяется генетический материал возбудителя — РНК уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения, а высокая чувствительность теста позволяет выявлять РНК вирусов даже если их в исследуемом материале находятся единицы. Данная методика является дорогостоящей и поэтому в настоящее время для скрининга не используется. К тому же значимой проблемой исследования является возможность получения ложноположительных результатов.

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Суть данной методики заключается в получении множества копий РНК вируса (нуклеиновой кислоты), в последующем выявляемых как по характерному строению, так и с помощью меченых ферментов или изотопов.

Возможности ПЦР при ВИЧ-инфекции

С помощью ПЦР можно разрешить сомнительные результаты, полученные при применении методики иммуноблотинга, диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях (уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения), контролировать эффективность проводимой антиретровирусной терапии, определять стадию заболевания.

Рис. 13. На фото слева нормальный Т-лимфоцит, справа — Т-лимфоцит, инфицируемый ВИЧ. Видны множественные пузыри, между которыми появились новообразованные вирусы (мелкие округлой формы образования). С помощью ПЦР ВИЧ-инфицированность выявляется уже через 1 — 2 недели после предполагаемого заражения.

Преимущества методики ПЦР при ВИЧ

С помощью ПЦР возможно выявить сам вирус и его количество.
Возможность использования у детей младше полутора лет.
Проводить оценку эффективности лечения.
Определить тяжесть и прогноз заболевания.

Недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Большая стоимость исследования.
Наличие специализированных лабораторий.
Длительность получения результатов (до 4-х недель).

Кому проводится ПЦР

Получение результата на 7 — 10 день лицам в случае предполагаемого инфицирования, когда желателен результат, полученный в короткие сроки.
Для определения срока начала и оценки эффективности проводимого лечения.
ПЦР проводится инфицированным беременным за 4 недели до родов с целью решения вопроса о применения кесарево сечения.
Новорожденным от инфицированных матерей. Дважды полученный положительный результат свидетельствует о заражении ребенка.

В обычных условиях для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции ПЦР не используется

РНК ПЦР и ДНК ПЦР. В чем разница

РНК ПЦР доказывает факт наличия вируса иммунодефицита в крови и объем выявленной РНК. Данное исследование применяется у диагностированных лиц с целью оценки эффективности проводимой терапии.
С помощью ДНК ПЦР определяется наличие вируса в мононуклеарных клетках у детей, когда антитела к вирусу иммунодефицита человека у матери мешает использовать методику ИФА.

Вирусная нагрузка определяется путем подсчета количества РНК-копий в 1 мл плазмы крови, что позволяет определить стадию заболевания, провести анализ проводимого специфического лечения, определить тяжесть и прогноз заболевания. Чем выше вирусная нагрузка, тем меньше в плазме крови регистрируется CD4-лимфоцитов.

Интерпретация результатов:

РНК либо не выявлена, либо число копий РНК менее 20 в 1 мл. плазмы.
РНК выявлена на пределе чувствительности — менее 20 копий/мл.
РНК от 20 до 10 6 копий в 1 мл плазмы крови говорит о достоверности результата.
РНК-копий более 10 6 мл — верхний предел линейного диапазона.

Увеличение вирусной нагрузки у больного с ВИЧ-инфекцией в три и более раза является клинически значимым результатом.

Контроль над вирусной нагрузкой проводится каждые 3 месяца у больных, лечение которым еще не проводится. В случае начала проведения антиретровирусной терапии контроль осуществляется через 2 — 8 недель.

Рис. 14. ПЦР в последние годы пользуется все большей популярностью.

Рис. 15. Амплификаторы для проведения ПЦР.

Тест на ВИЧ необходимо проводить на ранних сроках инфицирования и периодически при заболевании, что обеспечит своевременное назначение антиретровирусной терапии предупреждение и развития грозных инфекционных и онкологических процессов.

Культивирование вируса

Обнаружить вирусы, его РНК, ДНК, антигены и антитела можно не только в сыворотке крови, но и сперме, слюне, содержимом влагалища и др. Культивируют ВИЧ в культуре клеток лимфоцитов. Методика является высокочувствительной и специфичной (до 100%), однако дороговизна исследования не позволяет его использовать в повседневной лабораторной работе.

Общий анализ крови на ВИЧ

В результате поражения вирусами иммунодефицита человека кроветворных органов отмечается угнетение кроветворения, что проявляется снижением числа лимфоцитов (лимфопения), нейтрофилов (нейтропения), тромбоцитов (тромбопения) и анемия. К тому же на разрушение клеточных популяций оказывают влияние аутоиммунные процессы, развивающиеся у ВИЧ-инфицированных больных. В сыворотке крови больных доминирут иммуноглобулины IgG.

Рис. 16. Забор крови из вены и пальца для анализов.

Сегодня сдать анализ на ВИЧ можно любому человеку анонимно и бесплатно за считанные минуты, а современное оборудование и обученный персонал позволяют получить максимально точные результаты.

Какие тесты бывают на ВИЧ?
Для скрининга применяется метод ИФА. Для подтверждения диагноза применяется иммуноблот. Подробнее — ниже. Для выявления ВИЧ применяется качественный (т.е. есть или нет, без ответа на вопрос «сколько?») ПЦР РНК или ДНК ВИЧ, данный метод является по сути вспомогательным и его не следует использовать для скрининга ВИЧ-инфекции. У лиц с диагностированной ВИЧ-инфекцией применяется количественный метод ПЦР на РНК ВИЧ, он позволяет ответить на вопрос: сколько вируса в крови?. Его так же не следует применять для диагностики.

Чем лучше тесты 4 поколения? Чем отличается разные поколения ИФА?
Они детектируют ВИЧ-инфекцию раньше, так как «видят» не только антитела, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию, и на выработку которых нужно некоторое время, но и непосредственно антиген ВИЧ p24. Антиген ВИЧ p24, это белок вирусного капсида (core компонент), суть — непосредственно кусочек вируса, понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела — белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой. Когда начинают обнаруживаться в большом антитела против ВИЧ, антиген p24 часто уже не выявляется, вероятнее всего в результате образования комплекса между антигеном и антителами в крови. В случаях его обнаружения антиген p24 является высокоспецифическим индикатором инфекции.

Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?
Нет, если ВИЧ есть в организме, и если антитела смогли связать так много антигена, что АГ-линия теста его перестает видеть, то она однозначно уже выявит антитела к ВИЧ, и тест все равно будет положительный.

Какого поколения был мой тест?
Для Российской Федерации — четвертного, иных у нас не ввозится и не используется. В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».

Какой период «окна» для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?
Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов — невозможно . Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:

14 дней ();

17-18 дней (2,5 недели) ();

3-4 недели ();

Один месяц ().

Так все же, с какого срока ИФА 4 поколения совершенно надежно исключает ВИЧ?!!!
Тест 4 поколения может в отдельных случаях выявлять ВИЧ-инфекцию уже через неделю после инфицирования, но ориентироваться на это все же нельзя, потому как это скорее исключение. Как Вы видели выше — месяц вполне надежный срок для современных лабораторных тест-систем.

.
У 950 из 1000 человек ИФА тест 3 поколения или только АТ-линия теста 4 поколения выявит антитела к ВИЧ через 4 недели. Оставшиеся 49 человек выявят антитела на 5, 6, 7, 8 неделе, и совершенно точно через 12 недель. Остается вот этот 0,1%, который медицина оставит на всякий редкий и казуистический случай. Но, важно заметить, что мы только что говорили лишь о антителах, а тесты 4 поколения выявляют еще и антиген ВИЧ, известно, что АГ в промежутке с 1 по 8 неделю будет выявлен у 95% инфицированных, и в сумме АГ и АТ линия тест-системы даст лучшие параметры, чем 95% через 4 недели или 99,9% к 12 неделе. Надежнее быть не может, этого совершенно достаточно.

Если Вы считаете, что у Вас был рискованный контакт, то сделайте ИФА после 6 неделе после опасного контакта — достоверность отрицательного результата будет предельно близка к 99,9%. Многие эксперты считают срок в 6 недель для ИФА 4 поколения в условиях лаборатории совершенно достаточным для исключения ВИЧ-инфекции, но даже самые консервативные руководства не рассматривают целесообразность повторного тестирования после 12 недель. Выводы делайте сами.

На любых сроках от потенциально опасной ситуации после 6-12 недель ИФА не увеличивает и не теряет своей надежности, оставаясь точным методом диагностики и через год, и через два и далее. В очень редких случаях диагностические проблемы могут возникать у очень тяжелых, фактически терминальных пациентов, с развернутой картиной СПИДа. Подробнее можно почитать об этом , также там даны ответы на вопросы о т.н. поздней сероконверсии.

Я тестировался на разных сроках, в том числе и через 6-8 недель, и через 12 недель (3 месяца после возможного контакта) и не могу успокоиться, потому как наблюдаю различные симптомы, в некоторых результатах анализов есть отклонения и т.д. и т.п. Что делать? Что мне еще сдать?
Ничего, в данном случае вы имеете дело с неким иным заболеванием, и скорее всего с тревожным или тревожно-депрессивным расстройством, и все, что вы ощущаете, наблюдаете есть психиатрия, получите консультацию квалифицированного инфекциониста, а затем, если инфекционная или иная природа будет исключена, то обратитесь за помощью к психотерапевту или психиатру.

Что такое специфичность и чувствительность?
Специфичность диагностического теста - это доля верно определенных тестом заведомо отрицательных образцов. Иначе говоря, для определения специфичности теста необходимо взять несколько тысяч заведомо здоровых людей и проверить их при помощи теста. Если на каждые 1000 образцов будет получено 10 ложных положительных результатов - то специфичность теста составит: (1000-10)/1000*100%=99%. Если количество ложных срабатываний больше, то специфичность становится меньше (т.е. хуже). Так, специфичность теста 99% означает примерно 10 ложных позитивных результатов на 1000 проверенных здоровых людей.

Внимательно изучите инструкцию и материалы предлагаемых на рынке тестов, найдите информацию о том, каким образом была проверена специфичность. Как правило, это данные по испытаниям нескольких тысяч образцов, полученных из разных географических регионов.

Чувствительность диагностического теста - это доля верно определенных тестом заведомо положительных образцов. Иными словами, если мы возьмем 100 достоверно ВИЧ-инфицированных людей, проверим их тестом и получим 100 положительных результатов, то чувствительность теста будет равна 100%. Практически у всех тестов на рынке чувствительность 100%.

Нельзя путать понятия точности выявления положительных и отрицательных образцов. Точность выявления положительных образцов — это чувствительность теста, а точность выявления отрицательных образцов — это специфичность.

Чувствительный тест часто дает положительный результат при наличии заболевания (обнаруживает его). Однако, особенно информативен он, когда дает отрицательный результат, т.к. редко пропускает пациентов с заболеванием. Пример: ИФА .

Специфичный тест редко дает положительный результат при отсутствии заболевания. Особенно информативен при положительном результате, подтверждая (предположенный) диагноз. Пример: иммуноблот .

Логично использовать для скрининга (быстрого и дешевого тестирования большого числа пациентов) максимально чувствительный вид тестов, а вот для установления диагноза — максимально специфичные методы. Именно поэтому ИФА исторически является скрининговым, а иммуноблотом подтверждается ВИЧ-инфекция.

А может ли быть ложноположительный результат (+) на ВИЧ при некоторых заболеваниях?
При простуде, при беременности, герпесе, кандидозе, стрессах, после приема любых лекарств, в полнолуние, в день, когда видишь белого коня — не имеет никакого значения, он просто может быть. Например, тест-система Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay до 1,5% случаев (специфичность 98.78% ) даст ложноположительный результат. Есть состояния (беременность, например) или заболевания (ряд аутоиммунных заболеваний), когда вероятность ложноположительного результат возрастает.

Может ли что-то вызывать ложноотрицательный результат (-) в тесте на ВИЧ?
Ложноотрицательный результат, а точнее существенное удлинение «периода окна» теоретически может вызвать начатая очень рано после инфицирования антиретровирусная терапия, а также некоторые тяжелые заболевания иммунной системы. Алкоголь, иные психоактивные вещества, любая пища, БАДы, любые иные препараты, стресс, полнолуние, усталость, грипп, ангина и прочие заболевания — все это не оказывает влияния на риски ложноотрицательного результата теста на ВИЧ. Чувствительность тестов на ВИЧ исследована и подтверждена в реальных условиях и на больших выборках, где люди принимают алкоголь, нервничают, принимают самые разные препараты, болеют различными заболеваниями, имеют самые разные отклонения лабораторных параметров.

В чем разница между ИФА и ИХЛА? Что наиболее информативнее? Спасибо!
Иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) это два способа забить гвоздь, большим красным, или средним зеленым молотком. Результат один и тот же — АТ-АГ взаимодействие или отсутствие такового. Т.е. информация — забитый гвоздь — в итоге одна и та же. Обычно указания на ИХЛА в отношении диагностики ВИЧ носит характер артефакта, и на самом деле речь идет об ИФА. Т.е. с одной стороны — разницы нет, с другой — правильнее оперировать не названием метода, а названием тест-системы.

Выявляет ли ИФА тест 4 поколения ВИЧ-2?
Да, все современные специализированные ИФА-системы выявляют ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

А какие подтипы выявляет ИФА? Что если я заразился редким подтипом и тест его не видит?
Нет, такого не бывает. Современные скрининговые ИФА-системы выявят любой подтип из группы M и O. Представителей групп N и P зарегистрировано единичное число, их очень непросто найти даже в Камеруне, где их число чуть больше ноля, и измеряется единицами. Как только, с точки зрения эпидпроцесса, распространенность группы превысит хотя бы сотые доли процента, и будут обнаружены в за пределами африканской глуши хотя бы единичные пациенты, то и тест-системы подтянутся, вслед за нуждами. На данный момент рассматривать подобные сценарии нет смысла.

В 2006 году их было известно десять камерунцев с группой N, но спустя 5 лет, после тщательных просеиваний тысяч камерунцев нашли еще… четыре. По разным оценкам от 400 до 800 тысяч камерунцев живут с ВИЧ, и мы знаем, что возможно до 0,1% являются носителями группы N. Т.е. от 400 до 800 человек на Планете.

Я слышала, что методом ИФА ВИЧ-2 выявляется позднее, это так?
В данном случае это не имеет значения, антитела выходит на уровень достаточный для детекции примерно в одни и те же временные рамках, общие перестраховочные сроки 6-8 недель от опасного контакта «накрывают» и ситуации с ВИЧ-1 и с ВИЧ-2.

Если ИФА положительный, то это означает диагноз ВИЧ-инфекции?
Нет, требуется подтверждение другим методом. Подтверждающим методом для диагностики ВИЧ-инфекции сегодня является непрямая иммунофлюоресценция (РНИФ, иммуноблот, вестерн-блот). Иммуноблот демонстрирует высокую чувствительность (99,3-99,7%) и специфичность (99,7%), но так как метод определяет иммунглобулины класса G, то с момента инфицирования результат может быть ложноотрицательным до трех недель.

Аптечные ИФА экспресс-тесты достаточно надежны?
Экспресс-тесты на антитела к ВИЧ в США одобрены с 2002 года, в том числе ультрабыстрые тесты, чувствительность таких тестов от 93% и специфичность — от 99%. Одобренный и доступный в РФ экспресс-тест Alere Determine HIV 1/2 Ag/Ab Combo, значительно уступает по способности к обнаружению антигена р24 ВИЧ по сравнению с коммерческими лабораторными системами 4 поколения. В одном исследовании (n=26) экспресс-тест Alere Determine выявил антиген в 62% случаев, а в другом (n=67) — в 86,6% случаев, в тестовых сыворотках без антител. В двух случаях с известной датой инфицирования Alere Determine дал положительный результат только по антителам к ВИЧ на 35 день. В ситуациях, где свежих потенциально опасных контактов не было экспресс-тестам вполне можно доверять, при отрицательном результате. Следует учитывать, что экспресс-тесты значительно чаще лабораторных дают ложный положительный результат. Положительный прогностический результат для РФ у экспресс-тестов будет примерно 50 на 50, т.е. если экспресс-тест дает положительный результат, то в среднем, т.е. для групп низкого риска, вероятность в данном случае наличия ВИЧ-инфекции лишь 50%, и любой положительный результат обязательно требует перепроверки методом ИФА в условиях лаборатории.

Можно ли применять ПЦР РНК или ДНК ВИЧ для скрининга на ВИЧ?
Да, можно. Нет, не рекомендуется. Хотя за последнее десятилетие метод стал значительно дешевле и точнее, но все же он до сих пор и дорог, более длительный, и технически сложен, что предполагает большие риски ошибок. В России, так же впрочем, как и США, количественный метод ПЦР не рекомендован для скрининга и диагностики ВИЧ-инфекции в обычных случаях.

Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?
РНК обычно используется в количественных тестах дляоценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например для оценки эффективности терапии. ДНК — в мононуклеарных клетках, например для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА. И тот и другой тест могут быть и количественными и качественными. И тот и другой можно в узких случаях применить как диагностический, с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы.

Я сдавал в коммерческой лаборатории анализ ПЦР РНК (или ДНК) ВИЧ, могу ли я исключить инфицирование?
Да, скорее всего можете, но Вы делали это зря. Выше мы писали, что метод ПЦР не применяется для скрининга, а значит нужно делать ИФА.

Опции темы

Поиск по теме

Сроки тестирования на ВИЧ и гепатиты

Попробую упорядочить имеющуюся у меня информацию по срокам тестирования на вич и гепатиты.
1) ВИЧ-инфекция.
а) ИФА 4 поколения АТ/АГ (еще называется duo test, combo test).
Согласно МИРОВОЙ (.) статистике и информации из сероконверсионных панелей (панели которые используют производители тест систем, к примеру фирма Abbott) для тестов 3 и 4 поколения (в России используются только тест-системы 4 поколения) ОКОНЧАТЕЛЬНЫМ и ДОСТОВРЕНЫМ является срок 12 недель (3 месяца, 84 дня).

Многие авторитетные источники ссылаются на данный срок как на достоверный:
BASHH — Британская ассоциация сексуального здоровья и вич-инфекции http://www.bashh.org/documents/2613.pdf .
Книга Кристиана Хоффмана 2013 года
The diagnostic window
The “diagnostic gap” or “window” indicates the time period between transmission
of a pathogen and the onset of biochemical measurable infection markers such as
antibodies, antigen or nucleic acids (Busch 1997).
At the earliest, HIV antibody production begins two weeks after transmission. HIV-
HIV Testing 17
specific antibodies can be detected after four weeks in 60–65% of cases, after six weeks
in 80%, after eight weeks in 90% and after twelve weeks in 95% of cases. The p24
antigen is detectable about five days before seroconversion (the first occurrence of
specific antibodies). Therefore, 4th generation diagnostic tests can shorten the diag-
nostic gap by simultaneous detection of p24 antigen. The earliest lab marker is HIV
RNA that is detectable approximately seven days before the p24 antigen (Fiebig 2003).
In many cases HIV RNA can be detected by the second week after transmission.
However, a negative result at this time point cannot exclude an infection.
A negative result in the HIV screening test precludes the existence of HIV antibodies
and p24 antigen at the time of testing. The security of this result, however, depends
particularly on the time interval from the possible transmission event. This has
important consequences:
1. HIV testing immediately after a possible transmission is not meaningful, as no
HIV antibodies are yet formed. An HIV test should therefore be carried out at the
earliest in the 3rd week after exposure. Exception: If it needs to be documented
for legal reasons (e.g., needle stick injury) that at the time of transmission no
existing HIV infection was present.
2. An HIV infection can not be ruled out until three months after possible trans-
mission with sufficient certainty. Check-ups should be performed two and six
weeks and three months after exposure. A further test (after six months) is appro-
priate only in exceptional cases, for example, if there is suspicion of acute retro-
viral syndrome.
3. A negative test result is dependable only in the case of no re-exposure within the
past three months (from the time of the original exposure).

Мнение Джона Бартлета
«Клинические аспекты ВИЧ-инфекции» Джона Бартлетта: «У пациентов с установившейся инфекцией (>3 месяцев после инфицирования) чувствительность стандартного протокола серологического тестирования (ИФА и вестерн-блот или иммунофлюоресцентный анализ) составляет 99,5% (ДИ 98–99,9%), а специфичность - 99,994% (NEJM 2005; 352:570; JAMA 1991; 266:2861; Am J Med 2000; 109:568)

Хотя тест ИФА 4 поколения за счет наличия теста на антиген срабатывает намного раньше, чем 12 недель
. Как правило рекомендуют сдавать тест 4 поколения в 4-6 недель после возможно заражения — именно в данное время присутствует пик антигена p24 (часть вируса,антиген оболочки)
Тем не менее, рекомендуют сдавать именно через 12 недель ввиду того, что в это время гарантировано должны выработаться антитела к вич.
Британская ассоциация рекомендует сдавать так:
— высокий риск: 2-а теста, один спустя месяц (поймать антиген), если отрицательный — 2-ой тест спустя 12 недель.
— низкий риск: 1 тест спустя 12 недель от риска.
Замедление в выработке антител по мнению многих экспертов и специалистов обусловлено:
— приемом пост контактной профилактики (PEP)
— наличием генетических врожденных дефектов иммунной системы
Оба варианта не смогли бы быть незамеченными Вами.

б) ПЦР анализы.
Рекомендуют сдавать анализы ПЦР спустя 4 недели от возможного риска. Данный анализ является чисто информационным, диагноз по нему не ставят. Хотя насколько известно CDC американский центр по борьбе с заболеваниями пытается привнести метод ПЦР в проверочный алгоритм на ВИЧ инфекцию.
Метод ПЦР очень информативен и чувствителен (бывает ложноположительным).
Есть разные вариант ПЦР ДНК и ПЦР РНК, глобальной разницы между ними нет, потому что из одного делают другой все равно.

в) Домашние тесты и экспресс-тесты в лабораториях. (не путать с быстрыми тестами в лабах)
По сути аналог ИФА тестам, только разная методика. ИХА — иммунохроматический анализ. Довольно точные, но уступают лабораторному ИФА в чувствительности. Из-за неверных действий могут быть неверно истолкованы — но как правило в современных тестах уже имеются встроенные системы проверки действий (контрольная полоса итд.). Могут зафиксировать уже устоявшуюся вич инфекцию, но не ранний вариант.
Хотя вроде бы есть 1 тест Determine который и на антиген тоже реагирует.

Таким образом,опираясь на мнение экспертов, рекомендуется сдавать тест ИФА спустя 12 недель, но для успокоения можно сделать через 4 недели после возможного заражения, ИФА 4 поколения (на антиген р24) или анализ ПЦР.

Анализ на вич четвертого поколения

Какие тесты бывают на ВИЧ?
Для скрининга применяется метод ИФА. Для подтверждения диагноза применяется иммуноблот. Подробнее - ниже.

Для выявления ВИЧ в некоторых ситуациях применяется качественный (т.е. есть или нет, без ответа на вопрос «сколкьо?») ПЦР РНК или ДНК ВИЧ, данный метод является на сегодня вспомогательным и его не следует использовать для скрининга ВИЧ-инфекции. У лиц с диагностированной ВИЧ-инфекцией применяется количественный метод ПЦР на РНК ВИЧ, он позволяет ответить на вопрос сколько вируса в крови. Его так же не следует применять для диагностики.

Что такое тесты 4 поколения? Чем отличается разные поколения ИФА?
Тесты 4 поколения детектируют ВИЧ-инфекцию раньше, так как «видят» не только антитела, как тесты 3 и более ранних поколений, но и антиген ВИЧ. Антитела вырабатываются органищзмом в ответ на ВИЧ-инфекцию, и на выработку нужно некоторое время. Антиген ВИЧ p24, это белок вирусного капсида (core компонент), суть - непосредственно кусочек вируса, понятно, что он начинает определяться в крови ранее, чем антитела - белки иммунной системы человека, которые вырабатываются в ответ на ВИЧ-инфекцию. Т.е. «период окна» для теста 4 поколения совсем небольшой. Когда начинают обнаруживаться в большом антитела против ВИЧ, антиген p24 часто уже не выявляется, вероятнее всего в результате образования комплекса между антигеном и антителами в крови. В случаях его обнаружения антиген p24 является высокоспецифическим индикатором инфекции.

Время возникновения надежной положительной реакции для ИФА тест-систем первого (1), второго (2), третьего (3) и четвертого (4) поколений, методов ПЦР-диагностики (N). АГ - антиген ВИЧ p24, АТ - антитела к ВИЧ, E -эклипс-фаза, ранняя стадия внутриклеточной репликации вируса.
По Cornett JK, Kirn TJ, Clin Infect Dis. 2013 May 10. Адаптация: arvt.ru.

Какого поколения был мой тест?
Для Российской Федерации - четвертного, иных у нас не ввозится и не используется. В названии теста обычно присутствует что-либо из: «Combo», «At/Ag», «АТ/АГ» или «p24».

В чем разница между ИФА и ИХЛА? Что наиболее информативнее? Спасибо!
Иммуноферментный анализ (ИФА) и иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА) это два способа забить гвоздь, большим красным, или средним зеленым молотком. Результат один и тот же - АТ-АГ взаимодействие или отсутствие такового. Т.е. информация - забитый гвоздь - в итоге одна и та же. Обычно указания на ИХЛА в отношении диагностики ВИЧ носит характер артефакта, и на самом деле речь идет об ИФА. Т.е. с одной стороны - разницы нет, с другой - правильнее оперировать не названием метода, а названием тест-системы.

Какой период «окна» для тестов 4 поколения (Ag/At Combo)?
Тест-системы 4 поколения способны обнаружить не только антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на инфекцию, но и непосредственно ВИЧ, посредством выявления вирусного белка p24. Белок p24 может быть определен очень рано, но его уровень в крови в период после инфицирования постепенно снижается, но одновременно с этим снижением нарастает уровень антител. Все люди разные, потому назвать точный 100% минимальный срок, когда сомневаться в тесте уже нет поводов - невозможно . Однако, на сегодня есть достаточное количество исследований, которые дают нам весьма определенные ориентиры, приведем лишь несколько из них:

14 дней;
17-18 дней (2,5 недели) ;
3-4 недели;
Один месяц

Может быть так, что антиген уже связан антителами, а антител еще мало для теста?
Этот феномен описан, но это весьма короткоживущий феномен, по сути это точка пересечения двух условных кривых, никто вам не скажет, это часы или десятки минут, но точно не многие дни, скорее следует предполагать как максимум (предположение, для утверждения не достаточно данных) 1-2 суток. И в любом случае этот феномен, если и возникает, то находится там, где мы вообще из осторожности не говорим о полной достоверности тестирования, т.е. внутри первых 4-6 недель, и с очень высокой долей вероятности этот период внутри еще более короткого промежутка - в пределах первых двух недель, т.е. мы как бы укладываем оба окна одно в другое. Плюс, по всей видимости, есть некоторые условия, которые хоть сколько то значимыми делают вероятность «подловить» это самое второе окно - исходные иммунодефицитные состояния, например, связанные с возрастом.

Если бы доминирующие ИФА системы отдельно показывали срабатывание At или Ag линии, то мы бы знали (т.е. мы и так это знаем, но вот имели бы статистику по этому поводу), что за редким исключением выявление ВИЧ происходит по At линии, а если бы мы неким волшебным образом знали дату инфицирования, то мы бы знали, что за редким исключением мы выявляем довольно поздно, спустя многие месяцы и годы. В отдельных группах риска под влияем активных действий ситуация может чуть смещаться в сторону более раннего выявления, но это все не меняет погоды по большому счету. Т.е. реальных практических рисков феномен второго окна не несет - любой врач будет рекомендовать и принимать во внимание тестирование на тех сроках, когда с очень высокой вероятностью будет антитела в достаточных для детекции количествах.

Так все же, с какого срока ИФА 4 поколения совершенно надежно исключает ВИЧ. 111
Тест 4 поколения может в отдельных случаях выявлять ВИЧ-инфекцию уже через неделю после инфицирования, но ориентироваться на это все же нельзя, потому как это скорее исключение. Как Вы видели выше - месяц вполне надежный срок для современных лабораторных тест-систем.

У 950 из 1000 человек ИФА тест 3 поколения или только АТ-линия теста 4 поколения выявит антитела к ВИЧ через 4 недели. Оставшиеся 49 человек выявят антитела на 5, 6, 7, 8 неделе, и совершенно точно через 12 недель. Остается вот этот 0,1%, который медицина оставит на всякий редкий и казуистический случай. Но, важно заметить, что мы только что говорили лишь о антителах, а тесты 4 поколения выявляют еще и антиген ВИЧ, известно, что АГ в промежутке с 1 по 8 неделю будет выявлен у 95% инфицированных, и в сумме АГ и АТ линия тест-системы даст лучшие параметры, чем 95% через 4 недели или 99,9% к 12 неделе. Надежнее быть не может, этого совершенно достаточно.

Если Вы считаете, что у Вас был рискованный контакт, то сделайте ИФА после 6 неделе после опасного контакта - достоверность отрицательного результата будет предельно близка к 99,9%. Многие эксперты считают срок в 6 недель для ИФА 4 поколения в условиях лаборатории совершенно достаточным для исключения ВИЧ-инфекции, но даже самые консервативные руководства не рассматривают целесообразность повторного тестирования после 12 недель. Выводы делайте сами.

Мы не отвечаем на вопросы типа: «можно ли мне доверять ИФА, который я сделал(ла) через X дней (недель, месяцев)». Ответ на этот вопрос Вы видите выше.

Что такое специфичность и чувствительность?
Специфичность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо отрицательных образцов.
Иначе говоря, для определения специфичности теста необходимо взять несколько тысяч заведомо здоровых людей и проверить их при помощи теста. Если на каждые 1000 образцов будет получено 10 ложных положительных результатов – то специфичность теста составит: (1000-10)/1000*100%=99%. Если количество ложных срабатываний больше, то специфичность становится меньше (т.е. хуже). Так, специфичность теста 99% означает примерно 10 ложных позитивных результатов на 1000 проверенных здоровых людей.

Чувствительность диагностического теста – это доля верно определенных тестом заведомо положительных образцов.
Иными словами, если мы возьмем 100 достоверно ВИЧ-инфицированных людей, проверим их тестом и получим 100 положительных результатов, то чувствительность теста будет равна 100%. Практически у всех тестов на рынке чувствительность 100%.

Нельзя путать понятия точности выявления положительных и отрицательных образцов. Точность выявления положительных образцов - это чувствительность теста, а точность выявления отрицательных образцов - это специфичность.

Логично использовать для скрининга (быстрого и дешевого тестирования большого числа пациентов) максимально чувствительный вид тестов, а вот для установления диагноза - максимально специфичные методы. Именно поэтому ИФА исторически является скрининговым, а иммуноблотом подтверждается ВИЧ-инфекция.

Важно понимать, что ложные положительные результаты существуют у всех тестов, никакой тест не может давать 100% специфичности! Результаты экспресс-тестов подлежат особой проверке и перепроверке в лабораторных условиях при помощи других методов. Результаты лабораторных ИФА тестов подлежат перепроверке методом иммуноблотинга.

Может ли что-то вызывать ложноотрицательный результат (-) в тесте на ВИЧ?
Ложноотрицательный результат, а точнее существенное удлинение «периода окна» теоретически может вызвать начатая очень рано после инфицирования антиретровирусная терапия, а также некоторые тяжелые заболевания иммунной системы. Алкоголь, иные психоактивные вещества, любая пища, БАДы, иммуностимуляторы, иммуномодуляторы, антибиотики и любые иные препараты, стресс, полнолуние, созерцание белого коня, усталость, общая болезненность и ослабленный иммунитет, грипп, ангина и прочие заболевания - все это не оказывает значимого влияния на риски ложноотрицательного результата теста на ВИЧ. Чувствительность тестов на ВИЧ исследована и подтверждена в реальных условиях и на больших выборках, где люди принимают алкоголь, нервничают, принимают самые разные препараты, болеют различными заболеваниями, имеют самые разные отклонения лабораторных параметров.

А может ли быть ложноположительный результат (+) на ВИЧ при некоторых заболеваниях?
Да, такая вероятность всегда существует, например, тест-система Abbott ARCHITECT HIV Ag/Ab Combo Assay до 1,5% случаев (специфичность 98.78% ) даст ложноположительный результат. Есть состояния (беременность, например) или заболевания (ряд аутоиммунных заболеваний, заболевания печени и другие), когда вероятность ложноположительного результат возрастает, также такие риски несколько увеличивает недавние вакцинирование некоторыми иммунопрепаратами.

В 2006 году их было известно десять камерунцев с группой N, но спустя 5 лет, после тщательных просеиваний тысяч камерунцев нашли еще… четыре.
По разным оценкам от 400 до 800 тысяч камерунцев живут с ВИЧ, и мы знаем, что возможно до 0,1% являются носителями группы N. Т.е. от 400 до 800 человек на Планете.

Аптечные ИФА экспресс-тесты достаточно надежны?
Экспресс-тесты на антитела к ВИЧ в США одобрены с 2002 года, в том числе ультрабыстрые тесты, чувствительность таких тестов от 93% и специфичность - от 99%. Одобренный и доступный в РФ экспресс-тест Alere Determine HIV 1/2 Ag/Ab Combo, значительно уступает по способности к обнаружению антигена р24 ВИЧ по сравнению с коммерческими лабораторными системами 4 поколения. В одном исследовании (n=26) экспресс-тест Alere Determine выявил антиген в 62% случаев, а в другом (n=67) - в 86,6% случаев, в тестовых сыворотках без антител. В двух случаях с известной датой инфицирования Alere Determine дал положительный результат только по антителам к ВИЧ на 35 день. В ситуациях, где свежих потенциально опасных контактов не было экспресс-тестам вполне можно доверять, при отрицательном результате. Следует учитывать, что экспресс-тесты значительно чаще лабораторных дают ложный положительный результат. Положительный прогностический результат для РФ у экспресс-тестов будет примерно 50 на 50, т.е. если экспресс-тест дает положительный результат, то в среднем, т.е. для групп низкого риска, вероятность в данном случае наличия ВИЧ-инфекции лишь 50%, и любой положительный результат обязательно требует перепроверки методом ИФА в условиях лаборатории.

Чем отличается ПЦР ДНК от ПЦР РНК ВИЧ?
РНК обычно используется в количественных тестах дляоценки вирусной нагрузки у диагностированных лиц, например для оценки эффективности терапии. ДНК - в мононуклеарных клетках, например для диагностики у детей, там, где антитела к ВИЧ матерей мешает использовать метод ИФА. И тот и другой тест могут быть и количественными и качественными. И тот и другой можно в узких случаях применить как диагностический, с учетом конкретных ограничений, которые накладывают технические параметры системы.

www.teensplus.ru

Тест-системы четвёртого поколения для одновременного выявления антигенов ВИЧ и антител к ВИЧ

У большинства больных антитела к ВИЧ выявляются через 6–12 недель после заражения с использованием тест-систем первых поколений и через 3–4 недели с использованием тест-систем третьего поколения, работающих по принципу сэндвич-ИФА с двумя антигенами. Однако ВИЧ-инфекция выявляется уже спустя 2 недели после заражения путем анализа на антиген p24 и уже через 1 неделю — путем анализа на вирусную РНК. Другими словами, период окна можно сократить до 2 недель и более с помощью комплексного диагностического подхода. Капсидный антиген p24 появляется в крови при бурной репликации вируса в острой лихорадочной фазе ВИЧ-инфекции и в этот период легко обнаруживается с помощью простого и сравнительно дешевого ИФА.

Если стоит задача выявить всех ВИЧ-инфицированных, в том числе лиц с ранними стадиями инфекции, то необходимо использовать весь арсенал анализов: на антитела, на антигены и на РНК. Однако тестирование на вирусную РНК дорого стоит, требует больших трудозатрат и недоступно для большинства лабораторий. И все же те лаборатории, в которых есть оборудование для ИФА, способны выявлять большинство случаев ВИЧ-инфекции при условии тестирования проб как на антитела к ВИЧ, так и на антиген p24.

В конце 1990-х гг. появились тест-системы для параллельного ИФА на антитела к ВИЧ и антиген p24, снявшие необходимость проведения раздельных анализов. Разработано и внедряется новое поколение комбинированных тест-систем для одновременного выявления антител к ВИЧ и антигенов ВИЧ.

Преимущество комбинированных анализов заключается в том, что они занимают меньше времени, требуют меньших трудозатрат и экономически более выгодны, чем раздельные анализы. Комбинированные тест-системы обладают высокой аналитической чувствительностью как за счет применения сэндвич-ИФА с двумя антигенами для выявления антител к ВИЧ, так и за счет одновременного выявления антигена p24.

В настоящее время на рынке имеется 8 комбинированных тест-систем четвертого поколения, прошедших клинические испытания: VIDAS HIV DUO Ultra (bioMérieux; Марси-л’Этуаль, Франция); Enzymun-Test-HIV-Combi (Boehringer; Мангейм, Германия); Vironostika HIV Uni-Form II Ag/AB (Organon Teknika; Бокстел, Нидерланды); AxSYM-HIV Ag/AB (Abbott Laboratories; Эбботт-Парк, Иллинойс, США); Enzygnost HIV Integral (Dade Behring; Марбург, Германия); Genescreen Plus HIV Ag-AB (Bio-Rad), and COBAS Core HIV Combi (Roche Diagnostics; Мангейм, Германия); Elecsys-HIV Combi (Boehringer; Мангейм, Германия). В последней тест-системе применен электрохемилюминесцентный сэндвич-метод с двумя антигенами; анализ занимает 18 минут; специфичность по данным испытаний на госпитализированных больных составляет 99,8%. Эта тест-система позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию на 5 дней раньше, чем самые чувствительные тест-системы на антитела к ВИЧ. Существует еще одна комбинированная тест-система без торговой марки для ИФА на антитела и антиген p24 с чувствительностью всего 99,5% и специфичностью 94,8%.

Комбинированный анализ на антитела и антиген для выявления недавней и длительно существующей ВИЧ-инфекции оправдан не только при тестировании доноров крови, но и во многих клинических ситуациях. Ранний диагноз ВИЧ-инфекции путем выявления антигена p24 позволяет безотлагательно начать лечение, провести консультирование больного и принять меры для снижения риска передачи инфекции. Благодаря способности выявлять антиген p24 тест-системы четвертого поколения позволяют диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях. Эти тест-системы весьма полезны для диагностики недавней и длительно существующей ВИЧ-инфекции в больничных и независимых клинических лабораториях и диагностических центрах (как бюджетных, так и коммерческих). В подобные учреждения нередко обращаются пациенты, риск ВИЧ-инфекции у которых значительно выше, чем у доноров крови. Для раннего выявления ВИЧ-инфекции у таких пациентов требуются тест-системы с высокой аналитической чувствительностью.

Важно отметить, что высокая аналитическая и эпидемиологическая чувствительность большинства тест-систем четвертого поколения, доказанная в испытаниях на больных из разных популяций, больных с сероконверсией и больных с разными подтипами ВИЧ, делает эти тест-системы незаменимыми для диагноза как недавней, так и длительно существующей ВИЧ-инфекции в самых разных ситуациях. Так, например, в клинических лабораториях бюджетных учреждений здравоохранения тестирование крови на антигены ВИЧ обычно не проводится (это прерогатива станций переливания крови), и поэтому при стандартном тестировании на антитела к ВИЧ случаи недавней инфекции могут быть пропущены. Было показано, что выявление инфекции на ранних стадиях дает основание вовремя начать антиретровирусную терапию, что повышает ее эффективность. Кроме того, появляется возможность своевременно проконсультировать пациента, правильно организовать его ведение и предотвратить передачу ВИЧ-инфекции.

Экспресс-тесты: Это класс тест-систем, дающих результат быстрее, чем через 30 минут. Экспресс-тесты для выявления специфических антител к ВИЧ появились в конце 1980-х гг., а в начале 1990-х гг. приобрели популярность. Благодаря усовершенствованию технологии производства экспресс-тесты стали не менее точными, чем ИФА (при условии, что анализ проводится аккуратно, квалифицированным сотрудником). Однако из-за мнимой простоты экспресс-тестов персонал часто допускает ошибки. Например, при внесении реагентов пипетки не всегда держат вертикально (как указано в инструкции), что нарушает соотношение объемов реагентов. Еще один источник ошибок — стремление многих лаборантов одновременно провести анализ нескольких проб. Из-за этого не выдерживается время этапов анализа.

При правильном выполнении экспресс-тесты на антитела к ВИЧ дают надежные результаты и могут использоваться в самых разных медицинских учреждениях и клинических ситуациях. В частности, их применяют в приемных отделениях, кабинетах врачей, амбулаториях, патологоанатомических отделениях, моргах, пунктах переливания крови, а также везде, где требуется срочное тестирование на ВИЧ (например, после контакта медицинского работника с возможным источником инфекции).

Экспресс-тесты на ВИЧ незаменимы для тестирования рожениц, за которыми не проводилось дородовое наблюдение (т. е. рожениц с невыясненным ВИЧ-статусом). Показано, что антиретровирусная терапия (в частности, зидовудином) эффективно снижает риск вертикальной передачи ВИЧ и что такое лечение в максимально ранние сроки необходимо матери, а затем и новорожденному. Экспресс-тестирование беременной на ВИЧ в предродовом периоде позволяет в случае выявления антител начать лечение до родов.

Тест 4 поколения на ВИЧ - каковы сроки и другие особенности проведения

Современной проблемой человечества можно назвать заболевание, которое поражает иммунную систему – ВИЧ-инфекцию. Она поражает иммунную систему, что определяет полную ее дисфункцию. Применяемые методы лечения не позволяют убить вирус, направлены только на снижение степени проявления симптоматики. Достаточно важно вовремя обнаружить проблему и вовремя начать лечение, так как вирус развивается постепенно и становится причиной развития других тяжелых заболеваний. Несмотря на то, что проблема известна на протяжении последних нескольких десятилетий, по-настоящему эффективного метода обнаружения вируса нет. На сегодняшний день чаще всего применяют тест 4-го поколения, который позволяет определить антитела к рассматриваемому вирусу. Отметим, что 4-ое поколение представлено несколькими типами тестов, каждый эффективен при определенных обстоятельствах. Рассмотрим подробнее тесты на ВИЧ-инфекцию 4 поколения: особенности проведения, сроки и результаты.

Почему важно вовремя провести тест

Сразу после заражения человек становится разносчиком опасной инфекции. Следует учитывать, что вирус передается через кровь, половым путем. Вовремя узнав о своем недуге человек может обезопасить окружающих, так как рассматриваемое заболевание не излечивается, сулит существенным ухудшением качества жизни, смертью от заболеваний, развивающихся на фоне иммунодефицита.
Чем раньше начать лечение, тем больше вероятность того, что оно будет эффективным. ВИЧ-инфекция развивается в организме постепенно, четко выделяют несколько стадий, каждой характерны определенные симптомы.

Конечно, даже при ранней постановке диагноза также невозможно излечить рассматриваемое заболевание, но все же если начать лечение сразу после инфицирования, можно снизить вероятность перехода инфекции с одной стадии к другой за короткий срок. Тест 4 поколения на ВИЧ имеет сроки достаточно сжатые, что позволяет в кратчайшие сроки поставить диагноз и начать лечение в случае получения положительного результата.

Какие есть поколения тестов на ВИЧ-инфекции?

За долгие годы было создано несколько разновидностей тестов, с каждым годом их точность повышалась, существенно снижалось время, необходимое для получения результата. Рассмотрим следующее тестирование крови:

Методы 1-го и 2-го поколения нельзя назвать эффективными, так как обладают ограниченными способностями. Следует уделить внимание тому, что тесты первых поколений могут проводится только для определения наличия антител к ВИЧ. Также подобное исследование, которое называемое ИФА, может использоваться только для определения самого вируса, который становится причиной развития СПИДа.
Второе поколение несколько отличается от первого. Отличие заключается в том, что второй метод позволяет фиксировать антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2.
Третий тип исследования проводится в последнее время чаще, чем первых два. Это связано с тем, что тест третьего поколения позволяет выявить Ig6 и IgM антитела. При этом точность довольно велика, вероятность допущения ошибки существенно снижается.
Современным методом определения вируса можно назвать тест на ВИЧ 4 поколения. Исследования последнего поколения проводятся по той причине, что есть возможность выявить антиген р24. Отметим, что система ИФА предусматривает использование вируса, который обработан ультразвуком.

Вышеприведенные моменты следует учитывать при рассмотрении того, какие тесты проводятся сегодня для выявления вируса в организме. При рассмотрении того, какова точность каждого теста отметим, что последний тип наиболее точный и быстрый, проводится в последнее время во всех клиниках, которые специализируются на диагностировании ВИЧ-инфекции.

Точность и чувствительность 4-го поколения

Достаточно важным моментом можно назвать то, насколько точный результат проводимого исследования. Многие утверждают, что для получения точного результата рекомендуется проводить именно тест 4-го поколения. Он позволяет определить антитела и антигены вируса, что и позволяет поставить более точный результат.

К особенностям проведения теста данного типа можно отнести нижеприведенные моменты:

Несмотря на высокую точность теста 4-го поколения, получить результат для постановки диагноза можно только после прохождения 60-ти дней после заражения. Этот срок выбран с учетом того, что в течение месяца можно получить ложноотрицательный результат: каждый организм обладает своими особенностями, вирус проявляется в зависимости от того, в каком состоянии находится иммунная система, если ли другие скрытые инфекции или хронические заболевания.
Выявить антитела можно только после того, как определяются РНК в крови инфицированного, для чего используется метод ПЦР. Следует учитывать тот момент, что РНК даже самым современным методом можно выявить только через 30 дней после инфицирования. За меньший срок выявить проблему нельзя.
Следует учитывать, что точность исследования зависит от того, каково количество отрицательных результатов, полученных во время проведения теста.
Проведенные исследования указывают на то, что у 100 людей, которые инфицированы рассматриваемым вирусом, чувствительность составляет 100%.

Однако следует учитывать, что точный тест может использоваться только для постановки положительного или отрицательного результата. Другие методы позволяют получить большее количество информации для того, чтобы сформировать более эффективное лечение. Однако отметим, что точность, которой обладает 4-ое поколение тестов, не позволяет все же получить 100% результат.

Каковы отличия 3 и 4 поколения тестов?

Как ранее было отмечено, довольно часто проводятся тесты 4-го поколения, которые позволяют получить положительный или отрицательный результат. Именно поэтому рассмотрим то, есть ли отличия между 3 и 4 поколением тестов. Сразу отметим, что поколения есть, и они довольно существенны.

К основным отличиям можно отнести нижеприведенные моменты:

Как правило, 3-е поколение исследований позволяет определить антитела против рассматриваемого вируса. Именно антитела достаточно часто используются при проведении большинства тестов – их концентрация указывает на наличие проблемы. Но только количество антител не указывает на род проблемы и степень ее проявления.
Следует уделить внимание тому, что 3-е поколение не позволяет поставить диагноз на ранней стадии развития заболевания. Поэтому для того чтобы поставить диагноз как можно раньше, что позволит снизить вероятность заражения половых партнеров, следует проводить именно 4-е поколение тестов. Следует учитывать, что четвертый тип теста даже при раннем проведении позволяет дать наиболее точный результат.
Довольно часто ПЦР и исследование 4-го поколения связывают, так как их результат схож по показателю точности при проведении исследований на ранней стадии.
Следует учитывать, что на законодательном уровне разрешено применение 4-го поколения. Достаточно часто этот тест называют АГАТ.
Есть определенный метод определения эффективности теста 3-го и 4-го поколения. При проведении теста последнего типа можно получить результат, который указывает на количество РНК ВИЧ-инфекции.

Во многих медицинских центрах, которые проводят исследования крови на определение ВИЧ-инфекции, проводят именно тест 4-го поколения. Система предусматривает использование сложного программного обеспечения, в одной группе может обрабатывать около 250 образцов, что существенно снижает стоимость теста.

Каковы можно получить результаты при проведении теста?

Современные методы исследования позволяют определить практически точную дату того, когда произошло заражение. Однако следует учитывать тот момент, что подобное исследование возможно только через многие месяцы и даже годы после заражения.

Достаточно часто при проведении подобного исследования главным результатом считают получение положительного или отрицательного результата. Только после положительного проводят иные исследования, которые позволяют получить более подробную информацию об инфицировании.

Точность современных методов проведения тестов зависит от того, на каком сроке после инфицирования были взяты образцы. Как показывают проводимые исследования, антитела вырабатываются на 3-4 неделе от момента инфицирования. При этом тест 4-го поколения может выявить единичные антитела уже на 7 день, но об высокой точности в этом случае нельзя говорить. Официально специалисты установили срок 6-12 недель, в который происходит образование антител и вирус начинает себя проявлять.

Также проведенные исследования указывают на то, что наиболее высока вероятность заражения в период между 3-6 недели после заражения. Но это не значит, что заражение не произойдет в другое время.

Определение типа инфекции

Следует учитывать тот момент, что рассматриваемый тип теста позволяет определить редкие подтипы вируса ВИЧ-инфекции.

Мало кто даже из инфицированных знает о том, что есть несколько подвидов возбудителя. При проведении теста 4-го поколения можно выявить подтипы вируса группы О и М. Довольно редко встречается вирус подгруппы P и N, но они также могут быть выявлены методом ИФА.

Современные методы исследования позволяют различить ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Проводимые исследования указывают на нижеприведенные моменты:

Как правило, группа N встречается в 9 экземплярах из одной группы.
Группа P встречается в единичном экземпляре из одной группы.

Довольно важным моментом можно назвать то, что ВИЧ-2 выявляется гораздо позже. Это связано с особенностями развития вируса в организме. Группа возбудителя определяет лишь особенности выявления вируса.

Четвертое поколение теста можно охарактеризовать тем, что он проводится для определения антигена. Другие методы проведения исследований не выявляют его, что можно назвать достаточно важным моментом. Антиген ВИЧ р24 можно выявить намного раньше, чем другие антитела. При этом антиген р24 через длительное время усиливается выработкой антител.

Тест 4-го поколения многие еще называют «антиген-антитело». Как ранее было отмечено, обнаружить возбудитель можно только через 7 дней после заражения, но общие ориентиры составляют примерно 14 дней или 1 месяц.

Схема проведения теста

Разобравшись с особенностями теста, обратим внимание на то, как сам проводится тест. Схема проведения теста следующая:

В качестве образца берется незначительное количество крови из локтевой вены. Отметим, что ранее на этом этапе достаточно часто допускались ошибки: должны использоваться только стерильные емкости и инструменты во время сбора образца, в дальнейшем кровь должна находится в изолированной емкости для исключения вероятности изменения ее состава и оказания влияния окружающей среды.
Всем людям рекомендуют обращаться в медицинский центр за проведением теста только после 14 дней после инфицирования. Если тест будет проводится ранее, весьма велика вероятность получения ложноположительного результата.
Рекомендуется соблюдать рекомендации по подготовке к тесту. Некоторые продукты питания могут изменять состав крови и влиять на результаты проводимых исследований. Многие врачи говорят о том, что перед сбором крови не следует принимать лекарства, так как они становятся причиной изменения результата. Анализы рекомендуется сдавать только утром, в послеобеденные часы не рекомендуется проводить тест, так как употребляемая пища, напитки могут стать причиной искажения результатов. Через несколько часов можно узнать о том, когда будут получены результаты.
Следует учитывать тот момент, что изначально проводится только ИФА. При получении положительного результата следует также провести тест на ПЦР и ВИЧ-инфекцию. Повторные исследования проводятся по той причине, что вероятность получения ложного результата при выполнении теста 4-го поколения составляет 1%.
При получении положительного результата назначается определенное лечение и исследование, которое позволяет определить скрытые инфекции и хронические заболевания. Однако окончательный результат можно получить только через полгода. В этот период можно провести полное обследование для того, чтобы диагностировать развитие проблемы.
В том случае, если проводимое исследование через полгода также вызывает сомнение, проводят дополнительный тест примерно через 1-2 недели.
В некоторых случаях врач решает, что был получен ложноположительный результат. Но чаще всего ставится ложноотрицательный результат. Получение ложноотрицательного результата связано с тем, что тесты проводятся в ранние сроки. Если тест был выполнен в срок менее 90 дней после предполагаемого момента заражения, то назначается дополнительное исследование.
Тип проводимого исследования может выбирать больной. При этом тестирование проводится бесплатно и анонимно во многих медицинских центрах.

При рассмотрении особенностей проведения исследований отметим тот момент, что принудительный забор крови неприемлем во всех странах. Однако некоторые профессии предусматривают проведение исследования крови для постановки диагноза. Примером можно назвать то, что сотрудники медицинских учреждений должны проводить периодическую проверку крови для исключения вероятности заражения пациентов при определенных обстоятельствах.

Проведение обязательного тестирования

Документы, которые имеют международное значение, содержат информацию о том, что не разрешается принуждать сдачу крови на определение ВИЧ-инфекции. Однако есть некоторые случаи, которые требуют обязательной сдачи анализов. В обязательном порядке следует проводить сдачу анализов на выявление ВИЧ-инфекции в случае донорства органов, биологических жидкостей.

Еще всего несколько лет назад распространенным путем передачи возбудителя было именно донорство. При этом инфекция определяется достаточно редко сразу после проведения курса. При донорстве:

Проводятся исследования, которые позволяют определить ВИЧ-1 и ВИЧ-2, а также частицы ДНК рассматриваемого вируса. Отметим, что в данном случае обязательно проводится комбо проверка, которая снижает вероятность допущения ошибки.
После прохождения указанного периода проводится повторный сбор крови и ее проверка. Только после этого можно стать донором.
Далее выдерживается карантин на протяжении 6-ти месяцев. Отметим, что в этом срок у всех инфицированных, в независимости от состояния иммунной системы и наличия хронических заболеваний, происходит проявление ДНК и антител вируса.
Даже в том случае, если был получен положительный результат, снова проводится двоичная проверка венозной крови. Если был получен и повторный положительный результат, то снова начинают проверку анализов в референс-лаборатории. В случае, если снова был получен положительный результат, то исследования больше не проводятся, так как сомнений в результате не будет.

Кроме вышеприведенных моментом также отметим то, что тесты проводятся анонимно в независимости от гражданства и других моментов. Также установленные правила определяют то, что все люди, которые отбывают наказание в тюрьме, проходят проверку в обязательном порядке. Пожалуй, этот случай практически единственный, в котором принуждают к исследованию крови на определение ВИЧ-инфекции.

Стадии развития заболевания и особенности проявления симптомов

Лечение и исследование крови зависит от того, в какой стадии находится заболевание. ВИЧ-инфекция становится причиной, по которой развивается СПИД – полное поражение иммунной системы.

Можно выделить нижеприведенные этапы развития ВИЧ-инфекции:

Первичный этап заражения имеет определенного рода симптоматику: несущественное повышение температуры тела, озноб, увеличение лимфатических узлов и многие другие симптомы. Симптомы могут проявляться в разной степени, в некоторых случаях, они полностью отсутствуют. Поэтому достаточно часто люди не уделяют внимание проявлению симптоматики. Как правило, при проявлении симптомов можно делать тест 4-го поколения, который будет иметь достаточно высокую точность.
Второй этап развития вируса не имеет яркой симптоматики. При должном лечении он может продлится несколько лет и даже десятилетий. На данном этапе результат проводимого исследований практически 100% верен. На втором этапе иммунная система не теряет свои функции, а значит организм может бороться с инфекциями и бактериями.
Третий этап называют СПИДом. Его можно охарактеризовать тем, что наступает иммунодефицит, а значит организм не имеет защиты против других инфекций и бактерий. При этом даже самая обычная инфекция становится причиной, по которой развивается заболевание в самой сложной форме. Как правило, до наступления третьей стадии развития заболевания уже ставится диагноз. До этой стадии проходит несколько лет и даже десятилетий. Чаще всего диагноз ставится случайно при проведении биохимического анализа крови. В крови при активном поведении вируса выделяются определенные элементы, указывающие на проблему. Примером можно назвать увеличение эритроцитов.

Если провести лечение на первом этапе, то можно увеличить качество жизни и ее длительность. Именно поэтому достаточно важно выявить вирус на самом раннем этапе, когда поражение иммунной системы еще не проходит. Тест 4-го поколения позволяет исключить вероятность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата на раннем этапе диагностирования.

В заключение отметим, что инфицирование рассматриваемым возбудителем нельзя назвать приговором. Современные методы лечения позволяют существенно продлить жизнь и повысить ее комфорт. Важно поставить диагноз на самом раннем этапе развития, так как лечение представлено купированием возбудителя. Если провести купирование на начальном этапе развития вируса, то поражение иммунной системы будет несущественным.

Примерно половина всех вопросов, которые возникают на тему ВИЧ, связаны с тестами на ВИЧ и их достоверностью. Сейчас повсеместно в качестве первичного (скринингового) теста на ВИЧ используется тест ИФА (иммуноферментный анализ). Его особенность в том, что он определяет не наличие самого вируса в организме, а наличие антител к нему (что, однако, является полным доказательством того что и сам вирус присутствует, даже если сам вирус из-за низкой вирусной нагрузки не определяется методом ПЦР). Но основная проблема в том, что антитела к ВИЧ появляются не сразу после инфицирования, а с некоторой задержкой. Поэтому возможна ситуация когда инфицирование уже произошло (и возможна передача ВИЧ другим сексуальным партнерам), а тест на ВИЧ еще ничего не показывает. Этот период называется периодом сероконверсии, серонегативным окном или просто - периодом окна. И естественно, что основной вопрос на эту тему - сколько же длиться этот период окна или, другими словами, через какой срок после возможного риска инфицирования, негативный результат теста ИФА можно считать полностью достоверным.

И ответ на этот вопрос действительно очень важен для тех, у кого был риск инфицирования, потому что именно от этого срока зависит, сколько им придется томиться в волнительном ожидании до того момента, когда можно будет сделать тест.

Надо понимать, что если инфицирование произошло, то тест ИФА покажет его, скорее всего, намного раньше срока серонегативного окна, но если инфицирования нет, то полностью уверенным в этом можно быть только в результате негативного теста после окончания периода окна.

Если поискать эту информации в Сети, то можно найти очень разные и противоречивые данные. Упоминается период окна от 2-х месяцев до полугода, года и, иногда, даже больше. И тут дело в том, что тесты ИФА используются довольно давно, и с тех пор сменилось несколько их поколений. Первые тесты были довольно малочувствительны, и для их «срабатывания» нужна была повышенная концентрация антител. Именно отсюда долгое время в качестве серонегативного окна фигурировал срок в 6 месяцев.

В настоящее время почти везде распространены тесты ИФА 4-го поколения, или так называемые комбо-тесты. В них кроме наличия непосредственно самих антител определяется еще наличие специфичного антигена p24, который, в случае инфицирования, появляется на несколько недель раньше антител. Это позволяет утверждать что, что период серонегативного окна для современных ИФА тестов не превышает 3-х месяцев . Другими словами отрицательный тест, сделанный через 3 месяца после риска инфицирования, будет полностью достоверным. Хотя, по существующей статистике в течении первых 22 дней после заражения ИФА уже положителен в 50% всех случаев, а в течении первых 6 недель после заражения ИФА положителен уже в 95%. (Источник Current Medical Diagnosis and Treatment 2008, page 1162).

Поэтому оптимальная схема сдачи теста на ВИЧ такова: через 6 недель после риска (достоверность отрицательного теста 95%) и еще раз, для гарантии, через 3 месяца после риска (достоверность практически 100%).

Есть информация о том, что после периода острой стадии ВИЧ антиген p24 может исчезнуть. Но нужно понимать, что если это происходит, то к этому моменту уже выработаны антитела к ВИЧ и поэтому тест ИФА в любом случае будет положительным и достоверным.

Почему же в Сети, на телефонах доверия и других источниках до сих пор так часто фигурирует срок в 6 месяцев? Одна из причин - просто устаревшие данные, которые касались тестов ИФА более ранних поколений. Еще дело, возможно, в том, что, насколько я знаю, срок в 6 месяцев до сих пор присутствует в официальных рекомендациях для врачей. И поэтому при официальной консультации, чаще всего для перестраховки и для формального соблюдения этих рекомендаций, говорят о 6-месячном периоде окна, заставляя людей ждать и мучаться пол года, вместо 3-х месяцев.

Увеличение периода сероконверсии возможно лишь в некоторых исключительных и поэтому очень редких случаях: если человек принимает постконтактную профилактику от ВИЧ либо иммуноподавляющие препараты - иммунодепрессанты (никакие другие препараты повлиять на период сероконверсии не могут), либо в случае тяжелых заболеваний иммунной системы (никакие другие заболевания также не влияют на размер окна). Но, в последнем случае, не знать о своем заболевании просто невозможно, т.к. без серьезных последствий оно протекать не может. Информация о том, что на период окна может влиять прием наркотиков, - не соответствует действительности.

Чтобы окончательно закрыть тему тестов ИФА хочу добавить, что по ряду причин (беременность, некоторые заболевания и др.) этот тест может дать ложноположительный результат (примерно в 1% случаев). Поэтому всегда любой положительный ИФА тест в обязательном порядке перепроверяют на более чувствительном и специфичном тесте - иммуноблоте. Положительный результат иммуноблота после положительного ИФА достоверен на 99,9% - это максимальная точность для любого медицинского теста. И только после такого подтверждение ставится диагноз «ВИЧ инфекция». Если иммуноблот отрицательный, значит, первый тест был ложноположительным, и на самом деле ВИЧ у человека нет.

Итак, для всех, кто собирается делать тест на ВИЧ, я повторю еще раз основной тезис этого поста: окончательную достоверность тест на ВИЧ принимает через 3 месяца после возможного инфицирования. Хотя, в большинстве случаев, если инфицирование все же произошло, тест ИФА станет положительным задолго до окончания этого периода.

UpDt: Чтобы не быть голословным привожу для примера перевод выдержки из французских рекомендаций по тестированию на ВИЧ (http://www.has-sante.fr): "В случае возможного риска заражения ВИЧ, имевшего место менее, чем за 3 месяца до сдачи теста, рекомендуемая стратегия тестирования предусматривает выявление антител к ВИЧ... через 3 месяца после возможного риска либо через 3 месяца после окончания профилактической терапии....Проведение теста на выявление антител через 6 месяцев после предполагаемого риска или окончания профилактической терапии, которое было обязательным, согласно приказу Минздрава Французской республики от 18 января 1993 года, отменено согласно Приказу Минздрава от 1 августа 2007 г."

Тест 4-го поколения на ВИЧ позволяет определить наличие антител к вирусу иммунодефицита человека. Разработаны и используются несколько разновидностей тест-систем, обеспечивающих высокие результаты в ранние сроки инфицирования.

Системы 1-го и 2-го поколений обладают ограниченными возможностями, устанавливая лишь присутствие антител к ВИЧ. Метод ИФА относится к косвенному определению недуга, т. к. не выявляет наличие самого вируса СПИДа.
Второе поколение тест-системы фиксирует антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Основное положение работы ИФА третьего поколения – возможность определять Ig6 и IgM антитела к вирусу СПИДа.
Для теста 4-го поколения на ВИЧ характерна возможность обнаружения не только антител, но и антигена p24. Системы ИФА используют в своей работе вирус, обработанный ультразвуком.

Больного, регулярно сдающего тест на ВИЧ, интересует точность результатов анализа. Тест устанавливает наличие антигена и антитела. Антигены выявляют через 30 дней после того, как определяется РНК в крови методом ПЦР.

Тест на ВИЧ 4-го поколения информативен для врача через 60 дней после заражения вирусом. Точность исследования и специфичность диагностики заключается в количестве, установленном тестом, отрицательных экземпляров.

Чувствительность теста определяется количеством положительных образцов. У 100 людей, инфицированных вирусом СПИДа, при наличии такого же количества положительных результатов чувствительность составит 100%. Особая информативность наблюдается у теста 4-го поколения, когда он выявляет отрицательный результат и не пропускает ни одного инфицированного больного.

Чувствительный тест применяют для скрининга, а специфические методы необходимо использовать для постановки точного диагноза. ИФА исследование относят к скрининговым методам: иммунолог определяет ВИЧ-заражение. Следует помнить, что 100%-ную гарантию точности не дает ни один тест.

Отличия между исследованиями 3-го и 4-го поколений на вирус иммунодефицита человека

Между двумя тест-системами существуют некоторые отличия. Антитела против вируса иммунодефицита человека выявляет 3-я система. Она не затрагивает изучение раннего периода болезни, когда человек представляет потенциальную опасность для партнера и может инфицировать других людей. Тесты 4-го поколения более совершенны, т. к. определяют антигены ВИЧ на ранних сроках заражения вирусом. Между тестированием ПЦР и исследованием 4-го поколения существует определенная связь: они оба имеют высокую чувствительность к возбудителю на ранней стадии инфицирования.

На законодательном уровне разрешено использование тестов 4-го поколения, или АГАТ. Эффективность исследования 3-го и 4-го поколений определяется с помощью сероконверсных панелей. Тест-система 4 определяет количество РНК ВИЧ. Во многих случаях выявляют высокую степень результатов. Показатели вирусного заражения соответствуют диапазону тест-системы 4.

У исследования 3-го поколения диапазон изучения концентрации вируса более узкий, чем у теста 4. Система последнего поколения доступна в использовании, не требует сложного программного обеспечения и обрабатывает в одном комплекте 250 образцов.

Показатели, которые определяет ИФА при ВИЧ-инфицировании

Точную дату заражения вирусом СПИДа определяют через многие месяцы и годы от момента инфицирования. Изучая несколько групп риска, удается добиться более раннего определения времени начала недуга. Чтобы не подвергать здоровье и жизнь опасности, следует ознакомиться со статусом партнера до начала контакта.

Пациентов интересует вопрос о точных сроках, устанавливаемых ИФА 4-го поколения, исключающих ВИЧ-инфекцию. Наибольшее количество антител вырабатывается на 3-4-й неделе от начала заболевания и резко уменьшается к 48-му дню от момента заражения. Тест 4-го поколения через 7 дней может указать единичные антитела в крови. Наиболее благоприятный срок для системы исследования – 30 дней, но официально установлен срок в 6-12 недель от начала риска для здоровья.

Пациенты, имевшие небезопасный контакт, делают анализ на 6-й неделе для исключения ВИЧ-инфицирования.

Период между 3-й и 6-й неделями наиболее опасен для передачи возбудителя, хотя заражение происходит на любой стадии развития вируса СПИДа.

ИФА надежен для диагностики спустя несколько лет после заражения. Сбой в работе системы наблюдается у пациентов в терминальной фазе болезни, имеющих яркую картину СПИДа.

Подтипы, выявленные ИФА, и их распространение

Точность теста настолько высокая, что невозможно не определить редкие подтипы вируса СПИДа. Скрининговая система теста 4-го поколения выявляет подтипы групп О и М. Группы P и N встречаются в единичном числе и могут быть обнаружены системой ИФА 4.

Современная система выявляет антитела к вирусам ВИЧ-2 и ВИЧ-1. Редкие подтипы СПИДа и группы N составляют 9 экземпляров. Подтип P, открытый ИФА 4, встречается в единичном экземпляре. Анализ был неоднократно положительным, характеризовался слабым иммунитетом. Вирус ВИЧ-2 методом ИФА не выделяется в более поздние сроки, т. к. антитела возникают в поле зрения для проведения исследования.

Используемый тест лучше лабораторного устанавливает ложный положительный результат. Тест 4-го поколения выявляют антиген ВИЧ, являющийся составной частью вируса, вызвавшего недуг. Период, при котором невозможно выявить возбудителя, ничтожно мал, а антиген ВИЧ p24 выявляют в крови намного раньше, чем антитела. В более позднее время белок p24 усилен выработкой антител.

Тест 4-го поколения обозначается как «p24» или «антиген-антитело». В некоторых случаях ИФА обнаруживает СПИД через 7 дней после заражения, но общие ориентиры составляют 14 дней – 1 месяц.

Схема проведения тестирования на ВИЧ-инфекцию

Для анализа берут незначительное количество крови из локтевой вены. Исследование проводят через 14 дней после даты предполагаемого опасного контакта. Достоверность результатов не подтверждает анализ ИФА через 3 месяца после инфицирования.

Необходимо заранее подготовиться к сдаче теста. Не следует употреблять пищу перед забором крови и принимать лекарственные средства. Анализ сдают в утренние часы, а после обеда можно узнать о сроках выдачи результата. Если ИФА положительное, необходимо выполнить тест на ПЦР и ВИЧ-инфекцию, т. к. существует вероятность 1% неправильных результатов теста 4-го поколения.

Врач информирует больного о том, что достоверный результат устанавливают через полгода после внедрения вируса в организм. Если данные анализа вызывают сомнение, необходимо вновь осуществить забор крови из вены через 1-2 недели.

Ложноположительный вывод делают при отсутствии вируса, хотя тест указывает на положительный результат. Ложноотрицательный результат – следствие проведения исследования в ранние сроки, через 90 дней с момента заражения ВИЧ-инфекцией.

Решение о проведении теста 4-го поколения принимается больным добровольно, а исследование полностью анонимно и бесплатно. Не допускается принудительный забор крови.

Обязательные случаи тестирования на СПИД с помощью тест-систем

Согласно документам, подтверждающим права человека, не разрешается принудительная сдача крови на ВИЧ-инфекцию. В обязательном порядке проводят анализ лицам, занимающимся донорством биологических жидкостей организма.

Кровь проверяют на вирус ВИЧ-1 и ВИЧ-2, а также на частицы ДНК вируса. После карантина сроком в 6 месяцев кровь вновь проверяют на вирус СПИДа. После получения отрицательного результата ее используют для переливания в медицинских учреждениях. Соблюдается алгоритм тестирования в скрининг-лаборатории. После первого положительного результата проводят двойное исследование с тем же тестом 4-го поколения. После двух положительных тестов исследование продолжают в референс-лаборатории.

Тест на ВИЧ проходят лица без гражданства и иностранцы, въезжающие в Россию. Люди, отбывающие наказания в тюрьмах, сдают анализ на ВИЧ-инфекцию в обязательном порядке.

СПИД – страшный недуг, приносящий ущерб здоровью многих людей. Своевременная диагностика болезни позволит сохранить здоровье и жизнь на долгие годы.